]*>","")" /> 柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因(λMZ5-7)在大肠杆菌中的表达

• 论文 • 上一篇    下一篇

柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因(λMZ5-7)在大肠杆菌中的表达

韩红玉;黄兵   

  1. 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点实验室 上海200232
  • 出版日期:2001-12-26 发布日期:2001-12-26

  • Published:2001-12-26 Online:2001-12-26

摘要: 将重组克隆质粒 (PGEM -λMZ)用EcoRI酶切后 ,电泳回收目的片段 ,克隆到经EcoRI酶切、CIAP处理的表达载体 pET - 2 8a中 ,转化大肠杆菌JM 10 9感受态细胞 ,得到的转化子经PCR鉴定和酶切分析 ,筛选出符合正确阅读框的重组子 ,构建成重组表达质粒 (PET -λMZ) ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)表达菌中成功地表达了含目的蛋白的融合蛋白 ,融合蛋白的分子量约 34KDa ,加入IPTG诱导 6h后 ,蛋白表达接近最高水平。表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化 ,SDS -PAGE检测为单一条带。经Western -blotting杂交实验 ,纯化出的目的蛋白能与兔抗E .tenella第二代裂殖子抗血清发生反应 ,说明MZP蛋白是E .tenella第二代裂殖子抗原蛋白 ,具有一定的免疫原性 ,为进一步研究重组疫苗创造了一定的条件

关键词: 柔嫩艾美耳球虫, 第二代裂殖子, 表达