鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组

鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组

安俊峰;王运浩;侯鑫;

内蒙古大学生命科学学院;

出版日期:2012-06-26 发布日期:2012-06-26
基金资助:
国家重点基础研究发展计划“973”项目(2009CB118802)

Published:2012-06-26 Online:2012-06-26

摘要/Abstract

摘要： 旨在对鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白进行体外功能研究,采用大肠杆菌系统进行CYP1A5的异源表达。以鸡的cDNA为模板,扩增出CYP1A5基因,将该基因的N端编码区进行修饰,并连接到pCW载体中构建His-CYP1A5,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达。经CO-差示光谱检测,所获得的His-CYP1A5具有典型的P450吸收峰。该蛋白与细胞色素P450还原酶(CPR)进行体外重组,构成的重组酶系表现出乙氧基试卤灵-O-脱乙基酶活性。结果表明,所采用的表达策略可以成功产生出具有催化活性的鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白。

关键词: 细胞色素, P4501A5(CYP1A5), 异源表达, 体外重组, 酶活性

安俊峰;王运浩;侯鑫;. 鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组[J]. .

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