Combined Metabolome and Transcriptome Analysis of the Differences in Terpenoids between New and Old Leaves of Artemisia argyi H. Lév. & Vaniot

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2025-0302

Abstract

Abstract:

Objective To explore the changes of terpenoids in Artemisia argyi H. Lév. & Vaniot during its growth and development, and analyze the molecular catalytic mechanism of terpenoids in its accumulation. Method Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) and Single Molecule Real-Time (SMRT) sequencing technology of the PacBio platform were used to analyze the metabolomics and transcriptomics of new leaves and old leaves of A. argyi. Result Metabolomics results showed that 150 different metabolites were obtained, including terpenoids (33), heterocyclic compounds (26) and esters (24). There were 149 down-regulated metabolites and 1 up-regulated metabolite in old leaves when compared with those in new leaves. A total of 4 different metabolites were enriched into metabolic pathways related to terpenoid synthesis. The transcriptomic results showed that there were 711 differential genes between new leaves and old leaves, of which 406 were up-regulated, and 305 were down-regulated. And 2 differential genes were annotated to the pathway related to terpenoid synthesis. There were 12 specific terpenoid metabolites involved in terpenoid biosynthesis, and the key genes related to them mainly include 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase (DXS), geranylgeranyl pyrophosphate synthase (GGPS), etc. Conclusion There are some differences in gene expression and metabolism between new leaves and old leaves of A. argyi. But there is little difference in gene expression in the pathway of terpenoid biosynthesis. It is speculated that the difference of gene expression in the leaves of the same plant with different developmental degrees being little.

Key words: Artemisia argyi H. Lév. & Vaniot., terpenoids, biosynthesis, metabolome, transcriptome

JI Meng-ran, ZHANG Rui-ying, LIU Hong-dan, FENG Wei-meng, LIU Xiu-yu, MA Rui, CHEN Sui-qing. Combined Metabolome and Transcriptome Analysis of the Differences in Terpenoids between New and Old Leaves of Artemisia argyi H. Lév. & Vaniot[J]. Biotechnology Bulletin, 2025, 41(10): 277-291.

Figures/Tables 13

References 34

[1]	国家药典委员会.中华人民共和国药典 [M]. 一部. 北京: 中国医药科技出版社, 2020.
	Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China [M]. Volume I.Beijing:China Medical Science Press, 2020.
[2]	计辰洋, 任燕, 翟煦, 等. 基于功效古今演变的艾叶研究进展与应用思考 [J]. 世界中医药, 2024, 19(2): 279-284.
	Ji CY, Ren Y, Zhai X, et al. Research progress and application of Artemisia argyi leaf based on the evolution of efficacy from ancient to modern times [J]. World Chin Med, 2024, 19(2): 279-284.
[3]	王倩倩, 郭蕊, 张丹, 等. 基于UPLC和HS-GC-MS的不同道地产区艾叶药材化学成分比较分析 [J]. 中国中药杂志, 2023, 48(20): 5509-5518.
	Wang QQ, Guo R, Zhang D, et al. Comparison of chemical constituents in Artemisiae Argyi Folium from different Dao-di producing areas based on UPLC and HS-GC-MS [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(20): 5509-5518.
[4]	兰晓燕, 朱龙波, 黄显章, 等. 艾叶中主要化学成分的鉴定及其含量测定研究 [J]. 中草药, 2021, 52(24): 7630-7637.
	Lan XY, Zhu LB, Huang XZ, et al. Study on identification and quantitation of main compounds in Artemisiae Argyi Folium [J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2021, 52(24): 7630-7637.
[5]	孙宗淼, 许秀萍. 艾不同部位有效成分含量的比较 [J]. 山西医科大学学报, 2023, 54(1): 114-118.
	Sun ZM, Xu XP. Comparative study on contents of active components in different parts of Artemisia argyi Levl. [J]. Journal of Shanxi Medical University, 2023, 54(1): 114-118.
[6]	任凌丽, 李浩, 钱雪, 等. 新鲜艾叶与陈化艾叶挥发油化学成分研究 [J]. 中国野生植物资源, 2022, 41(11): 39-42, 55.
	Ren LL, Li H, Qian X, et al. Study on chemical composition of volatile oil from fresh and aged Artemisia argyi leaves [J]. Chinese Wild Plant Resources, 2022, 41(11): 39-42, 55.
[7]	李玉萍, 魏莉霞, 张东佳, 等. 艾草的研究现状、应用与展望 [J]. 中国种业, 2024(8): 21-27.
	Li YP, Wei LX, Zhang DJ, et al. Research status, applications and prospect of Artemisia argyi [J]. China Seed Ind, 2024(8): 21-27.
[8]	蒋小洁, 陈贻豪, 宋紫欣, 等. 艾草的药理作用及其机制研究进展 [J]. 华夏医学, 2023, 36(6): 182-188.
	Jiang XJ, Chen YH, Song ZX, et al. Research progress in the pharmacology and mechanism of Artemisia argyi [J]. Acta Med Sin, 2023, 36(6): 182-188.
[9]	Liu Y, He YN, Wang F, et al. From longevity grass to contemporary soft gold: Explore the chemical constituents, pharmacology, and toxicology of Artemisia argyi H.Lév. & vaniot essential oil [J]. J Ethnopharmacol, 2021, 279: 114404.
[10]	兰晓燕, 张元, 朱龙波, 等. 艾叶化学成分、药理作用及质量研究进展 [J]. 中国中药杂志, 2020, 45(17): 4017-4030.
	Lan XY, Zhang Y, Zhu LB, et al. Research progress on chemical constituents from Artemisiae argyi Folium and their pharmacological activities and quality control [J]. China J Chin Mater Med, 2020, 45(17): 4017-4030.
[11]	朱晔, 马蕊, 陈灵丽, 等. 艾的基原考证 [J].中医学报, 2024: 1-10.
	Zhu Y, Ma R, Chen LL, et al. Textual research on traditional Chinese medicine Artemisia argyi [J]. Acta Chinese Medicine, 2024: 1-10.
[12]	庄二平, 郑真. 南阳市艾草产业发展分析 [J]. 农村经济与科技, 2022, 33(3): 147-149.
	Zhuang EP, Zheng Z. Analysis on the development of wormwood industry in Nanyang city [J]. Rural Econ Sci Technol, 2022, 33(3): 147-149.
[13]	时敏, 王瑶, 周伟, 等. 药用植物萜类化合物的生物合成与代谢调控研究进展 [J]. 中国科学: 生命科学, 2018, 48(4): 352-364.
	Shi M, Wang Y, Zhou W, et al. Research progress in terms of the biosynthesis and regulation of terpenoids from medicinal plants [J]. Sci Sin Vitae, 2018, 48(4): 352-364.
[14]	孙丽超, 李淑英, 王凤忠, 等. 萜类化合物的合成生物学研究进展 [J]. 生物技术通报, 2017, 33(1): 64-75.
	Sun LC, Li SY, Wang FZ, et al. Research progresses in the synthetic biology of terpenoids [J]. Biotechnol Bull, 2017, 33(1): 64-75.
[15]	零唯, 覃艳红,黄鼎, 等. 绞股蓝萜类合成酶(TPS)基因家族鉴定及其在非生物胁迫下的表达分析 [J]. 中国中药杂志, 2023, 48(4): 930-938.
	Ling W, Qin YH, Huang D, et al. Identification of terpene synthase gene family in Gynostemma pentaphyllum and expression pattern analysis under abiotic stresses [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(4): 930-938.
[16]	Wolkoff P, Clausen PA, Wilkins CK, et al. Formation of strong airway irritants in terpene/ozone mixtures [J]. Indoor Air, 2000, 10(2): 82-91.
[17]	Wang X, Pereira JH, Tsutakawa S, et al. Efficient production of oxidized terpenoids via engineering fusion proteins of terpene synthase and cytochrome P450 [J]. Metab Eng, 2021, 64: 41-51.
[18]	徐俊, 叶雨晴, 牛雅静, 等. 菊花根状茎发育的转录组分析 [J]. 生物技术通报, 2023, 39(10): 231-245.
	Xu J, Ye YQ, Niu YJ, et al. Transcriptome analysis of rhizome development in Chrysanthemum morifolium [J]. Biotechnol Bull, 2023, 39(10): 231-245.
[19]	Arick M 2nd, Hsu CY. Differential gene expression analysis of plants [J]. Methods Mol Biol, 2018, 1783: 279-298.
[20]	刘慧敏, 张悦, 王佳艺, 等. 代谢组学前沿技术进展及在中药现代研究中的应用 [J]. 中草药, 2024, 55(3): 969-977.
	Liu HM, Zhang Y, Wang JY, et al. Advances in frontier technologies in metabolomics and their application in modern research of Chinese medicine [J]. Chin Tradit Herb Drugs, 2024, 55(3): 969-977.
[21]	崔芙岩, 杨佳颖, 王志刚, 等. 代谢组学在中医药领域的应用与展望 [J]. 中草药, 2022, 53(14): 4512-4526.
	Cui FY, Yang JY, Wang ZG, et al. Application and prospect of metabolomics in traditional Chinese medicine research [J]. Chin Tradit Herb Drugs, 2022, 53(14): 4512-4526.
[22]	Fraga-Corral M, Carpena M, Garcia-Oliveira P, et al. Analytical metabolomics and applications in health, environmental and food science [J]. Crit Rev Anal Chem, 2022, 52(4): 712-734.
[23]	梁婉凤, 曾菁菁, 胡若群, 等. 转录组与代谢组分析不同生长时期金线莲类胡萝卜素的积累 [J]. 生物技术通报, 2024, 40(10): 262-274.
	Liang WF, Zeng JJ, Hu RQ, et al. Transcriptional and metabolomic analysis of carotenoid accumulation in Anoectochilus roxburghii during different growth periods [J]. Biotechnol Bull, 2024, 40(10): 262-274.
[24]	薛守宇, 朱涛, 李冰冰, 等. 转录组和代谢组联合分析在植物中的应用研究 [J]. 山西农业大学学报: 自然科学版, 2022, 42(3): 1-13.
	Xue SY, Zhu T, Li BB, et al. Application research of combined transcriptome with metabolome in plants [J]. J Shanxi Agric Univ Nat Sci Ed, 2022, 42(3): 1-13.
[25]	张改君, 苗静, 郭丽颖, 等. 多组学联用在中药作用机制研究中的应用 [J]. 中草药, 2021, 52(10): 3112-3120.
	Zhang GJ, Miao J, Guo LY, et al. Application of multi-omics combination in mechanism studies of traditional Chinese medicine [J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2021, 52(10): 3112-3120.
[26]	Wang SS, Liu L, Mi XZ, et al. Multi-omics analysis to visualize the dynamic roles of defense genes in the response of tea plants to gray blight [J]. Plant J, 2021, 106(3): 862-875.
[27]	罗元明, 杨福全. 多组学前沿技术专刊序言 [J]. 生物工程学报, 2022, 38(10): 3571-3580.
	Luo YM, Yang FQ. Preface for special issue on multi-omics frontier technologies [J]. Chinese Journal of Biotechnology, 2022, 38(10): 3571-3580.
[28]	张利苹, 王俊玲, 李振华, 等. 花生红色种皮花青素生物合成转录-代谢组学联合分析 [J]. 植物遗传资源学报, 2024, 25(10): 1767-1780.
	Zhang LP, Wang JL, Li ZH, et al. Transcriptomics-metabolomics combined analysis highlight the anthocyanin biosynthesis mechanism of red testa in peanut(Arachis hypogaea L.) [J]. Journal of Plant Genetic Resources, 2024, 25(10): 1767-1780.
[29]	Chen HY, Guo MX, Dong ST, et al. A chromosome-scale genome assembly of Artemisia argyi reveals unbiased subgenome evolution and key contributions of gene duplication to volatile terpenoid diversity [J]. Plant Commun, 2023, 4(3): 100516.
[30]	奥斯伯FM, 马学军, 舒跃龙. 精编分子生物学实验指南 [M]. 北京: 科学出版社, 2005.
	Ausubel FM, Ma XJ, Shu YL. Short protocols in molecular biology [M]. Beijing: Science Press, 2005.
[31]	Wu TD, Watanabe CK. GMAP: a genomic mapping and alignment program for mRNA and EST sequences [J]. Bioinformatics, 2005, 21(9): 1859-1875.
[32]	董树廷. 基于代谢组和单细胞转录组的艾叶腺毛发育及倍半萜生物合成研究 [D]. 北京:北京协和医学院, 2024.
	Dong ST. Analysis of glandular trichome development and sesquiterpene biosynthesis in Artemisia argyi based on metabolome and single-cell transcriptome [D]. Beijing: Peking Union Medical College, 2024.
[33]	Lee S, Won HJ, Ban S, et al. Integrative analysis of metabolite and transcriptome reveals biosynthetic pathway and candidate genes for eupatilin and jaceosidin biosynthesis in Artemisia argyi [J]. Front Plant Sci, 2023, 14: 1186023.
[34]	Zhang KP, Wang NH, Gao XQ, et al. Integrated metabolite profiling and transcriptome analysis reveals tissue-specific regulation of terpenoid biosynthesis in Artemisia argyi [J]. Genomics, 2022, 114(4): 110388.

序号 No.	分子式 Molecular formula	代谢物中文名 Metabolite Chinese name	代谢物英文名 Metabolite English name	CAS	VIP	P_value
1	C₁₅H₂₄	（4R，4aR，8aR）-十氢-1，6-双（亚甲基）-4-（1-甲基乙基）-萘	Naphthalene，decahydro-1，6-bis（methylene）-4-（1-methylethyl）-，（4R，4aR，8aR）-rel-	30021-46-6	1.91	0.01
2	C₁₅H₂₆O	阔叶缬草醚	Kessane	3321-66-2	1.36	0.05
3	C₁₀H₁₆	α-水芹烯	α-phellandrene	99-83-2	2.10	0.00
4	C₁₀H₁₈O	（2R，5R）-2-甲基-5-丙烷-2-基双环（3.1.0）己烷-2-醇	（2S，5R）-2-methyl-5-propan-2-ylbicyclo（3.1.0）hexan-2-ol	17699-16-0	1.67	0.02
5	C₁₀H₁₈O	反式-5-甲基-2-（1-甲基乙基）-环己酮	Cyclohexanone， 5-methyl-2-（1-methylethyl）-， trans-	89-80-5	1.37	0.04
6	C₁₅H₂₄	α-古巴烯	Copaene	3856-25-5	1.50	0.05
7	C₁₅H₂₄	β-瑟林烯	Naphthalene， decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-（1-methylethenyl）-，（4aR， 7R， 8aS）-	17066-67-0	1.56	0.03
8	C₁₅H₂₄	γ-芹子烯	（4aR-trans）-decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-（1-methylethylidene）-Naphthalene	515-17-3	1.50	0.05
9	C₁₅H₂₂	α-姜黄烯	Benzene， 1-（1， 5-dimethyl-4-hexenyl）-4-methyl-	644-30-4	1.90	0.01
10	C₁₅H₂₂	菖蒲烯	Naphthalene， 1， 2， 3， 4-tetrahydro-1， 6-dimethyl-4-（1-methylethyl）-，（1S-cis）-	483-77-2	1.58	0.03
11	C₁₃H₂₀O₂	4-（2，2，6-三甲基-7-氧杂二环［4.1.0］庚-1-基）-3-丁烯-2-酮	3-Buten-2-one， 4-（2， 2， 6-trimethyl-7-oxabicyclo［4.1.0］hept-1-yl）-	23267-57-4	1.54	0.04
12	C₁₅H₂₄	7，11-二甲基-3-亚甲基十二烷-1，6，10-三烯	7， 11-dimethyl-3-methylenedodeca-1， 6， 10-triene	77129-48-7	1.94	0.01
13	C₁₀H₁₄O₂	紫苏酸	1-Cyclohexene-1-carboxylic acid， 4-（1-methylethenyl）-	7694-45-3	1.54	0.03
14	C₁₄H₁₆	母菊薁	Chamazulene	529-05-5	2.04	0.00
15	C₁₅H₂₄	（+）-β-柏木烯	1H-3a， 7-Methanoazulene， octahydro-3， 8， 8-trimethyl-6-methylene-，（3R， 3aS， 7S， 8aS）-	546-28-1	1.85	0.01
16	C₁₅H₂₄	（+）-表-双环倍半水芹烯	（+）-Epi-bicyclosesquiphellandrene	54274-73-6	1.75	0.02
17	C₁₀H₁₆O	松樟酮	Pinocamphone	547-60-4	1.58	0.04
18	C₂₀H₃₂	（4aS，8S，8aS）-4，4，8a-三甲基-7-亚甲基-8-（3-甲基戊-2，4-二烯基）-2，3，4a，5，6，8-六氢-1H-萘	（4aS， 8S， 8aS）-4， 4， 8a-trimethyl-7-methylidene-8-（3-methylpenta-2， 4-dienyl）-2， 3， 4a， 5， 6， 8-hexahydro-1H-naphthalene	5957-33-5	1.23	0.03
19	C₁₅H₂₄	雪松烯	Cedrene	11028-42-5	2.03	0.00
20	C₁₀H₁₆O₂	伊蚁内酯	Iridomyrmecin	485-43-8	1.90	0.02
21	C₁₅H₂₀	α-脱氢芳烃雪松烯	α-Dehydro-ar-himachalene	78204-62-3	1.70	0.01
22	C₁₅H₂₄	α-香柠檬烯	α-Bergamotene	17699-05-7	1.84	0.01
23	C₁₅H₂₄	（1R，3aS，8aS）-7-异丙基-1，4-二甲基-1，2，3，3a，6，8a-六氢茚	（1R， 3aS， 8aS）-7-Isopropyl-1， 4-dimethyl-1， 2， 3， 3a， 6， 8a-hexahydroazulene	36577-33-0	1.86	0.01
24	C₁₀H₁₆O	2-（4-甲基-2，4-环己二烯）-2-丙醇	2-（4-Methyl-2， 4-cyclohexadienyl）-2-propanol	1686-20-0	1.59	0.03
25	C₁₅H₂₄	［1S-（1R，9S）］10，10-二甲基-2，6-双（亚甲基）-双环［7.2.0］十一烷	Bicyclo［7.2.0］undecane， 10， 10-dimethyl-2， 6-bis（methylene）-，［1S-（1R， 9S）］-	136296-38-3	1.38	0.05
26	C₁₅H₂₄	10，10-二甲基-2，6-二亚甲基双环［7.2.0］十一烷	10， 10-Dimethyl-2， 6-dimethylenebicyclo［7.2.0］undecane	357414-37-0	1.86	0.01
27	C₁₀H₁₆O	5-甲基-2-（1-甲基亚乙基）-环己酮	Cyclohexanone， 5-methyl-2-（1-methylethylidene）-	15932-80-6	1.80	0.02
28	C₁₅H₂₄	（1S，4S，4aR）-1-异丙基-4-甲基-7-亚甲基-1，2，3，4，4a，5，6，7-八氢萘	（1S， 4S， 4aR）-1-Isopropyl-4-methyl-7-methylene-1， 2， 3， 4， 4a， 5， 6， 7-octahydronaphthalene	157477-72-0	1.85	0.02
29	C₁₅H₂₄	缬草-4，7（11）-二烯	Valerena-4， 7（11）-diene	351222-66-7	1.88	0.02
30	C₁₅H₂₄	（4R，4aS，6S）-4，4a-二甲基-6-（丙-1-烯-2-基）-1，2，3，4，4a，5，6，7-八氢萘	（4R， 4aS， 6S）-4， 4a-Dimethyl-6-（prop-1-en-2-yl）- 1， 2， 3， 4， 4a， 5， 6， 7-octahydronaphthalene	823810-22-6	1.83	0.01
31	C₁₅H₂₄	（1R，3aR，4aR，8aR）-1，4，4，6-四甲基-1，2，3，3a，4，4a，7，8-八氢环戊烯［1，4］环丁烯［1-2］苯	（1R， 3aR， 4aR， 8aR）-1， 4， 4， 6-Tetramethyl-1， 2， 3， 3a， 4， 4a， 7， 8-octahydrocyclopenta［1， 4］cyclobuta［1， 2］benzene	94482-89-0	1.70	0.02
32	C₁₅H₂₂	（2R，4aS）-4a，8-二甲基-2-（丙-1-烯-2-基）-1，2，3，4，4a，5-六氢萘	（2R， 4aS）-4a， 8-Dimethyl-2-（prop-1-en-2-yl）-1， 2， 3， 4， 4a， 5-hexahydronaphthalene	82462-31-5	1.64	0.03
33	C₁₅H₂₄	2，6，6，8-四甲基三环［5.3.1.0^1，5］十一碳-9-烯	2， 6， 6， 8-tetramethyltricyclo［5.3.1.0^1，5］undec-9-ene	21996-77-0	1.54	0.05

序号 No.	分子式 Molecular formula	代谢物中文名 Metabolite Chinese name	代谢物英文名 Metabolite English name	CAS	VIP	P_value
1	C₁₅H₂₄	（4R，4aR，8aR）-十氢-1，6-双（亚甲基）-4-（1-甲基乙基）-萘	Naphthalene，decahydro-1，6-bis（methylene）-4-（1-methylethyl）-，（4R，4aR，8aR）-rel-	30021-46-6	1.91	0.01
2	C₁₅H₂₆O	阔叶缬草醚	Kessane	3321-66-2	1.36	0.05
3	C₁₀H₁₆	α-水芹烯	α-phellandrene	99-83-2	2.10	0.00
4	C₁₀H₁₈O	（2R，5R）-2-甲基-5-丙烷-2-基双环（3.1.0）己烷-2-醇	（2S，5R）-2-methyl-5-propan-2-ylbicyclo（3.1.0）hexan-2-ol	17699-16-0	1.67	0.02
5	C₁₀H₁₈O	反式-5-甲基-2-（1-甲基乙基）-环己酮	Cyclohexanone， 5-methyl-2-（1-methylethyl）-， trans-	89-80-5	1.37	0.04
6	C₁₅H₂₄	α-古巴烯	Copaene	3856-25-5	1.50	0.05
7	C₁₅H₂₄	β-瑟林烯	Naphthalene， decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-（1-methylethenyl）-，（4aR， 7R， 8aS）-	17066-67-0	1.56	0.03
8	C₁₅H₂₄	γ-芹子烯	（4aR-trans）-decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-（1-methylethylidene）-Naphthalene	515-17-3	1.50	0.05
9	C₁₅H₂₂	α-姜黄烯	Benzene， 1-（1， 5-dimethyl-4-hexenyl）-4-methyl-	644-30-4	1.90	0.01
10	C₁₅H₂₂	菖蒲烯	Naphthalene， 1， 2， 3， 4-tetrahydro-1， 6-dimethyl-4-（1-methylethyl）-，（1S-cis）-	483-77-2	1.58	0.03
11	C₁₃H₂₀O₂	4-（2，2，6-三甲基-7-氧杂二环［4.1.0］庚-1-基）-3-丁烯-2-酮	3-Buten-2-one， 4-（2， 2， 6-trimethyl-7-oxabicyclo［4.1.0］hept-1-yl）-	23267-57-4	1.54	0.04
12	C₁₅H₂₄	7，11-二甲基-3-亚甲基十二烷-1，6，10-三烯	7， 11-dimethyl-3-methylenedodeca-1， 6， 10-triene	77129-48-7	1.94	0.01
13	C₁₀H₁₄O₂	紫苏酸	1-Cyclohexene-1-carboxylic acid， 4-（1-methylethenyl）-	7694-45-3	1.54	0.03
14	C₁₄H₁₆	母菊薁	Chamazulene	529-05-5	2.04	0.00
15	C₁₅H₂₄	（+）-β-柏木烯	1H-3a， 7-Methanoazulene， octahydro-3， 8， 8-trimethyl-6-methylene-，（3R， 3aS， 7S， 8aS）-	546-28-1	1.85	0.01
16	C₁₅H₂₄	（+）-表-双环倍半水芹烯	（+）-Epi-bicyclosesquiphellandrene	54274-73-6	1.75	0.02
17	C₁₀H₁₆O	松樟酮	Pinocamphone	547-60-4	1.58	0.04
18	C₂₀H₃₂	（4aS，8S，8aS）-4，4，8a-三甲基-7-亚甲基-8-（3-甲基戊-2，4-二烯基）-2，3，4a，5，6，8-六氢-1H-萘	（4aS， 8S， 8aS）-4， 4， 8a-trimethyl-7-methylidene-8-（3-methylpenta-2， 4-dienyl）-2， 3， 4a， 5， 6， 8-hexahydro-1H-naphthalene	5957-33-5	1.23	0.03
19	C₁₅H₂₄	雪松烯	Cedrene	11028-42-5	2.03	0.00
20	C₁₀H₁₆O₂	伊蚁内酯	Iridomyrmecin	485-43-8	1.90	0.02
21	C₁₅H₂₀	α-脱氢芳烃雪松烯	α-Dehydro-ar-himachalene	78204-62-3	1.70	0.01
22	C₁₅H₂₄	α-香柠檬烯	α-Bergamotene	17699-05-7	1.84	0.01
23	C₁₅H₂₄	（1R，3aS，8aS）-7-异丙基-1，4-二甲基-1，2，3，3a，6，8a-六氢茚	（1R， 3aS， 8aS）-7-Isopropyl-1， 4-dimethyl-1， 2， 3， 3a， 6， 8a-hexahydroazulene	36577-33-0	1.86	0.01
24	C₁₀H₁₆O	2-（4-甲基-2，4-环己二烯）-2-丙醇	2-（4-Methyl-2， 4-cyclohexadienyl）-2-propanol	1686-20-0	1.59	0.03
25	C₁₅H₂₄	［1S-（1R，9S）］10，10-二甲基-2，6-双（亚甲基）-双环［7.2.0］十一烷	Bicyclo［7.2.0］undecane， 10， 10-dimethyl-2， 6-bis（methylene）-，［1S-（1R， 9S）］-	136296-38-3	1.38	0.05
26	C₁₅H₂₄	10，10-二甲基-2，6-二亚甲基双环［7.2.0］十一烷	10， 10-Dimethyl-2， 6-dimethylenebicyclo［7.2.0］undecane	357414-37-0	1.86	0.01
27	C₁₀H₁₆O	5-甲基-2-（1-甲基亚乙基）-环己酮	Cyclohexanone， 5-methyl-2-（1-methylethylidene）-	15932-80-6	1.80	0.02
28	C₁₅H₂₄	（1S，4S，4aR）-1-异丙基-4-甲基-7-亚甲基-1，2，3，4，4a，5，6，7-八氢萘	（1S， 4S， 4aR）-1-Isopropyl-4-methyl-7-methylene-1， 2， 3， 4， 4a， 5， 6， 7-octahydronaphthalene	157477-72-0	1.85	0.02
29	C₁₅H₂₄	缬草-4，7（11）-二烯	Valerena-4， 7（11）-diene	351222-66-7	1.88	0.02
30	C₁₅H₂₄	（4R，4aS，6S）-4，4a-二甲基-6-（丙-1-烯-2-基）-1，2，3，4，4a，5，6，7-八氢萘	（4R， 4aS， 6S）-4， 4a-Dimethyl-6-（prop-1-en-2-yl）- 1， 2， 3， 4， 4a， 5， 6， 7-octahydronaphthalene	823810-22-6	1.83	0.01
31	C₁₅H₂₄	（1R，3aR，4aR，8aR）-1，4，4，6-四甲基-1，2，3，3a，4，4a，7，8-八氢环戊烯［1，4］环丁烯［1-2］苯	（1R， 3aR， 4aR， 8aR）-1， 4， 4， 6-Tetramethyl-1， 2， 3， 3a， 4， 4a， 7， 8-octahydrocyclopenta［1， 4］cyclobuta［1， 2］benzene	94482-89-0	1.70	0.02
32	C₁₅H₂₂	（2R，4aS）-4a，8-二甲基-2-（丙-1-烯-2-基）-1，2，3，4，4a，5-六氢萘	（2R， 4aS）-4a， 8-Dimethyl-2-（prop-1-en-2-yl）-1， 2， 3， 4， 4a， 5-hexahydronaphthalene	82462-31-5	1.64	0.03
33	C₁₅H₂₄	2，6，6，8-四甲基三环［5.3.1.0^1，5］十一碳-9-烯	2， 6， 6， 8-tetramethyltricyclo［5.3.1.0^1，5］undec-9-ene	21996-77-0	1.54	0.05

Sample	Length （bp）
Min-length	59
Max-length	5 317
Mean-length	1 666
N50	1 792

Sample	Length （bp）
Min-length	59
Max-length	5 317
Mean-length	1 666
N50	1 792