生物技术通报

转基因作物的生态安全性问题及其对策

王延锋;郎志宏;赵奎军;黄大昉;

2010, 0(07): 1-6.

摘要 ( 131 )

PDF (146KB) ( 537 )

相关文章 | 计量指标

随着转基因作物商业化进程的加快,转基因作物的安全性引起了人们越来越多的关注,主要就转基因作物生态安全性问题以及产生的原因进行综述,并提出我国现阶段应采取的对策。

植物响应金属胁迫重要蛋白质的细胞定位

王丹;戴绍军;

2010, 0(07): 7-13.

摘要 ( 146 )

PDF (178KB) ( 762 )

相关文章 | 计量指标

土壤中的Hg2+、Pb2+、Cd2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+、Fe2+/Fe3+等金属离子对植物体具有毒害作用。植物体通过定位于细胞壁、细胞膜,以及各种细胞器中的蛋白质应答重金属胁迫过程。植物体利用细胞壁蛋白质与重金属离子络合,细胞膜系统的转运蛋白与通道调节金属离子运输、细胞器或细胞质基质中的分子伴侣帮助蛋白质折叠等机制完成抑制金属离子进入体内或在体内的解毒等过程。综述了近年来植物响应金属离子胁迫重要蛋白质的细胞定位与作用机制。

酵母异源功能互补在植物基因克隆中的应用

张怡;李成伟;

2010, 0(07): 14-21.

摘要 ( 220 )

PDF (384KB) ( 909 )

相关文章 | 计量指标

酵母作为研究高等真核生物的一种重要的模式生物,不仅在生物信息学方面发挥着重要的作用,其丰富的突变体在其他生物基因克隆和功能验证等方面也发挥着重要的作用。酵母异源互补方法是利用酵母突变体验证相应性状异源基因功能,或通过文库筛选克隆相应性状异源基因,为高等真核生物的基因克隆和功能验证提供了一种捷径。主要对酵母异源功能互补法在研究植物基因方面的进展做一概述。

免疫学技术及其应用

2010, 0(07): 21-21.

摘要 ( 130 )

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<正>(生命科学实验指南系列)"十一五"国家重点图书出版规划项目曹雪涛主编;于益芝孙卫民徐红梅副主编978-7-03-027340-6$138.002010年5月内容简介:本书首先

植物多倍体的研究与应用

陶抵辉;

2010, 0(07): 22-27.

摘要 ( 115 )

PDF (141KB) ( 849 )

相关文章 | 计量指标

多倍化是植物进化变异的自然现象,也是促进植物发生进化改变的重要力量,对植物多倍体的诱导方法、遗传机理进行研究并应用于生产实际,出现了可喜局面。植物多倍体在农作物品种改良及农业生产上的积极作用将非常深远。

植物内生菌的功能研究进展

张祺玲;杨宇红;谭周进;谢丙炎;

2010, 0(07): 28-34.

摘要 ( 283 )

PDF (173KB) ( 1982 )

相关文章 | 计量指标

植物内生菌是一类种类丰富、生物学功能多样的微生物。由于它们与宿主植物长期进化,有了一些特殊的生物学功能。综述了内生菌的系列生物学功能,包括产生活性物质、固氮功能、促进植物生长、增强宿主植物抗性、他感作用、作为外源基因载体等,并总结了内生菌研究中要注意的方面。

DNA标记的种类、特点及其研究进展

刘学军;童继平;李素敏;韩傲男;

2010, 0(07): 35-40.

摘要 ( 167 )

PDF (157KB) ( 814 )

相关文章 | 计量指标

生命的遗传信息存储于DNA序列之中,基因组DNA序列的变异是物种遗传多样性的基础。目前已发展出的DNA标记技术不下十几种,它们各具特色,并被广泛地应用于作物遗传育种、基因定位、亲缘关系鉴别、基因克隆研究等方面。对DNA标记技术进行分类,并作了初步概述。

2009甲型H1N1流感病毒研究进展

刘明;赵海波;田永强;

2010, 0(07): 41-43.

摘要 ( 106 )

PDF (171KB) ( 352 )

相关文章 | 计量指标

2009年3月在美国和墨西哥爆发的新型甲型H1N1流感在很短的时间内便扩散到世界多个国家,形成了流感的大流行,引起世界卫生组织和各国的高度重视。综述新型甲型H1N1流感病毒的基因组来源、目前主要的检测手段,并对预防和治疗的方法进行简单介绍。

猪精液冷冻损伤机理研究进展

宋德荣;王棋文;刘光瑞;张尤嘉;

2010, 0(07): 44-47.

摘要 ( 105 )

PDF (139KB) ( 488 )

相关文章 | 计量指标

阐明降温-升温过程精子损伤的原因是目前冷冻生物学的研究热点之一。借助分子生物学手段,猪精子冷冻损伤研究已深入到分子水平,对在冷冻过程中的损伤机理研究方面取得很大突破。在参考国内外文献的基础上,综述了猪精液冷冻损伤机理在近几年来的研究进展。

Cyclin-CDK-CKI及UPP参与生殖调控及在甲壳动物性腺发育中的研究进展

韩坤煌;张子平;王艺磊;邹志华;

2010, 0(07): 48-54.

摘要 ( 143 )

PDF (436KB) ( 710 )

相关文章 | 计量指标

Cyclin-CDK-CKI是参与真核细胞周期调控的3个重要的调节因子。泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway,UPP)是真核细胞内非溶酶体途径的蛋白质选择性降解的重要途径。细胞周期中许多时相特异性周期蛋白通过泛素化被周期性的降解对于细胞分裂的调控进程具有重要的作用。主要综述了Cyclin-CDK-CKI和UPP的组成、生理生化特性及其参与生殖调控的作用机制,同时阐述了这两大系统之间的联系及其在甲壳动物性腺发育中的研究进展。

转录因子T-bet与Th1/Th2及哮喘的关系

李杰;王志强;

2010, 0(07): 55-58.

摘要 ( 139 )

PDF (265KB) ( 709 )

相关文章 | 计量指标

T-bet特异表达于胸腺细胞和Th1细胞,参与调控机体的免疫应答。随着众多学者对该转录因子研究的深入,发现T-bet的表达与Th1/Th2比例失衡有着密切的关系。而Th1/Th2正是目前哮喘发病机制的研究热点。就转录因子T-bet与Th1/Th2及哮喘的关系作一综述。

微生物源抗菌肽研究概况

陈琛;

2010, 0(07): 59-63.

摘要 ( 150 )

PDF (143KB) ( 1045 )

相关文章 | 计量指标

抗菌肽是广泛存在于生物体内的一种小分子多肽,具有分子量小、高效、稳定、作用机制独特和不易产生耐药性等特点,对细菌、真菌、寄生虫、病毒以及肿瘤细胞均有抑制作用。介绍了微生物来源,尤其是细菌源抗菌肽的结构特点、生物活性、作用机制及其在感染性疾病中的应用情况。

Hsp90抑制剂的研究进展

何彩梅;李海燕;魏大巧;葛若梅;

2010, 0(07): 64-67.

摘要 ( 133 )

PDF (135KB) ( 1933 )

相关文章 | 计量指标

热激蛋白90(heat shock protein90,Hsp90)作为分子伴侣在调节细胞生长、分化、凋亡等方面发挥着重要的作用。Hsp90抑制剂能与Hsp90结合,使其功能丧失,造成细胞的多种生理活动缺陷,在Hsp90功能研究和癌症治疗方面具有潜在的价值。综述了不同来源的Hsp90抑制剂及其作用机制,同时对新型Hsp90抑制剂的来源进行了探讨。

RNA干扰技术的研究进展

何菲;邹凡文;

2010, 0(07): 68-72.

摘要 ( 113 )

PDF (144KB) ( 848 )

相关文章 | 计量指标

RNAi即RNA干扰(RNA interfering)是近几年发现的一种由双链RNA引起的基因沉默的现象,是目前分子生物学领域研究的热点之一。就其作用机制、特点及其在疾病中治疗作用进展方面作一综述。

生物芯片应用概述

夏俊芳;刘箐;

2010, 0(07): 73-77.

摘要 ( 199 )

PDF (296KB) ( 1256 )

相关文章 | 计量指标

生物芯片技术作为新一代生物技术,以其高通量并行分析的优势引起国内外广泛的关注及重视,在各个领域得到广泛的应用,就生物芯片在科学研究、疾病诊断、预防医学、新药开发、司法鉴定、食品安全检测、环境监测、农林科学及军事科学等领域中的应用做简单介绍。

遗传变异分析实验指南

张根发;

2010, 0(07): 77-77.

摘要 ( 115 )

相关文章 | 计量指标

<正>978-7-03-027326-0$88.002010年5月内容简介:本书是冷泉港实验室出版社实验手册系列专着之一。全书共划分为5个部分:第1部分描述研究人员在开始研究之前需要了解的基础,主要是告诉读者正确的遗传研

基因芯片在临床诊断方面的应用

杨蒙;何竹青;

2010, 0(07): 78-82.

摘要 ( 121 )

PDF (278KB) ( 526 )

相关文章 | 计量指标

基因芯片自问世以来,以其操作简单、信息量大、快速便捷等优点迅速受到人们的关注。经过半个世纪的研究发展,基因芯片技术现已广泛运用于科学研究、生活生产的各个领域。现重点介绍基因芯片在临床诊断方面的应用。

p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析

刘超;邱亚峰;沈阳;刘庆伟;马志永;

2010, 0(07): 83-88.

摘要 ( 146 )

PDF (536KB) ( 643 )

相关文章 | 计量指标

利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立稳定沉默p53基因的Vero细胞模型。设计针对p53基因的shRNA序列,构建p53shRNA慢病毒载体并感染Vero细胞;嘌呤霉素筛选阳性细胞,局部消化法挑选细胞克隆;利用RT-PCR和West-ernblot检测p53的表达水平;利用虫荧光素酶报告系统,分析p53的转录激活功能。RT-PCR和Westernblot结果显示,慢病毒介导的shRNA有效地沉默p53基因表达;与对照组细胞相比,干扰组细胞的p53的转录激活功能明显降低。慢病毒介导的shRNA高效、稳定地沉默了p53基因的表达,同时,有效地降低了p53的转录激活功能,为研究p53的生物学功能提供了有利的工具。

TAT-hEGF融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中高效自我表达

智庆文;苗爱玲;

2010, 0(07): 89-91.

摘要 ( 144 )

PDF (222KB) ( 295 )

相关文章 | 计量指标

为了获得TAT-hEGF融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达,构建了原核表达载体pRSET-tat-hegf,将其转化E.coliBL21(DE3)得到重组工程菌BL21(DE3)/pRSET-tat-hegf。工程菌在无IPTG的诱导下实现了高效表达,TAT-hEGF融合蛋白的表达量占总菌体蛋白的45.6%,主要以包涵体形式存在。

细粒棘球蚴FABP基因的原核表达及蛋白鉴定

郝慧芳;王志钢;高连山;赵云龙;白健;金永;周华从;李洁;陈献威;

2010, 0(07): 92-95.

摘要 ( 91 )

PDF (573KB) ( 450 )

相关文章 | 计量指标

构建原核表达载体pET-FABP,优化表达条件,采用免疫学方法鉴定纯化的FABP融合蛋白。载体pMD19-T-FABP和pET-44a(+)经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,将回收的FABP片段与pET-44a(+)连接,构建原核表达载体pET-FABP并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件,纯化FABP融合蛋白,Western blotting鉴定。成功构建了原核表达载体pET-FABP并在大肠杆菌中高效表达。纯化后的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确。构建的表达载体pET-FABP可以在大肠杆菌中大量表达Nus-FABP融合蛋白,为进一步研制FABP亚单位疫苗奠定了基础。

鹅细小病毒结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定

于天飞;仇铮;马波;李俚;王君伟;

2010, 0(07): 96-100.

摘要 ( 96 )

PDF (825KB) ( 594 )

相关文章 | 计量指标

为了对鹅细小病毒结构蛋白B细胞线性抗原表位进行进一步定位,设计了16个覆盖结构蛋白各抗原表位区的长约30个氨基酸残基的重叠短肽,并进行了融合表达。用攻毒10周龄鹅血清对这16个融合蛋白进行蛋白质印迹分析,检测结果表明,VP蛋白线性抗原表位位于35-81、111-161、423-453、462-491、531-577、616-669和678-732氨基酸区域。

小分子RNA表达载体构建的新方法——MicroRNA前体PCR置换法

陈锐;胡正;张辉;

2010, 0(07): 101-105.

摘要 ( 113 )

PDF (540KB) ( 1139 )

相关文章 | 计量指标

MicroRNA(miRNA)基因的终产物是进化上高度保守的、具有基因表达调控功能的非编码小分子RNA。miRNA的特征性发卡环前体(pre-miRNAs)在体内经数步加工后,与AGO蛋白构成沉默复合体(RISC)以行使其功能。如将已知pre-miRNAs上的miRNA成熟链和互补链(miRNA*)分别置换为有待研究的小分子RNA,并构建表达载体转化植株,利用转化株内源的miRNA成熟加工体系,可以产生预设的小分子RNA。利用已知拟南芥miRNA前体为模板,使用替换PCR的方法,人工构建了gso8-ap-miRNA-pBI121表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥,多数T1代植株表现出提早开花的突变表型。该方法是一种简便、高效的构建小分子RNA表达载体的方法。

可见分光光度法测定盐胁迫下玉米幼苗抗氧化酶活性及丙二醛含量

郑世英;商学芳;王景平;

2010, 0(07): 106-109.

摘要 ( 149 )

PDF (203KB) ( 703 )

相关文章 | 计量指标

采用可见分光光度计法研究了盐胁迫条件下,登海9号及掖丹22两个玉米品种的幼苗中SOD、POD、CAT活性及MDA含量变化。根据这些生理指标在不同玉米品种、不同盐浓度处理下的变化规律,探求盐胁迫下玉米幼苗的抗盐生理机制。研究结果表明,随着NaCl处理浓度的提高,玉米幼苗中SOD、POD及CAT活性均有增加;当盐胁迫浓度达到60mol/L时,两玉米品种的SOD活性均达到最高,然后随NaCl处理浓度的增加,SOD活性逐渐降低;当盐胁迫浓度达到40mol/L时,两玉米品种的POD活性均达到最高,然后随NaCl处理浓度的增加,POD活性逐渐降低;当盐胁迫浓度达到40mol/L时,掖丹22的CAT活性达到最高,当盐胁迫浓度达到60mol/L时,登海9号的CAT活性达到最高,然后随NaCl处理浓度的增加,CAT活性逐渐降低。随着NaCl处理浓度的提高,玉米幼苗叶片中的MDA含量均有增加,当浓度大于40mol/L时,增加幅度加大。

大豆种皮过氧化物酶的制备及其在ELISA中的应用

江均平;王金静;张涛;温栾;韩志琴;

2010, 0(07): 110-112.

摘要 ( 121 )

PDF (286KB) ( 486 )

相关文章 | 计量指标

对大豆种皮过氧化物酶(SBP)进行了部分纯化,并对其标记的抗体的效价和稳定性进行了初步测定。大豆种皮用自来水提取,提取液经pH4.5沉淀去杂蛋白、DEAE-cellulose离子交换柱层析以及SephadexG-75分子筛柱层析,最后冻干得SBP制品。用SBP冻干品标记羊抗人IgG,于-20℃和室温保存2周,前者稀释8000倍、后者稀释2000倍可产生较强的信号。结果表明SBP可以用于酶联免疫检测。

番茄E8基因启动子的克隆及其在拟南芥中的表达

张艳云;林卫;李唯;马静芳;王旺田;

2010, 0(07): 113-116.

摘要 ( 118 )

PDF (678KB) ( 870 )

相关文章 | 计量指标

利用PCR技术从番茄基因组DNA中克隆长约1.1kb的E8基因启动子与517bp的E8基因片段,将其二者连接构建植物表达载体,导入农杆菌,通过花序侵染法转化拟南芥,得到转基因拟南芥。用RT-PCR分析转基因拟南芥中E8基因启动子驱动E8基因小片段的结果表明,E8基因小片段mRNA仅在转基因拟南芥长角果中转录,根、茎、叶、花中不转录,提示E8基因的1.1kb启动子在异源植物拟南芥中仍具有驱动外源基因果实特异性表达的特性。

ELISA检测人降钙素基因相关肽在转基因马铃薯块茎中的专一性表达

宋东光;邓日烈;聂呈荣;张英慧;陈淑珍;仇月明;汪训明;

2010, 0(07): 117-119.

摘要 ( 99 )

PDF (240KB) ( 329 )

相关文章 | 计量指标

通过间接ELISA检测了人CGRP基因在转基因马铃薯中的表达。马铃薯class I patatin基因5'侧翼区驱动下人CGRP的表达表现了明显的块茎专一性,茎段中没有检测到CGRP活性,CGRP的表达量在不同转基因株系中有差异,最高达到约50ng/mg可溶性蛋白。

棉花水孔蛋白基因的克隆及序列分析

祝毅;祝建波;张煜星;

2010, 0(07): 120-124.

摘要 ( 101 )

PDF (2479KB) ( 356 )

相关文章 | 计量指标

采用RT-PCR的方法,根据GenBank上公布的棉花水孔蛋白基因序列设计引物,克隆得到4个棉花质膜水孔蛋白基因,分别为GhPIP1;1、GhPIP1;2、GhPIP2;1和GhPIP2;2,测序结果与公布序列的相似性都在98%以上,氨基酸序列在99%以上。这是首次从新陆早系列棉花(Gossypium hirsutum)的叶片中克隆得到,为以后研究棉花的质膜水孔蛋白提供参考。

改良Trizol法快速提取棉叶片总RNA

姚宁涛;祝建波;邓福军;

2010, 0(07): 125-127.

摘要 ( 152 )

PDF (340KB) ( 768 )

相关文章 | 计量指标

棉叶片组织中存在含量较高的棉酚、多糖等次生代谢物质,使用单纯的Trizol很难获得高质量的RNA。首次采用改良Trizol法成功从棉叶片中快速的提取了总RNA,其所提的总RNA完整性好、纯度高,能进一步满足分子生物学的试验要求。

冬虫夏草培养子实体ITS,5.8S的分析及系统发育研究

彭慧超;程大志;王爱珍;王环;王海庆;沈建伟;司庆文;韩发;周党卫;

2010, 0(07): 128-133.

摘要 ( 119 )

PDF (1389KB) ( 1205 )

相关文章 | 计量指标

对野生冬虫夏草的人工培养子实体的ITS1,ITS2和5.8S间区序列进行了克隆,并结合已有的序列对ITS1,ITS2和5.8S进行了系统发育分析。结果表明,人工培养子实体与中华被毛孢(Hirsutella sinensis L95DBM-1)具有96%的同源性,在NJ邻接树上形成明显的一支,与虫草属其它类群种间具有明显差异,表明分离培养的虫草子实体为中华被毛孢。遗传距离分析结果显示,培养虫草序列与已知虫草在种内也存在一定差异,可能暗示虫草种群在不同区域具有一定的遗传分化。

一种适合从柑橘果皮提取总RNA的方法

高雪;

2010, 0(07): 134-136.

摘要 ( 107 )

PDF (202KB) ( 482 )

相关文章 | 计量指标

柑橘果皮由于富含果胶、酚类物质等干扰RNA分离的物质,较难提取到纯度高的RNA。本试验建立了一种适于从柑橘果皮提取RNA的方法,从脐橙和蕉柑两种柑橘的果皮提取总RNA,经凝胶电泳、紫外分光光度法检测所提RNA的品质。研究结果表明,该法所提RNA条带清晰、无降解。OD260/OD280接近2.0,具有较高的纯度。RT-PCR试验结果进一步表明,该法提取的RNA纯度高,完全能够用于后续的分子生物学研究。

橄榄ISSR-PCR反应体系的优化

刘天亮;潘东明;许长同;李开拓;王江波;施维属;

2010, 0(07): 137-141.

摘要 ( 88 )

PDF (543KB) ( 375 )

相关文章 | 计量指标

采用正交设计和单因素试验,以BDB(CA)7为引物,对ISSR-PCR扩增橄榄基因组DNA的主要影响因子进行了筛选和分析,优化了适宜于橄榄ISSR-PCR的扩增体系。结果表明,20μL的反应体系中采用40ng的模板DNA,0.2mmol/LdNTPs,0.25μmol/LISSR引物、1UTaq聚合酶,以及51.6℃-53℃的复性温度为橄榄ISSR-PCR扩增的最优条件。

三角梅ISSR反应体系的建立和优化

李房英;黄彦晶;吴少华;赖钟雄;

2010, 0(07): 142-145.

摘要 ( 122 )

PDF (692KB) ( 460 )

相关文章 | 计量指标

对影响三角梅ISSR-PCR扩增反应的各个参数进行优化,建立适合三角梅的ISSR反应体系:PCR反应体积为20μL,其中10×buffer(含Mg2+)2.0μL,dNTP250μmol/L,Taq酶1.0U,引物0.3μmol/L,模板DNA20ng。扩增程序:94℃预变性5min;94℃变性1min,51.6℃退火1min,72℃延伸2min,34个循环;最后72℃延伸7min。该反应体系标记点位清晰、稳定、重复性好,适宜三角梅ISSR分析,为应用ISSR技术鉴定三角梅种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。

紫茎泽兰提取物对番茄青枯菌的抑菌作用及其机理

李丽萍;谢响明;宋洪英;牛伯庆;

2010, 0(07): 146-152.

摘要 ( 116 )

PDF (510KB) ( 484 )

相关文章 | 计量指标

用紫茎泽兰70%的乙醇提取物及其氯仿萃取物,对番茄青枯菌生理、生化、细胞形态等方面进行抑菌试验。乙酸乙酯、正丁醇、乙醚、氯仿萃取物具有较好的热稳定性,在pH9时抑菌圈最大;通过透射电镜观察,菌体经紫茎泽兰提取物作用后,鞭毛消失,中央出现空腔。SDS-PAGE显示紫茎泽兰氯仿萃取物处理番茄青枯菌后,菌体内蛋白质减少,随着作用时间的延长,完全抑制或破坏了小分子蛋白质的合成,对大分子蛋白质也有一定的抑制作用。POD、CAT、SDH酶活测定显示,随着加入的紫茎泽兰氯仿萃取液浓度的增大,酶活显着降低。以上试验结果表明,紫茎泽兰氯仿萃取液对番茄青枯菌有明显的抑制作用,对于番茄青枯病防治的应用有一定的指导意义。

农杆菌介导的紫茎泽兰遗传转化研究

宋洪英;谢响明;刘忠华;牛伯庆;韩潇;

2010, 0(07): 153-156.

摘要 ( 96 )

PDF (395KB) ( 306 )

相关文章 | 计量指标

以紫茎泽兰为受体材料,GUS基因为报告基因,对农杆菌介导的遗传转化条件及影响因素进行研究,建立了农杆菌介导的紫茎泽兰遗传转化体系。结果表明,将未经过预培养的幼叶外植体在OD600为0.4的稀释菌液中浸泡12min,共培养3d后,转移到加有卡那霉素50mg/L(筛选压)和羧苄青霉素250mg/L的分化培养基上,经过20d外植体直接分化出不定芽,诱导生根成苗。经PCR和组织化学染色鉴定,可稳定获得较高的阳性转化率。

禾本科牧草基因工程技术及应用

米福贵;

2010, 0(07): 156-156.

摘要 ( 89 )

相关文章 | 计量指标

<正>(草业科学研究系列专着)978-7-03-027594-3$70.002010年5月内容简介:本书详细介绍了有关植物基因工程中所应用的工具酶和克隆载体的构建、完整的遗传转化体系的建立、遗传转化方法及转基因

藏红花细胞悬浮培养体系的建立及优化

陈书安;王晓东;袁晓凡;赵兵;王玉春;

2010, 0(07): 157-160.

摘要 ( 112 )

PDF (239KB) ( 643 )

相关文章 | 计量指标

基于诱导的藏红花细胞系,通过摇瓶法,优化了其液体培养基、接种量和种龄等培养条件,以建立藏红花细胞悬浮培养体系。结果表明,将生长在固体培养基上的藏红花愈伤组织接种在MS液体培养基(添加了2mg/L2,4-D,1mg/L6-BA和300mg/LCH)中,于(22±0.3)℃,120r/min的摇床上,暗培养30d,便可获得藏红花的悬浮细胞系。经优化其培养基、接种量和种龄,将种龄为20d的细胞系,按照5%接种量接种在液体B5培养基(添加了2mg/LNAA,1mg/L6-BA和300mg/LCH)中,于(22±0.3)℃,120r/min的摇床上,培养36d,细胞生物量(13.4g/L)和藏红花素产量(0.91g/L)均达到最高。本研究建立的藏红花细胞悬浮培养体系为其生物反应器放大培养奠定了基础。

猪Mitf基因的比较基因组学和进化分析

艾华水;胡小芬;周利华;

2010, 0(07): 161-167.

摘要 ( 181 )

PDF (1174KB) ( 647 )

相关文章 | 计量指标

Mitf(Microphthalmia-associtated transcription factor)是小眼畸形相关转录因子,在黑色素细胞的发育、分化和功能调节上起着重要作用,同时还参与了其它3种细胞包括肥大细胞、破骨细胞和眼色素上皮细胞的发育和分化。针对猪的Mitf基因,从GenBank核酸数据库和proenseml网站下载4条猪的含有Mitf基因片段的基因组序列与牛、人、鼠3种物种的Mitf基因组序列进行比较基因组分析,结果发现,下载的猪Mitf基因组序列或没有排序,或存在一定错误排列。通过生物信息学和比较基因组分析,将猪Mitf基因的基因组序列进行重新组装,得到由6条有序基因组片段组成的较为完整的Mitf基因组序列,并根据人类Mitf基因的转录本信息推测出5种不同猪Mitf基因的转录本。进化分析表明,在人类、小鼠、猪、牛、马和狗中,猪和牛Mitf基因的进化关系最近,提示做猪基因的生物信息学分析可借鉴牛的基因分析结果。

蛋白质组学研究——概念、技术及应用

M.R.威尔金斯;张丽华;

2010, 0(07): 167-167.

摘要 ( 142 )

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<正>(生命科学前沿丛书)(原书第二版)978-7-03-027218-8$48.002010年5月内容简介:在蛋白质组学水平上,对生命活动的功能执行体——蛋白质进行深入系统的研

新生犊牛睾丸细胞体外培养获取类EGC集落

李冬旭;郑鹏;黄贺;田亚光;张贵学;

2010, 0(07): 168-171.

摘要 ( 98 )

PDF (505KB) ( 436 )

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在不同条件下培养新生犊牛睾丸细胞,3-4d生成类似胚胎生殖干细胞(EGC)集落,通过对集落进行形态学观察,免疫荧光细胞化学染色等技术,分析鉴定细胞集落是否为EG细胞集落或精原细胞过渡状态。

再生医学——理论与技术

2010, 0(07): 171-171.

摘要 ( 95 )

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<正>裴雪涛主编978-7-03-027266-0$158.002010年5月内容简介:再生医学是目前备受关注的一个新兴学科,本书以科学、新颖、系统为基准,对干细胞、克隆技术、细胞重编程

牦牛hnRNP K基因的克隆及序列分析

方鸿滨;王永;江明锋;陈达文;

2010, 0(07): 172-178.

摘要 ( 111 )

PDF (1607KB) ( 531 )

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为研究hnRNP K基因的生物学功能及其在牦牛中的特异性,利用RT-PCR和粘性末端连接法,分两段克隆了牦牛hnRNP K基因cDNA序列。序列分析结果表明,牦牛hnRNP K基因cDNA序列长11706bp,开放阅读框(ORF)长1389bp,编码463个氨基酸。序列比对结果表明,牦牛与黄牛hnRNP K cDNA序列的同源性达99.1%,编码的氨基酸同源性达到97.0%;在牦牛氨基酸序列中有15个突变。通过同源建模的方法成功构建了牦牛hnRNP K蛋白质三级结构,结果表明牦牛hnRNP K属于A型结构,而黄牛hnRNP K蛋白属于B型结构,其差异是由第459-463位氨基酸序列由"ADVEG"突变为"SGKFF"所致。乙酰化分析结果显示,牦牛hnRNP K对基因转录的影响水平跟黄牛是一致,表明不同物种hnRNP K功能的差异可能跟其氨基酸序列的差异有关。成功克隆的牦牛hnRNP K基因的cDNA序列为进一步分析该基因的功能提供参考。

狂犬病病毒CVS株糖蛋白、核蛋白生物信息学分析

李江涛;殷相平;张金卫;丁农;柳纪省;

2010, 0(07): 179-184.

摘要 ( 116 )

PDF (995KB) ( 457 )

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对狂犬病毒(rabies virus,RV)CVS株糖蛋白、核蛋白基因进行了克隆与测序,推导出相应的氨基酸序列。后采用Gamier-Robson方法和Chou-Fasman方法预测了蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle方法对蛋白的亲水性进行了分析,用Emi-ni方法预测了蛋白的表面可能性,以Jameson-Wolf方法预测了蛋白的抗原指数;综合分析预测蛋白的B细胞抗原表位。结果表明,糖蛋白在序列的121-126、133-137、161-165、191-193、201-204、214-216、221-225、264-267区域,核蛋白在序列的143-152、166-172、263-273、411-427区域或其附近最有可能是B细胞抗原表位的优势区域。

HBx与肝细胞脂肪变性关系及可能机制的细胞学研究

郑黎黎;沈薇;

2010, 0(07): 185-190.

摘要 ( 102 )

PDF (1096KB) ( 472 )

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从细胞水平探讨乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)与肝细胞脂肪变性的关系,并探讨其可能分子机制。油红O染色及细胞内甘油三酯含量测定鉴定HepG2.2.15细胞和HepG2细胞的脂变程度;Western blotting检测HBx,肝X受体(liver X receptor alpha,LXRα)及脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)蛋白的表达。结果显示,C2.2.15组细胞脂变程度较CG2组细胞重。O2.2.15组细胞在24,48及72h的脂变程度及TG含量均较同一时间段的OG2组增加;Western blotting结果显示,HepG2.2.15细胞内有HBx蛋白表达,而HepG2细胞则无此蛋白表达;C2.2.15组细胞LXRα及FAS蛋白表达强度较CG2组细胞高。HBx蛋白与肝细胞脂肪变性存在密切的关系,其机制可能与HBx/LXRα/FAS信号通路有关。

盐酸普鲁卡因对人肝癌HepG2细胞Syk基因甲基化的影响

高曰文;朱耀明;韩钰;秦烨;朱晨宇;胡汉卿;王艳林;商远方;

2010, 0(07): 191-194.

摘要 ( 106 )

PDF (314KB) ( 455 )

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为探讨盐酸普鲁卡因(procaine,PCA)对人肝癌HepG2细胞Syk基因甲基化的影响,应用巢式双重甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR,MSP)检测盐酸普鲁卡因处理前后HepG2细胞中Syk基因启动子的甲基化水平;采用蛋白印迹技术观察Syk蛋白表达情况。结果显示,MSP检测到人肝癌HepG2细胞中Syk基因发生甲基化,随盐酸普鲁卡因浓度升高和时间的延长Syk基因甲基化水平逐渐降低;蛋白印迹结果表明,Syk蛋白在HepG2细胞中低表达,经盐酸普鲁卡因处理可以上调Syk蛋白的表达。人肝癌HepG2细胞中Syk基因启动子区域发生甲基化可能是肝癌发病的机制之一;盐酸普鲁卡因能降低Syk基因启动子区域CpG岛甲基化,并使Syk蛋白表达上调。

原因不明子宫内膜薄雌激素受体α基因多态性及其表达

乐爱文;单莉莉;袁瑞;董洁;肖天慧;卓蓉;王中海;

2010, 0(07): 195-200.

摘要 ( 107 )

PDF (379KB) ( 439 )

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旨在探讨原因不明子宫内膜薄雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)基因多态性及其与表达的关系。选择120名原因不明子宫内膜薄患者为试验组,120名子宫内膜正常人群作为对照组。应用分子生物学的方法分析ERα基因PvuⅡ,XbaⅠ限制性片段长度多态性。通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分析ERα表达。结果显示,P基因型频率试验组为47.1%,对照组为30.0%,OR值:2.076。试验组X基因型频率为20.8%,对照组为30.4%,OR值:0.602。Pvu II和Xba I限制性片段长度多态性在两组中均呈多态性分布。试验组ERα的mRNA和蛋白质表达均比对照组降低(P<0.05)。由此得出,ERα基因多态性与原因不明子宫内膜薄有关,P等位基因可能是其危险因素,X等位基因可能是其保护因素。ERα在子宫内膜中原因不明子宫内膜薄中的表达低于子宫内膜厚度正常子宫内膜。

溶瘤单纯疱疹病毒的叶酸-聚乙二醇化修饰及其生物学活性检测

韦炜;郭冬薇;方煜翔;薛京伦;郭圣荣;田聆;

2010, 0(07): 201-207.

摘要 ( 127 )

PDF (470KB) ( 828 )

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溶瘤单纯疱疹病毒(oncolytic HSV)是一种重要的具有临床应用前景的病毒,但是该病毒的感染缺乏肿瘤细胞靶向性,因而在相当程度上限制了其进一步的临床应用。首先把特异结合肿瘤细胞表面叶酸受体的叶酸(FA)与聚乙二醇(PEG)进行化学交联,然后用PEG化的叶酸对溶瘤单纯疱疹病毒G207进行共价表面化学修饰,并检测修饰后的病毒FA-PEG-HSV和PEG-HSV的物理和生物学活性。结果显示,FA-PEG-HSV和PEG-HSV的稳定性较未修饰的HSV有所提高,但病毒活力则分别下降为未修饰HSV的22.5%和27.5%,而FA-PEG-HSV对叶酸受体过表达的肿瘤细胞KB的感染效率则比叶酸受体低表达A549细胞提高了300%。以上结果表明,FA-PEG-HSV是一种成功的叶酸受体靶向性溶瘤病毒复合体。

基因克隆与操作

克里斯托弗·豪;李慎涛;

2010, 0(07): 207-207.

摘要 ( 102 )

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<正>(生命科学前沿丛书)(原书第二版)978-7-03-027438-0$55.002010年5月内容简介:本书作者克里斯托弗·豪是剑桥大学植物与微生物生物化学专业的教授,

黑曲霉NRRL3135 bgl基因的克隆及序列分析

陈俊;杨之帆;刘晓黎;方登科;

2010, 0(07): 208-215.

摘要 ( 135 )

PDF (1235KB) ( 478 )

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利用RT-PCR技术从黑曲霉菌株NRRL3135中扩增了β-葡萄糖苷酶(BGL)基因的全长cDNA序列,被命名为bgl3135(GenBank登录号:FN430671)。对该基因编码的BGL进行了同源性分析并预测了其三维构象。试验结果表明,bgl3135的全长cDNA为2598bp,含有一个2583bp的开放阅读框(ORF),编码一个长度为860个氨基酸残基的蛋白质。同源性分析表明,该基因编码的蛋白与来自黑曲霉As3.350和CBS513.88的BGL(GenBank登录号分别为DQ655704和XM_001398779)的相似性最高,其氨基酸序列同源性分别达99%。参照已发表的β-葡萄糖苷酶(BGL)的氨基酸保守序列,判断本研究所克隆的bgl基因属于糖苷水解酶基因家族3的成员。三维结构预测表明,该BGL的立体构象中存在20个α-螺旋和15个β-折叠,对构成和维持酶的底物识别和催化活性位点可能起着重要作用。

产低温纤维素酶放线菌的筛选、鉴定及酶学性质初步研究

李师翁;孔凯;冯佳丽;李梅;台喜生;

2010, 0(07): 216-220.

摘要 ( 113 )

PDF (535KB) ( 537 )

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从青藏高原采集的牦牛粪中,经过CMC平板分离得到一株产低温纤维素酶能力较强的放菌Tibet-YD5227-2,经16S rDNA序列比对分析将其初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces sp.),目前尚无链霉菌产低温纤维素酶的研究报道。Tibet-YD5227-2液体摇瓶培养产生低温CMC酶活力高达145U/mL,最适产酶温度25℃,最适产酶pH值为8.0。酶学性质初步研究显示,Tibet-YD5227-2产生的CMC酶反应温度以35℃左右为适,反应的pH值以8.0左右为适,该菌株所产的纤维素酶在中碱性条件具有较强的稳定性;K+、Fe2+、Mg2+对酶反应有促进作用,Hg2+、Cu2+对酶反应有抑制作用。

高效石油降解菌的筛选及其降解性能研究

徐冯楠;冯贵颖;马雯;王军玲;李美秀;王燕洁;呼世斌;

2010, 0(07): 221-226.

摘要 ( 120 )

PDF (384KB) ( 712 )

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从长期被石油污染的土壤中驯化筛选、分离出2株高效石油降解菌Y-7和Y-9,通过形态学特征的观察和生理生化试验对其进行初步鉴定,鉴定结果分别为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)和芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。同时,研究并分析了不同pH、温度、初始石油浓度、接种量、吐温80等条件对菌体生长和石油降解率的影响。结果表明,在试验条件下,2株优势菌在初始pH为7左右,对石油的降解率可分别高达68.7%,74.5%,偏酸或偏碱的环境均不利于菌体的生长;培养温度对2株菌体生长和石油降解率的影响较大,最佳温度为35℃,降解率达到最大,分别为73.1%和69.6%;石油初始浓度大于0.4g/L时,Y-7降油率从69%降到49%,Y-9基本变化不大,控制石油物质浓度在0.4g/L,有利于对石油的生物处理;最佳接种量为2mL/L;吐温80对石油的降解促进作用有待进一步分析与研究。

心灵之窗——视觉研究的进展、应用与意义

汪云九;

2010, 0(07): 226-226.

摘要 ( 99 )

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<正>978-7-03-027558-5$48.002010年5月内容简介:视觉是人类最为重要的一种感觉。半个多世纪以来,视觉研究取得极大进展,先后有5位该领域科学家获得诺贝尔奖。本书首先用

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