生物技术通报

韩宾;李轶女;易咏竹;张志芳;沈桂芳;

2010, 0(06): 1-5.

摘要 ( 103 )

PDF (146KB) ( 566 )

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差异蛋白质组是蛋白质组学的一个重要分支,通过对蛋白质组表达谱的比较,揭示细胞生理或病理状态的进程与本质,发现具有关键作用的蛋白。近年来,家蚕差异蛋白质组学发展迅速且涉及面广,已然成为家蚕蛋白质组学研究的热点。对差异蛋白质组学的主要研究方法,及在家蚕中的研究进展做一简要评述。

纳米基因载体在植物遗传转化中的应用

孔倩倩;李志辉;王琼;卢孟柱;陈介南;

2010, 0(06): 6-12.

摘要 ( 125 )

PDF (417KB) ( 868 )

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纳米基因载体已成功地应用于生物医学领域并显示了优越的转染效率、良好的生物相容性和有效的基因保护作用。近年来,纳米颗粒作为基因载体在植物转导中的应用潜力越来越受到关注,也为植物遗传工程提供了新的可能性。在阐述纳米载体的特性、在植物细胞中的转导机制及转导优势的基础上,重点讨论了纳米载体在植物转基因中的应用,并对其前景进行了展望。

水稻条纹病毒分子生物学及抗病基因的研究进展

王树磊;赵琦;

2010, 0(06): 13-17.

摘要 ( 104 )

PDF (134KB) ( 420 )

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水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)是水稻条纹叶枯病的致病原。综述了国内外对水稻条纹病毒的基因组结构、复制、转录、功能特点及抗水稻条纹病毒基因研究等方面最新研究进展。

偃麦草属遗传资源的应用研究

闫小丹;李集临;张延明;

2010, 0(06): 18-21.

摘要 ( 181 )

PDF (130KB) ( 710 )

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偃麦草属(Elytrigia)是小麦的野生近缘属,具有许多优良基因,是小麦的三级基因库和小麦性状改良的优异供体之一。综述了偃麦草属基因组的研究和其在小麦遗传育种中的应用。

猪圆环病毒Ⅱ型的研究进展

徐娜;李宝玉;娄忠子;柳纪省;

2010, 0(06): 22-26.

摘要 ( 167 )

PDF (147KB) ( 628 )

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猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus type2,PCV-2)是引起猪圆环病毒病(porcine circovirus desease,PCVD)的主要病原,在猪群中广泛存在。本病毒可以单独或者与其它病原混合感染猪只,引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、育肥猪皮炎与肾病综合征(PDNS)等一系列较为复杂的疾病,严重威胁猪只的健康。经过10余年持续不断的努力,各国对PCV-2的研究日益深入,对病毒的相关特性也有了较为清晰的认识。对病毒的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、病理变化、诊断和防制对策等方面的研究进展进行了简要综述。

骆驼来源单域抗体在免疫治疗中的研究进展

苏幼红;李江伟;

2010, 0(06): 27-32.

摘要 ( 235 )

PDF (265KB) ( 2741 )

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近几年多种单克隆抗体药物已成功上市并用于治疗人类多种疾病,但因单克隆抗体的复杂结构和高昂的生产成本,限制了其在临床上的广泛应用。随着生物技术的进步,使抗体朝着小型化的基因工程单域抗体发展。20世纪末,在骆驼科动物(camelidae)和护士鲨(nurse shark)体内发现一种天然缺失轻链的重链抗体(heavy chain antibody,HCAb),这种特殊抗体的抗原结合位点仅由单一结构域构成。该结构域在骆驼中称为VHH,经基因重组修饰易于进行工程表达,产物即称为VHH单域抗体,具有分子量小,可溶性好,稳定性高及组织穿透力强等优势,在调节免疫功能方面的应用前景更加广阔。就目前国际上对骆驼来源的VHH单域抗体在免疫治疗应用研究的进展情况进行综述,为基因工程单域抗体改造提供新思路。

星形胶质细胞在神经系统疾病中的作用

王磊;

2010, 0(06): 33-36.

摘要 ( 191 )

PDF (144KB) ( 1131 )

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激活的星形胶质细胞会产生和释放的神经递质、神经营养因子和促炎因子等,对神经元既有保护作用,也有毒性作用,在阿尔茨海默病、帕金森症、癫痫、缺血性脑损伤等多种神经系统疾病的发生发展过程中有着重要作用。对近年来国内外有关星形胶质细胞参与神经系统疾病进程的最新研究进展作了综述,并对今后研究工作进行了展望。

乳铁蛋白分子结构及其抗菌机制

朱艳萍;滕达;田子罡;白雪晶;杨雅麟;王建华;

2010, 0(06): 37-42.

摘要 ( 285 )

PDF (346KB) ( 836 )

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乳铁蛋白是一种单体糖蛋白,是哺乳动物非特异性免疫系统的第一道防线,具有防御微生物感染的功能。分析了乳铁蛋白氨基酸组成、多肽链折叠、铁结合结构、分子表面特性等与抗菌有关的分子结构。综述了乳铁蛋白抗微生物活性的作用机制,包括限制Fe3+利用,抑制细菌生物膜形成,与负电性生物大分子结合,降解细菌毒力因子以及阻止细菌入侵等。

缺氧诱导因子与肺癌关系研究进展

胡艳芬;李玛琳;彭芳;

2010, 0(06): 43-47.

摘要 ( 124 )

PDF (151KB) ( 589 )

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缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)是在缺氧条件下广泛存在于人和哺乳动物体内的一种转录因子,在细胞的增殖、存活、血管发生、新陈代谢、肿瘤侵袭和转移等过程中起着重要作用。缺氧是实体瘤的一个重要特征,缺氧诱导因子与肿瘤的发生、发展关系密切,通过分析缺氧诱导因子与肺癌的关系,为研发新靶点的肺癌药物奠定一定的理论基础。

植原体检测与分类研究进展

张松柏;罗香文;刘勇;张德咏;李华平;

2010, 0(06): 48-51.

摘要 ( 117 )

PDF (132KB) ( 299 )

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从20世纪60年代末发现植原体以来,目前已发现的植原体已有300多种,其中有多种植原体危害经济作物。综述了国内外植原体检测方法与分类研究。

微生物聚谷氨酸(γ-PGA)合成酶及合成机理的研究进展

郑重;吴剑光;邱乐泉;钟卫鸿;

2010, 0(06): 52-56.

摘要 ( 189 )

PDF (449KB) ( 1039 )

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γ-PGA是一种可降解的、水溶性的,对人体无毒的生物高分子。目前发现多种微生物能合成γ-PGA,包括芽孢杆菌、古生菌和一种真核生物。γ-PGA合成基因可分为capB、capC、capA、capE和pgsB、pgsC、pgsA和pgsE,其表达产物组成的γ-PGA合成酶复合体与细胞膜结合,并消耗ATP及底物谷氨酸进而合成γ-PGA,其中CapB-CapC(或者PgsB-PgsC)主要负责γ-PGA的聚合作用,而CapA-CapE(或者PgsA-PgsE)则作用于γ-PGA的转运。ComP-ComA、DegS-DegU、DegQ、SwrA和pgsB上游的非编码区则对pgsB、C、A和E的表达起重要影响。

蛋白质复合体非变性凝胶电泳技术及其应用新进展

孟庆石;张光祥;潘映红;

2010, 0(06): 57-64.

摘要 ( 199 )

PDF (177KB) ( 1895 )

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非变性凝胶电泳技术是研究蛋白质复合体的强有力工具。重点介绍了蓝绿温和非变性凝胶电泳(BN-PAGE)技术的原理和特点,比较了由BN-PAGE衍生的蓝色温和琼脂糖凝胶电泳、清澈温和非变性凝胶电泳(CN-PAGE)和高分辨清澈温和非变性凝胶电泳(HrCN-PAGE)技术的差异和适用范围,并概括地介绍了这些技术在植物蛋白质复合体研究中应用的新进展。

差异凝胶电泳技术的发展及其在生物学领域的应用

高宇;陈利珍;梁革梅;迟德富;

2010, 0(06): 65-70.

摘要 ( 142 )

PDF (146KB) ( 652 )

相关文章 | 计量指标

差异凝胶电泳技术是建立在双向电泳技术基础之上、采用3种荧光染料同时对蛋白样品进行标记、进而进行蛋白质表达量差异统计学分析的技术,具有更高的敏感度以及精确的定量能力。综述了差异凝胶电泳技术的基本原理、优缺点,概括了该技术在国内外生物学领域的应用现状,并对该技术的未来发展前景进行了展望。

MSAP技术在植物抗逆性方面的应用

韩雅楠;赵秀娟;蔡禄;

2010, 0(06): 71-74.

摘要 ( 134 )

PDF (147KB) ( 755 )

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DNA甲基化在植物的生长发育中起着重要的作用。近年来,随着对DNA甲基化研究的重视,基于PCR方法检测DNA甲基化水平的甲基化敏感扩增多态性技术(MSAP)得到广泛的应用。综述了MSAP技术在植物的生物与非生物胁迫研究方面的应用。

猪流感的诊断技术研究进展

李国娟;柳纪省;李宝玉;田永强;

2010, 0(06): 75-79.

摘要 ( 111 )

PDF (144KB) ( 540 )

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猪流感是由猪流感病毒引起的一种猪的急性、高度接触性呼吸道传染病,不仅给畜禽养殖造成重大经济损失,而且还对人类健康造成威胁,因此快速、敏感、准确诊断猪流感,具有重要的经济价值和公共卫生意义。从传统的实验室诊断技术和分子生物学诊断技术两方面综合阐述了猪流感的诊断研究进展。

应用平衡透析法分析药物小分子与蛋白质相互作用

李瑞光;陈历俊;姜铁民;徐晨;

2010, 0(06): 80-84.

摘要 ( 138 )

PDF (143KB) ( 1751 )

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蛋白质的相关信息一直是生命科学研究的重点,其中药物小分子与蛋白质的相互作用成为近年来的研究热点。平衡透析法是研究药物小分子与蛋白质相互作用的经典方法,通过该方法可以定量的讨论药物小分子与蛋白质结合的结合数量、结合常数。就平衡透析法用于分析药物小分子与蛋白质的作用方式、作用模型及国内外研究进展进行综述。

分子生物学技术在链霉菌分类中的应用

张楠;张本峰;于建;刘训理;

2010, 0(06): 85-89.

摘要 ( 155 )

PDF (157KB) ( 799 )

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随着分子生物学的飞速发展,分子生物技术在链霉菌的分类方法中起到了越来越重要的作用,分子分类使链霉菌的分类从传统的表型分类进入到各种基因型分类水平,基因型分类结合表型和系统发育的特征所组成的多相分类,能更客观合理地反映生物间系统进化关系。分子分类研究主要包括(G+C)mol%测定、DNA杂交、核酸结构分析、DNA指纹图谱分析和变性梯度凝胶电泳等。

DGGE技术在动物胃肠道微生物研究中的应用

尹永志;郭春华;黄艳玲;常晶;艾丹;王永;付锡三;朱万岭;

2010, 0(06): 90-94.

摘要 ( 115 )

PDF (136KB) ( 599 )

相关文章 | 计量指标

变性梯度凝胶电泳(DGGE)是通过聚丙烯酰胺凝胶中变性剂浓度梯度的不同,将序列不同的DNA分开。目前,该技术已广泛应用于瘤胃微生物、肠道微生物等多样性研究。综述了变性梯度凝胶电泳技术的基本原理、优缺点及其在动物营养中的应用。

转基因水稻外源基因的漂移研究

姜大刚;梁奕涛;黄靖;陈源鑫;蔡雁捷;姚涓;周峰;梅曼彤;

2010, 0(06): 95-99.

摘要 ( 154 )

PDF (402KB) ( 415 )

相关文章 | 计量指标

转基因水稻基因漂移可能带来环境安全性问题。利用农杆菌介导,把hpt基因转化水稻品种,通过后代筛选,以稳定遗传的含单拷贝转化株系为转基因花粉供体材料,研究转基因水稻向非转基因水稻不育系和常规稻(花粉受体)的外源基因漂移频率。结果表明,相邻种植时转基因水稻向雄性不育系品种的漂移频率为31.74%。随距离的增加漂移频率明显下降,在26m处仍能够检测到含外源基因个体的存在,并且在距离4m处出现一个漂移频率的升高;转基因水稻向常规品种的漂移频率则明显低于不育系,一般在2.0%以下,随距离的增加也呈现下降的趋势,在18m处开始无法检测到含外源基因的个体。

麦冬基因组DNA提取方法研究

王冠明;韩烈保;马秀杰;程晓霞;

2010, 0(06): 100-106.

摘要 ( 119 )

PDF (527KB) ( 565 )

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为了从富含多糖、多酚的顽拗植物麦冬中分离出高质量基因组DNA,分别建立了改良CTAB法和改良SDS法。通过使用核分离液和CTAB/NaCl溶液、提取液中加入0.35倍体积无水乙醇等最大限度地除去杂质。将两种方法提取的8种麦冬DNA与两种离心柱式试剂盒提取的DNA在纯度、产率等方面进行对比,并进行双酶切和SRAP分析。麦冬类植物SRAP反应体系的建立尚属首次。结果表明,改良CTAB法和改良SDS法均能从8种麦冬叶片中提取到高质量的基因组DNA,改良CTAB法提取纯度更高,提取幼叶DNA纯度可以与离心柱式试剂盒媲美,能够满足多种分子生物学试验要求。在后续试验中,用改良CTAB法从20多种沿阶草族植物中提取到了高纯度DNA。该方法通用性好,提取的DNA纯度高,对其他顽拗类植物基因组DNA的提取具有借鉴意义。

利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建

孙辉;祝建波;

2010, 0(06): 107-112.

摘要 ( 111 )

PDF (974KB) ( 617 )

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利用NCBI、Bloekmaker、CODEHOP、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计简并引物并利用简并引物RT-PCR,首次从天山雪莲中克隆到474bp的PIP基因cDNA片段,命名为sikPIP,其与GenBank中非洲杂交菊PIP基因氨基酸序列的同源性高达93.0%。从上述序列中选取200bp的序列,利用2对同尾酶将正义片段和反义片段插入到植物表达载体CAM2300-35S-Ocs中,成功构建天山雪莲RNAi载体CAM2300-35S-Ocs-sikPIP。为接下来的遗传转化,进一步探明sikPIP基因在天山雪莲中的功能奠定了基础。

盐胁迫下甘菊叶片中BADH基因表达及甜菜碱含量的变化

曹华雯;牛雅静;黄河;戴思兰;

2010, 0(06): 113-120.

摘要 ( 92 )

PDF (1037KB) ( 391 )

相关文章 | 计量指标

利用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和雷氏盐紫外分光光度计法分别测定了400mmol/L NaCl胁迫处理0,0.5h,2h,12h,1d,2d,4d,6d,8d,10d和12d,甘菊叶片中BADH基因表达和甜菜碱含量的变化,并讨论了二者间的相互作用关系。试验结果表明,在高盐胁迫下甘菊叶片中BADH基因和甜菜碱含量均呈现先上升后下降的趋势。在处理初期(0.5h和2h)BADH基因的表达量与对照相比略有下降,此后随处理时间的增加BADH基因表达持续增大,在胁迫处理6d时BADH基因表达量最大为对照的4.6倍,6d之后BADH基因表达量逐渐降低。甜菜碱含量在NaCl处理0.5h突然增大以应对胁迫反应,此后其含量出现了小幅的震荡上升,在胁迫处理4d时达到了最大值,此后随胁迫处理时间的增加甜菜碱含量逐渐降低。二者之间的变化并不是同步的,而是存在滞后性,分析认为甘菊叶片中BADH基因表达与甜菜碱积累间存在相互抑制的作用。

香蕉凝集素BanLec基因转化毕赤酵母及转化子的鉴定

陈石;李春雨;郑加协;周红玲;颜元培;方志坚;易干军;

2010, 0(06): 121-123.

摘要 ( 131 )

PDF (157KB) ( 504 )

相关文章 | 计量指标

以pMD-BanLec质粒为模板扩增BanLec基因片段,该片段经EcoR I/XbaI双酶切后定向克隆到同样经EcoRI/XbaI双酶切的pPICZα表达载体上。将连接产物转化感受态DH5α,用低盐Zeocin抗性LB固体培养基筛选阳性克隆菌落。将重组质粒电转化毕赤酵母菌GS115后,通过PCR鉴定目的基因整合入酵母菌的基因组中,将有助于进一步研究BanLec蛋白的表达,为探讨香蕉凝集素的活性及生化功能等奠定基础。

分子标记对草原野生食用菌蒙古口蘑的鉴别分析

刘芳;朱兵;于景丽;赵吉;

2010, 0(06): 124-129.

摘要 ( 131 )

PDF (651KB) ( 428 )

相关文章 | 计量指标

对采自内蒙古锡林郭勒草原的野生食用菌蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai.)等10个菌种进行了ITS和ISSR分子标记的鉴定,其中蒙古口蘑共计4个不同来源菌种,其它6个菌种为子实体与蒙古口蘑形态相近的常见草原菇类或市售食用菌,鉴定结果用RAPD进行辅助分析验证。从12条ISSR引物中筛选出2条可用引物,扩增总条带数为246条,多态性标记为215个,多态性频率为87.4%。经过NT-SYS软件聚类分析,发现在ISSR分析中结合ITS方法可以有效地将蒙古口蘑与其它菌种区分开,这与RAPD法的分析结果相一致,获得了可靠的野生食用菌分子标记方法。研究表明ISSR分子标记是蒙古口蘑等野生食用菌鉴定的理想手段之一。

野生毛木耳ISSR-PCR反应体系的建立与优化

杜萍;崔宝凯;戴玉成;

2010, 0(06): 130-137.

摘要 ( 123 )

PDF (920KB) ( 582 )

相关文章 | 计量指标

为获得条带清晰,重复性好,多态性高的野生毛木耳ISSR扩增结果,通过单因子试验对ISSR-PCR反应条件进行了优化。确定了ISSR分析的最佳PCR条件:25μL反应体系中模板DNA25ng、dNTPs0.24mmol/L、Taq DNA聚合酶1U、Mg2+0.9mmol/L、引物2μmol/L、10×PCR buffer2.5μL、ddH2O12.6μL。最佳退火温度因不同的引物而定,最佳循环次数为35次。在此基础上初步筛选出25条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。这一优化体系的建立为进一步利用ISSR标记技术进行野生毛木耳种质鉴定及遗传多样性分析提供了一个适合的程序。

科学出版社新书

2010, 0(06): 137-178.

摘要 ( 137 )

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<正>进化(英)巴顿等着宿兵等译978-7-03-027175-4$168.00元(含光盘)2010年4月出版内容简介:本书是一部全面、系统介绍进化生物学的教科书。本书的作者均是多年从事进化生物学研究并对本领域有卓越贡献的欧美学者。本书涵盖了进化生物学的产生和发展的历史,从西方早期的自然神学到达尔文的进化论。本书介绍了进化生物学的重要科

高纯度白介素-3与假单胞菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及质谱鉴定

廖乐乐;娄世锋;曾翰庆;白凤霞;

2010, 0(06): 138-141.

摘要 ( 106 )

PDF (350KB) ( 377 )

相关文章 | 计量指标

旨在利用简单的表达纯化工艺,获得纯度较高、有活性的重组免疫毒素IL3-PE38KDEL并对其物理学及免疫学性质进行鉴定。利用PQE30-IL3-PE38KDEL/SG12009工程菌表达重组免疫毒素IL3-PE38KDEL,在提取包涵体后经一步强阳离子柱层析得到纯度较高的免疫毒素复性纯化产物,用Westenblotting、质谱、氨基测序等先进技术对产物鉴定。结果显示,发酵后目的蛋白表达量占总菌体的17.56%,经强阳离子柱层析纯化复性后的目的蛋白纯度达到90%以上,Western blotting、质谱、氨基测序结果均表明,纯化产物分子量为54.9kD且具有相应的免疫学活性,序列与预期序列完全一致。纯化复性方法对重组免疫毒素IL3-PE38KDEL的生物性质及纯度有较大影响,因此选择一种适当的纯化复性方法至关重要。

BSP基因RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231BO细胞生物学特性的影响

燕慧;王捷;杨自飞;张宏斌;夏冰;冼江;王江涛;

2010, 0(06): 142-145.

摘要 ( 116 )

PDF (300KB) ( 500 )

相关文章 | 计量指标

旨在研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因表达后对人乳腺癌细胞MDA-MB-231BO生物学特性的影响。应用pSilencer5.1-U6Retro构建针对BSP基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒,将重组质粒转染293细胞制备病毒悬液感染MDA-MB-231BO细胞,利用嘌呤霉素筛选抑制BSP表达的乳腺癌细胞。Western blotting检测细胞内BSP蛋白表达,采用MTT法和集落形成试验检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果显示,成功构建BSP基因RNAi稳定转染的231BO-BSP27细胞。231BO-BSP27细胞内BSP蛋白表达抑制率为69.3%,与对照组细胞相比,231BO-BSP27细胞的生长速率和克隆形成率明显降低;S期细胞数量明显减少,G0/G1期细胞增多。由此证实,逆转录病毒介导的RNAi能实现BSP基因稳定沉默,从而抑制MDA-MB-231BO细胞的生长和增殖。

原子力显微镜对人羊膜间充质干细胞成脂分化的观察

陈茜;肖盼;陈剑;蔡小芳;蔡继业;

2010, 0(06): 146-151.

摘要 ( 108 )

PDF (1005KB) ( 501 )

相关文章 | 计量指标

观察人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)成脂分化前后超微结构及其机械性能的变化,以期进一步了解hAMSCs在体外成脂分化的过程。用流式细胞仪分析细胞表面分子表达情况,油红O染色检测hAMSCs成脂分化情况,原子力显微镜观察(AFM)分化前后超微结构及机械性能的变化等。结果显示,流式细胞检测显示,CD34,CD45,HLA-DR,呈阴性表达,CD29,CD90呈阳性表达;油红O染色可见脂肪细胞胞质中有大小不等的圆性红色脂肪滴;AFM观察诱导后的hAMSCs表面有脂滴状的颗粒,粘弹力增大,硬度减小。运用AFM可以清晰观察到诱导前后形貌及机械性能变化。

保存动物组织内RNA的方法改进

王华;李华;

2010, 0(06): 152-155.

摘要 ( 127 )

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以大鼠为试验材料,用Trizol法提取动物组织内的RNA,通过比较得到,存放于250mmol/L柠檬酸钠,40mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),4.5mol/L硫酸铵,200mmol/L异硫氰酸胍的pH5.5保存溶液中的动物组织中的RNA与常规保存方法保存的动物组织提取的RNA质量的相比,在上述保存液中保存的动物组织可以得到质量高、完整性好的总RNA,RT-PCR分析显示提取的总RNA反转录的cDNA完整、活性高,这种方法具有快速、简单、方便的特点。

鸡传染性支气管炎病毒ZZ2004分离株3a、3b及E基因的序列测定与分析

姚四新;王宪文;周晓丽;刘兴友;刘金华;

2010, 0(06): 156-160.

摘要 ( 112 )

PDF (634KB) ( 372 )

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采用随机引物PCR技术从具有腹泻、呼吸道症状及肾脏病变的肉鸡及无明显症状但生长迟缓的鸭体内获得一段长1171bp的片段,将此片段克隆入pMD18-T载体,测序后将序列用网上的BLAST软件和DNASTAR软件进行分析,结果表明所测序列与IBV主要参考毒株的同源率为82.0%-94.4%,与国内主要毒株CK/CH/LGD/04III、CK/CH/LGD/04II、chicken/JS/YZ07/2008、CK/CH/LSC/99I、SAIBK的同源率较高,达92.4%-94.4%,与国外毒株M41、H120、Beaudette、IBV4/91的同源性较低达85.2%-87.9%,从而确定所分离毒株ZZ2004为肾型传染性支气管炎病毒。

clGH与EGFP基因融合表达载体的构建及其在斑马鱼胚胎发育阶段的表达

杨学明;郑凯迪;陈桂来;蒋和生;李云;

2010, 0(06): 161-166.

摘要 ( 106 )

PDF (739KB) ( 507 )

相关文章 | 计量指标

以模式动物斑马鱼(Danio rerio)为材料,研究了革胡子鲶生长激素(growth hormone of clarias lazera,clGH)基因的表达。以clGH基因为外源基因,以增强型荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因为报告基因,通过体外酶切和连接,构建了含有这两个基因的融合表达载体pCEGFP-clGH。通过显微注射方法,将pCEGFP-clGH转入斑马鱼受精卵进行表达。结果显示,成功得到了携带外源clGH基因的转基因斑马鱼,并可在胚胎发育的不同阶段(0-72h)观察到绿色荧光,荧光表达率分别为7.2%,45.7%,71.7%和8.5%;外源基因的表达特点为嵌合型、瞬时表达;外源基因最早在斑马鱼胚胎发育的囊胚期(3h)开始表达,在注射后24h达到最强,在仔鱼孵出前后(72h)表达水平降至最低。本试验构建的融合表达载体正确,为今后进一步研究clGH基因的功能及利用clGH基因进行快速生长转基因鱼的培育提供参考。

水貂GH基因SNP_S与皮张长度的相关性研究

李玉梅;丁雪梅;史旭东;赵云;唐鸿宇;赵志辉;

2010, 0(06): 167-171.

摘要 ( 91 )

PDF (359KB) ( 412 )

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以水貂生长激素(GH)基因作为控制水貂皮张长度性状主基因的候选基因,以大兴安岭水貂养殖基地养殖的水貂群为试验材料,通过PCR-SSCP方法对GH基因进行多态性检测。在该基因内含子1中发现1处碱基突变:C→A,并检测到3种基因型(AA、AB、BB),BB基因型个体与AA基因型个体皮张长度有一定的差异(P<0.05)。在外显子2中发现2处碱基突变:T→A、C→G,并由此检测到了3种基因型,分别命名CC、CD、DD,但3种基因型对水貂皮长的影响没有显着的差异(P>0.05)。统计各基因型之间的组合给水貂皮长带来的影响时,发现多数组合基因型对所检测的水貂皮长有显着影响(P<0.05)。

基于28S rDNA部分序列的石磺科系统发育研究

陈诚;沈和定;吴文健;魏峦峦;王玲;

2010, 0(06): 172-178.

摘要 ( 99 )

PDF (719KB) ( 545 )

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采用PCR技术对采集自中国大陆沿海5地8个群体石磺的28S rDNA部分序列进行扩增。将测序结果与Gen-Bank中的另外3条石磺科贝类的对应序列一起,以小鼠28S rDNA基因序列进行参照,截取D1、D2、D3区域,拼接后进行比对分析。在获得的689bp的序列中,有76个变异位点,28个简约信息位点,A+T平均含量为30.9%,C+G平均含量为69.0%。以分类关系较近的菊花螺科(Siphonaria alternate)为外群,用NJ、MP、ML和贝叶斯法构建分子系统树。4种方法得到的进化树拓扑结构很相似,得到的结果也与沈和定提出的中国大陆沿海石磺科贝类可划分为Peronia、Platevindex、Onchidium、Paraoncidium4个属的观点基本一致。同时,28S rDNA部分序列的系统分析还显示,4个属中Peronia属与Paraoncidium属亲缘关系较近,Platevindex属与Onchidium属关系比较近。

基于CHD基因序列的隼形目12种鸟系统发育关系

刘铸;杨春文;田恒久;金建丽;金志民;鞠永富;

2010, 0(06): 179-184.

摘要 ( 150 )

PDF (308KB) ( 676 )

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对12个隼形目物种CHD基因的一段内含子序列进行比较和分析。CHD-W和CHD-Z基因的多态性存在差异,CHD-W基因不适合系统发生学的研究。通过对CHD-Z基因扩增序列构建的NJ和MP树,结果显示隼科鸟类与鹰科和鹳科鸟类关系较远,与传统形态分类和和鸟类新的分类系统不一致。在白腹鹞的分类地位上与传统形态学分类不一致,将白腹鹞归入鹰属一支。NJ树显示鸢属(黑鸢)与鵟属(毛脚鵟)亲缘关系较近,MP树显示鵟鹰属(灰脸鵟鹰)与鵟属(毛脚鵟)亲缘关系较近。NJ和MP树都显示雕属(金雕)和鹰雕属(鹰雕)与其他鹰科各属亲缘关系较远。

直流电场对铜绿假单胞菌PKE117产酶及降解性能的影响

杨金水;刘辰;王光溢;赵雪云;李宝珍;袁红莉;

2010, 0(06): 185-188.

摘要 ( 128 )

PDF (498KB) ( 405 )

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研究了铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa PKE117在直流电场作用下的生长、产酶情况以及电场对其木块降解率的影响。结果表明,在5mA,10mA和20mA的弱直流电场条件下,不同的电流强度对菌体的生长没有显着影响,但是弱电场可改变细胞通透性,从而改变了PKE117的胞外酶类型及产量,在10mA下PKE117对长白落叶松的降解率到达最大值,为6.98%。

嗜热土芽孢杆菌GSEY01及其高温蛋白酶的初步研究

廖艳江;季秀玲;魏云林;林连兵;

2010, 0(06): 189-194.

摘要 ( 112 )

PDF (396KB) ( 373 )

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从云南腾冲热海热泉中分离出一株产高温蛋白酶的菌株GSEY01。该菌株最适生长温度为60℃,16S rRNA基因序列分析表明,该菌株为土芽孢杆菌属(Geobacillus)的耐热菌株。该菌株所产高温蛋白酶可以通过超滤浓缩,硫酸铵分级沉淀和强阴离子交换层析获得纯酶。此高温蛋白酶分子量约为42kD,最适催化温度为80℃,最适催化pH7.5,Mg2+能增强该酶活力,Fe3+,Cd2+和Ni2+对其活性则有抑制作用。PMSF对该酶影响较小,乙二胺四乙酸(EDTA)和十二烷基磺酸钠(SDS)则对其有强烈的抑制作用,此高温蛋白酶和其他土芽孢杆菌所产蛋白酶有较大差异,可以应用于相关的高温催化环境。

植物阿魏酸-5-羟化酶生物信息学分析

李嘉;孟庆雄;

2010, 0(06): 195-201.

摘要 ( 188 )

PDF (1833KB) ( 679 )

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阿魏酸-5-羟化酶(F5H)是木质素生物合成的关键酶之一,它依赖于细胞色素P450催化阿魏酸在5位上发生羟基化反应。采用生物信息学的方法和工具对在GenBank上注册的拟南芥(Arabidopsis thaliana)、油菜(Brassica napus)、杨树(Populus trichocarpa)、番茄(Lycopersicon esculentum)、紫苜蓿(Medicago sativa)、喜树(Camptotheca acuminate)等植物的阿魏酸-5-羟化酶基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,包括组成成分、氨基酸翻译后修饰、跨膜拓扑结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二级功能结构域等进行分析预测和推断。结果表明,植物F5H是一个具有跨膜结构域的亲水性蛋白,存在于内质网等分泌途径中,α-螺旋和不规则卷曲是其二级结构的主要结构元件,具有细胞色素P450家族特征性结构域及保守功能域。

两种检测生鲜乳中β-内酰胺酶方法的比较

康海英;王加启;卜登攀;魏宏阳;李旦;刘开朗;王俊;刘萍;

2010, 0(06): 202-205.

摘要 ( 99 )

PDF (226KB) ( 572 )

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采用Unisensor试剂盒法和杯碟法对22份来自不同奶站的生鲜乳中β-内酰胺酶进行了检测,指出了两种方法各自的优点和缺点。β-内酰胺酶检测过程中,两种方法应配合使用,简便、快捷的Unisensor试剂盒法可以做现场及快速检测,杯碟法可以对Unisensor试剂盒法的检测结果进行确证。

α-葡萄糖苷酶高产菌株HB-9-5的选育及产酶条件的优化

谢振荣;慕跃林;闫丽娟;赵春雷;黄遵锡;

2010, 0(06): 206-211.

摘要 ( 107 )

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从土壤中筛选出一株高产α-葡萄糖苷酶的细菌HB-09-5,对其粗酶液进行研究发现,最适反应pH为6.0,最适反应温度为50℃,pH在4.0-7.0,温度在55℃以下保持酶活力相对稳定。通过对产酶条件进行优化,单因素试验表明,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为牛肉膏,Mg2+和Ca2+对产酶有促进作用。优化发酵条件后,菌株HB-09-5产酶水平可达到20.95U/mL,比出发菌酶活提高了2.3倍。

休哈塔假丝酵母发酵木糖制乙醇过程研究

李芳芳;郭瓦力;王建武;丁东各;于涛;

2010, 0(06): 212-216.

摘要 ( 126 )

PDF (565KB) ( 314 )

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木质纤维素原料水解产物的主要成分是葡萄糖和木糖,其中葡萄糖很容易发酵,致使木糖成为木质纤维素发酵的关键,休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)1766是自然界木糖发酵性能较好的天然酵母之一。研究了发酵温度、发酵时间、接种量、初始pH值、摇床转速等因素对休哈塔假丝酵母1766发酵木糖生产乙醇的影响,由正交试验初步确定了休哈塔假丝酵母发酵木糖制乙醇工艺的适宜条件为好氧条件,发酵时间为2d,发酵温度为28℃,摇床转速为150r/min,初始pH值为5,此时乙醇收率最高可达68.62%。

利用重组大肠杆菌生产人生长激素发酵工艺的研究

朱振洪;葛立军;刘文洪;

2010, 0(06): 217-221.

摘要 ( 184 )

PDF (657KB) ( 634 )

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在摇瓶培养和发酵罐培养条件下,研究了E.coli/BL21(DE3)/pET30a(+)-hGH工程菌的不同发酵工艺条件。确立了该工程菌的最优化工艺参数:M9-2培养基,37℃、pH值为6.8-7.4、诱导起始菌体密度为OD600达3.0-4.0,IPTG浓度为1mmol/L,诱导时溶氧控制为50%以上,补料为10%甘油、5%Yeast extract和5%Tryptone。该工艺条件经过连续三批发酵,证实稳定可行,目的蛋白在胞间质呈可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的20%以上。

禽类饲用芽孢杆菌的筛选及固体发酵条件优化

王振宇;苏振成;黄乾明;杨日桓;孙健;张惠文;

2010, 0(06): 222-226.

摘要 ( 123 )

PDF (183KB) ( 442 )

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筛选得到3株适用作为禽类饲料添加剂的枯草芽孢杆菌,分别命名为B395、B605和BM1。该3株菌株均能够在42℃正常生长,能抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,且能耐受0.3%胆盐,能产生淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶。通过饲喂试验,观察到菌剂组可明显促进肉鸡生长,有效降低料肉比。选取B395作为试验菌株,以培养后活菌数为指标,得到其最佳固体发酵条件为麦麸∶稻糠为3∶2、葡萄糖0.5%、尿素2%、KH2PO40.5%,含水量45%、接种量5%、温度37℃、培养时间3d。按上述培养条件,对B395进行培养,摇瓶式发酵可使活菌数可达到(1.3±0.1)×1010CFU/g,浅盘式发酵可使活菌数达到(1.3-1.4)×1010CFU/g;并对B605和BM1进行培养,得到活菌数均超过109CFU/g。

木聚糖酶高产黑曲霉的选育及其酶学性质研究

王聪;张光杰;

2010, 0(06): 227-230.

摘要 ( 124 )

PDF (331KB) ( 416 )

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木聚糖酶是一种可以将木聚糖水解为木二糖和木二糖以上的低聚木糖,以及少量木糖和阿拉伯糖的组酶,在饲料、食品和造纸等行业具有广阔的应用前景。研究了紫外选育得到的一株木聚糖酶活力比较高的黑曲霉突变菌株Aspergil-lus niger N86的最佳产酶条件及其酶学性质。

产河豚毒素菌株的分离鉴定

王少蓉;郁昂;

2010, 0(06): 231-233.

摘要 ( 118 )

PDF (213KB) ( 418 )

相关文章 | 计量指标

从厦门同安海域的黄鳍东方豚(Fugu xanthopterus)卵巢组织中分离纯化出59株菌株,通过小鼠试验筛选出11株产毒菌株,并对其中产毒能力较强的EL10菌株的发酵产物进行高效液相色谱分析,初步认定发酵产物中含有河豚毒素。同时对EL10菌株进行16S rDNA鉴定,结果表明该菌属于希瓦氏菌属(Shewanella)。

青藏高原药用植物内生细菌多样性研究

马芸;谢占玲;李德英;马志杰;

2010, 0(06): 234-239.

摘要 ( 127 )

PDF (622KB) ( 444 )

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采用传统的分离方法和分子生物学的技术,对我国青藏高原药用植物党参、黄芪、连翘的内生细菌进行遗传多样性的研究,共分离到42株内生细菌,分属于9个属,其中微球菌属(Micrococcus sp.)为此类群的优势菌群。所分离到的所有菌株均属于兼性嗜碱菌和耐盐菌,这也反映了青藏高原高盐碱性的土壤性质。所分离到的3种药用植物内生细菌均对抗生素有一定的抗性,也证明了药用植物内生细菌与药用植物本身一样,具有某些抗药活性。

光合细菌混合培养条件的优化

张国民;谭周进;刘勇;张松柏;

2010, 0(06): 240-242.

摘要 ( 108 )

PDF (200KB) ( 576 )

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对沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris,PL1)和球形红假单胞菌(Rhodopseuelonmnas spheroids,PL2)混合培养条件进行了优化研究。结果表明,混合培养的最适接种量为6%,最适初始pH为7.5,低氧气浓度,180r/min振荡10min/d。

用于丝状真菌的苯菌灵标记基因benA表达载体的构建

张雄鹏;农向群;张泽华;

2010, 0(06): 243-250.

摘要 ( 217 )

PDF (1057KB) ( 748 )

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为了构建适用于丝状真菌遗传转化的表达载体,在质粒pAN52-1的高效组成型三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子PgpdA和色氨酸C基因终止子TtrpC之间加入内切酶NotⅠ和ClaⅠ两个位点,构成质粒pAN52-2;把质粒pAN52-2中从启动子PgpdA到终止子TtrpC的基因片段通过PstⅠ和XbaⅠ酶切位点导入到pUC19载体上,并且应用PCR的方法在启动子Pg-pdA的前端引入HindⅢ酶切位点,构成质粒pUCPT-2;通过PCR,在苯菌灵抗性基因benA两端分别加入内切酶NotⅠ和ClaⅠ酶切位点,并克隆到pGEM-T载体上,得到质粒pGEM-Ben;用NotⅠ分别酶切质粒pUCPT-2与pGEM-Ben,连接苯菌灵抗性基因benA到pUCPT-2上,得到了pUCPT-Ben载体。经PCR、酶切和核苷酸序列检测,证实了PgpdA-benA-TtrpC表达元件连接成功,即得到了苯菌灵抗性基因高效表达载体。

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