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轮状病毒VP7基因的克隆与表达

柴晓杰;王晓庆;张婷;代靖宇;   

  1. 大连海洋大学生命科学与技术学院;
  • 出版日期:2011-03-26 发布日期:2011-03-26
  • 基金资助:
    辽宁省教育厅项目(2008T023)

  • Published:2011-03-26 Online:2011-03-26

摘要: 应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增轮状病毒VP7基因,并将其克隆到pMD18-T simple载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定DNA全序列。结果显示,克隆片段全长为981 bp。将轮状病毒VP7基因定向的克隆到原核表达载体pET-32a启动子下游,构建原核表达载体pET-32aVP7。将质粒pET-32aVP7转化Transetta表达菌株进行诱导表达,裂解菌体细胞抽提蛋白质进行SDS-PAGE。结果表明,轮状病毒壳蛋白VP7基因在Transetta表达菌株内得到成功表达。

关键词: 轮状病毒, PCR, 克隆, 表达