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鼠李糖乳杆菌D-(+)-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

黄艳燕;黄靖华;卢福芝;孙靓;彭立新;周兴;黄日波;   

  1. 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心;广西大学;
  • 出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
  • 基金资助:
    国家科技支撑计划项目(2007BAD75B06);; 广西科学基金项目(桂科攻0782003-4)

  • Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要: 利用PCR的方法从鼠李糖乳杆菌基因组DNA中扩增到D-(+)-乳酸脱氢酶基因(ldhD),并连接到载体pSE380上,构建表达质粒pSE-ldhD,将重组质粒pSE-ldhD转化大肠杆菌BL21(DE3),重组菌株经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明ldhD在大肠杆菌中实现了表达,表达产物的分子量约为37kD。同时采用紫外分光光度法测定D-乳酸脱氢酶的酶活,测得重组菌株的D-乳酸脱氢酶活力为5.4U/mL,最适反应温度为35℃,最适pH为5.6。

关键词: D-(+)-乳酸脱氢酶, 克隆, 表达, 鼠李糖乳杆菌