]*>","")" /> 随机扩增多态DNA规范化反应体系的探讨

• 论文 • 上一篇    下一篇

随机扩增多态DNA规范化反应体系的探讨

蒋曹德;邓昌彦;熊远着   

  1. 农业部猪遗传育种重点开放实验室,农业部猪遗传育种重点开放实验室,农业部猪遗传育种重点开放实验室 武汉430070
  • 出版日期:2002-06-26 发布日期:2002-06-26

  • Published:2002-06-26 Online:2002-06-26

摘要: 在研究猪分子标记遗传距离同杂种优势的关系时 ,对模板浓度和纯度、引物浓度、dNTP浓度、Mg2 +浓度、不同商标的Tag酶等影响RAPD扩增的因素进行了系统的分析 ,在此基础上建立了适宜于本实验室研究的最佳RAPD技术体系 :2 5 μl反应体系中 ,含 10×buffer 2 .5 μl,MgCl2 1.75mmol/L ,dNTP 0 .2 5mmol/L ,引物 0 .2 4μmol/L ,Tag酶 2U ,模板 5 0~ 10 0 μg ,1μg/μlBSA。反应程序为 :94℃预变性 5min ,然后 94℃变性 1min ,36℃退火1min ,72℃延伸 2min4 0个循环 ,最后在 72℃延伸 10min。

关键词: 猪, RAPD, 影响因素, 规范化