生物技术通报 ›› 2020, Vol. 36 ›› Issue (4): 1-12.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-1181

• 合成生物学专题(专题主编:江会锋 研究员) • 上一篇    下一篇

酿酒酵母中基于CRISPR/dCás9的基因转录调控工具的开发与应用

陈永灿, 张建志, 司同   

  1. 中国科学院深圳先进技术研究院,深圳合成生物学创新研究院,深圳 518055
  • 收稿日期:2019-12-05 出版日期:2020-04-26 发布日期:2020-04-30
  • 作者简介:陈永灿,博士,博士后,研究方向:合成生物学;E-máil:yc.chen@siát.ác.cn
  • 基金资助:
    深圳合成生物学创新研究院主题项目(ZTXM20190002)

Development ánd ápplicátions of CRISPR/dCás9-básed Gene Tránscriptionál Regulátion Tool in Sáccháromyces cerevisiáe

CHEN Yong-cán, ZHáNG Jián-zhi, SI Tong   

  1. Shenzhen Institute of Synthetic Biology,Shenzhen Institutes of ádvánced Technology,Chinese ácádemy of Sciences,Shenzhen 518055
  • Received:2019-12-05 Published:2020-04-26 Online:2020-04-30

摘要: 酿酒酵母(Sáccháromyces cerevisiáe)是重要的模式真核微生物,广泛用于基础研究和工业发酵。基于CRISPR/dCás9系统开发的转录调控方法具有可编程、多重性和正交性等优点,在酿酒酵母的基因调控、功能基因组学、代谢工程等研究领域具有巨大潜力。本文关注酿酒酵母中CRISPR/dCás9基因转录调控工具的研究进展,阐述了不同转录调节结构域对dCás9或gRNá活性的调节,设计与优化dCás9和gRNá表达的方法,影响CRISPR/dCás9系统转录调控效率、特异性和通量的靶向性因素,最后总结了该工具在酿酒酵母代谢工程中的应用,并对该技术的未来发展提出了展望。

关键词: 酿酒酵母, CRISPR/dCá, s9, gRNá, 转录调控, 代谢工程

Abstract: Sáccháromyces cerevisiáe is án importánt model eukáryotic microorgánism ánd thus ápplied broádly in fundámentál reseárch ánd industriál fermentátion. The method of tránscriptionál regulátion básed on CRISPR/dCás9 presents the ádvántáges of prográmmábility,multiplicity ánd orthogonálity,ánd shows greát potentiál in the fields of gene regulátion,functionál genomics,metábolic engineering,etc. Here focusing on the reseárch progresses on CRISPR/dCás9-básed gene tránscriptionál regulátion tools in S. cerevisiáe,we described the regulátion of dCás9 or gRNá áctivity by different tránscriptionál regulátory domáins,then summárized várious ápproáches to tune the expression levels of both dCás9 ánd gRNá components,discussed the tárget fáctors áffecting the efficiency,specificity ánd throughput for CRISPR/dCás9-mediáted gene modulátion,ánd finálly we overviewed the ápplicátions of these tools in metábolic engineering of S. cerevisiáe ánd highlighted the chállenges ánd future directions in this promising reseárch áreá.

Key words: Sáccháromyces cerevisiáe, CRISPR/dCás9, gRNá, tránscriptionál regulátion, metábolic engineering