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不同启动子表达Cry1Ie蛋白的特性分析

张春鸽;赵灿;束长龙;孙冰;宋福平;高继国;张杰;   

  1. 东北农业大学生命科学学院;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室;
  • 出版日期:2012-11-26 发布日期:2012-11-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31171911);;

  • Published:2012-11-26 Online:2012-11-26

摘要: 苏云金芽胞杆菌启动子P1Ac与T7启动子表达的Cry1Ie蛋白对鳞翅目害虫小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫的杀虫活性有较大差异。P1Ac启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为1.73μg/mL,T7启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为18.18μg/mL,后者是前者的10.5倍。主要从形态、碱溶性及抗胰蛋白酶稳定性等方面对其进行了初步的探索。结果显示,两者在形态上无显著差异,均有相对较为规则的颗粒存在;在碱溶性方面无显著差异,均有约20.0%的包涵体能溶解于pH10.5 50.0 mmol/L Na2CO3的溶液;在对抗胰蛋白酶的稳定性方面无明显差异,由此说明这三方面都不是二者活性差异的原因,推测是T7启动子表达的Cry1Ie蛋白折叠不正确导致其活性较差。

关键词: cry1Ac基因启动子P1Ac, T7启动子, 大肠杆菌, Cry1Ie蛋白, 表达