改良逆转录环介导等温扩增检测技术快速实时检测H9亚型禽流感病毒

改良逆转录环介导等温扩增检测技术快速实时检测H9亚型禽流感病毒

但晓雅;董英;邹明强;薛强;杜景娇;

江苏大学;中国检验检疫科学研究院;

出版日期:2012-08-26 发布日期:2012-08-26
基金资助:
国际科技合作项目(2009DFA32720);;

Published:2012-08-26 Online:2012-08-26

摘要/Abstract

摘要： 利用改良逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术建立一种快速、灵敏的检测方法用于H9亚型禽流感病毒检测。根据H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区序列中的8个区段设计6条特异性引物,在恒温条件下进行核酸扩增反应,并以琼脂糖凝胶电泳和目视检查绿色荧光两种方法对扩增结果进行判定。结果表明,RT-LAMP的最小检测限为100 fg,灵敏度比PT-PCR高100倍,且与H5亚型、H7亚型禽流感病毒,新城疫病毒(NDV)无交叉反应。目视检查绿色荧光与常规琼脂糖凝胶电泳的判定结果一致。整个扩增检测过程在35 min内即可完成。利用临床样本对RT-LAMP法进行验证,结果与RT-PCR一致。由实时浊度分析得到的标准曲线,计算出临床样本中的病毒质粒拷贝数均在2×107-2×104之间。因此,本研究建立的RT-LAMP方法快速、灵敏、特异性强,是H9亚型禽流感病毒的一种高效检测方法。

关键词: H9亚型禽流感病毒, 逆转录环介导等温扩增, 快速检测, 实时

但晓雅;董英;邹明强;薛强;杜景娇;. 改良逆转录环介导等温扩增检测技术快速实时检测H9亚型禽流感病毒[J]. .

[1]	余慧, 王静, 梁昕昕, 辛亚平, 周军, 赵会君. 宁夏枸杞铁镉响应基因的筛选及其功能验证[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 195-205.
[2]	姚姿婷, 曹雪颖, 肖雪, 李瑞芳, 韦小妹, 邹承武, 朱桂宁. 火龙果溃疡病菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选[J]. 生物技术通报, 2023, 39(5): 92-102.
[3]	宋海娜, 吴心桐, 杨鲁豫, 耿喜宁, 张华敏, 宋小龙. 葱鳞葡萄孢菌诱导下韭菜RT-qPCR内参基因的筛选和验证[J]. 生物技术通报, 2023, 39(3): 101-115.
[4]	穆德添, 万凌云, 章瑶, 韦树根, 陆英, 付金娥, 田艺, 潘丽梅, 唐其. 钩藤管家基因筛选及生物碱合成相关基因的表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(2): 126-138.
[5]	陈晓琳, 刘洋儿, 许文涛, 郭明璋, 刘慧琳. 合成生物学细胞传感技术在食品安全快速检测中的应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(1): 137-149.
[6]	胡海洋, 应婉琴, 何军, 吕芷贤, 谢小平, 邓仲良. 酶促重组等温扩增实时荧光法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用[J]. 生物技术通报, 2022, 38(9): 264-270.
[7]	曹英芳, 赵新, 刘双, 李瑞环, 刘娜, 徐石勇, 高芳瑞, 马卉, 兰青阔, 檀建新, 王永. 抗除草剂大豆GE-J12实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 生物技术通报, 2022, 38(7): 146-152.
[8]	徐圆圆, 赵国春, 郝颖颖, 翁学煌, 陈仲, 贾黎明. 无患子RT-qPCR内参基因的筛选与验证[J]. 生物技术通报, 2022, 38(10): 80-89.
[9]	陈建军, 赵怡迪, 曹香林. 脂多糖对鲤肠上皮细胞转录组模式的调控分析[J]. 生物技术通报, 2021, 37(8): 213-220.
[10]	付志强, 熊艳. 便携式生物光学传感器的研究进展[J]. 生物技术通报, 2021, 37(3): 219-226.
[11]	王欢禹, 常昊宛, 章崇祺, 金卫林, 魏芳. 五种检测嵌合抗原受体表达方法的比较[J]. 生物技术通报, 2021, 37(12): 265-273.
[12]	李恬静薇, 邹潇潇, 朱军, 鲍时翔. 长茎葡萄蕨藻胁迫条件下RT-qPCR内参基因的筛选与验证[J]. 生物技术通报, 2021, 37(10): 266-276.
[13]	李信申, 黄小梅, 吴淑秀, 黄瑞荣, 魏林根, 华菊玲. 植物青枯病菌环介导等温扩增快速检测技术研究[J]. 生物技术通报, 2021, 37(1): 272-281.
[14]	赵颖, 王楠, 陆安祥, 冯晓元, 郭晓军, 栾云霞. 核酸适配体侧流层析分析技术在真菌毒素检测中的应用[J]. 生物技术通报, 2020, 36(8): 217-227.
[15]	高威芳, 章礼平, 朱鹏. 等温扩增技术及其结合CRISPR在微生物快速检测中的研究进展[J]. 生物技术通报, 2020, 36(5): 22-31.

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