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3-甾酮-1-脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达及甾体转化研究

李玉;王稳航;刘逸寒;路福平;杜连祥;   

  1. 天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院 天津300222,天津300222,天津300222,天津300222,天津300222
  • 出版日期:2008-06-26 发布日期:2008-06-26

  • Published:2008-06-26 Online:2008-06-26

摘要: 将简单节杆菌3-甾酮-1-脱氢酶基因(ksdD)克隆到大肠杆菌表达载体pET-22b(+)上,构建重组质粒pET-ksdD,利用IPTG诱导酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达,4h后取样,分别对超声破碎后的上清和沉淀进行SDS-PAGE和酶活分析,结果表明表达出的3-甾酮-1-脱氢酶的分子量大约为56kD,超声破碎后的细胞破碎液对4-AD的转化率较简单节杆菌提高了近10倍。

关键词: 3-甾酮-1-脱氢酶, 大肠杆菌, 表达, 甾体转化