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GST-HRB融合蛋白的表达与纯化

刘丽杰;高学娟;刘小会;陈妙娟;朱森;刘朗夏;   

  1. 暨南大学生命科学技术学院;
  • 出版日期:2011-11-26 发布日期:2011-11-26
  • 基金资助:
    广东省自然科学基金项目(9151065004000005);;

  • Published:2011-11-26 Online:2011-11-26

摘要: 构建GST-HRB重组质粒,进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用PCR扩增及基因重组技术,以pcDNA-3.1-HRB为模板扩增出HRB全基因序列,并将其插入带有GST(谷胱甘肽巯基转移酶)标签的原核表达载体pGEX-6P-1中,构建GST-HRB融合蛋白表达质粒。然后,将重组质粒GST-HRB转化至大肠杆菌Rosseta进行融合蛋白的表达。利用GST琼脂糖珠进行融合蛋白的纯化,最后应用SDS-PAGE电泳和Western blotting鉴定纯化的融合蛋白。结果表明,成功构建pGEX-6P-1-HRB原核表达载体,表达及纯化了GST-HRB融合蛋白。

关键词: GST-HRB, 构建, 融合蛋白, 表达, 纯化