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丙酮丁醇梭菌ldhL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

于振海;杨登峰;郭媛;马潘蕾;韦宇托;黄日波;   

  1. 广西大学生命科学与技术学院;广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心;
  • 出版日期:2010-03-26 发布日期:2010-03-26
  • 基金资助:
    广西青年基金(桂科青0832016);; 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地开放课题(SB0606)

  • Published:2010-03-26 Online:2010-03-26

摘要: 首次从丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum ATCC824)中克隆得到L-乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase,ldhL)基因,并将其连接到pSE380表达载体上,得到重组质粒pSE380ldhL,将重组质粒转化到乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的Escherichia coli FMJl44大肠杆菌中进行表达。SDS-PAGE分析表达产物的分子量约为34kD,摇瓶发酵后用HPLC检测分析L-乳酸产量为2.4g/L,纯度达到99.9%,不需要再进行手性分离,为以后在工业上生物法生产高纯度的L-乳酸打下基础。

关键词: L-乳酸, L-乳酸脱氢酶, 克隆, 表达