家蝇抗菌肽diptericin基因在大肠杆菌中的表达

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.06.020

生物技术通报 ›› 2016, Vol. 32 ›› Issue (6): 143-147.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.06.020

家蝇抗菌肽diptericin基因在大肠杆菌中的表达

卢敏^1,2, 白杰¹, 魏凤仙¹, 王琳燚¹, 徐彬¹, 尹清强², 李绍钰¹

1. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所，郑州 450002
2. 河南农业大学牧医工程学院，郑州 450002

收稿日期:2015-09-02 出版日期:2016-06-27 发布日期:2016-06-28
作者简介:卢敏，女，博士研究生，研究方向：动物营养与饲料科学；E-mail：453808792@qq.com
基金资助:
河南省科技攻关项目(142102110069)，国家现代农业产业技术体系项目(CARS-42)

Expression of diptericin Gene from Musca domestica in Escherichia coli

LU Min^1，2, BAI Jie¹, WEI Feng-xian¹, WANG Lin-yi¹, XU Bin¹, YIN Qing-qiang², LI Shao-yu¹

1. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Science，Henan Academy of Agricultural Sciences，Zhengzhou 450002
2. College of Animal Science and Veterinary Medicine，Henan Agricultural University，Zhengzhou 450002

Received:2015-09-02 Published:2016-06-27 Online:2016-06-28

摘要/Abstract

摘要： 为了实现原核表达的途径高效获取抗菌肽蛋白，以RT-PCR的方法反转录合成家蝇的抗菌肽diptericin基因，并克隆至pGEX-4T-1载体上，转化至大肠杆菌BL21宿主菌进行表达。测序结果显示，RT-PCR克隆到长345 bp的家蝇diptericin基因，重组菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后，通过SDS-PAGE电泳和Western-blot检测到目的蛋白的融合表达，结果表明带有GST标签的融合蛋白大小约为37 kD，并且通过GST纯化柱纯化得到了目的蛋白。

关键词: 家蝇, 抗菌肽, diptericin, 原核表达

Abstract: In order to efficiently acquire the antibacterial peptide by prokaryotic expression，diptericin gene for the antibacterial peptide in housefly was reversely synthesized by RT-PCR method. Then，diptericin gene was cloned to pGEX-4T-1 expression vector and transformed into Escherichia coli BL21 for protein expression. Sequencing result showed that housefly’s diptericin gene was 345 nucleotides in length. Recombinant pGEX-4T-1 was induced by IPTG，and the expression of diptericin fusion protein was detected by SDS-PAGE electrophoresis and Western blot. The result showed that diptericin fusion protein with GST-tag was about 37 kD，and the target protein was purified by GST purification column.

Key words: housefly, antibacterial peptide, diptericin, prokaryotic expression

卢敏, 白杰, 魏凤仙, 王琳燚, 徐彬, 尹清强, 李绍钰. 家蝇抗菌肽diptericin基因在大肠杆菌中的表达[J]. 生物技术通报, 2016, 32(6): 143-147.

LU Min, BAI Jie, WEI Feng-xian, WANG Lin-yi, XU Bin, YIN Qing-qiang, LI Shao-yu. Expression of diptericin Gene from Musca domestica in Escherichia coli[J]. Biotechnology Bulletin, 2016, 32(6): 143-147.

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家蝇抗菌肽diptericin基因在大肠杆菌中的表达

Expression of diptericin Gene from Musca domestica in Escherichia coli

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