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禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及检测

牛星;韦平;   

  1. 广西大学动物科技学院;
  • 出版日期:2008-06-26 发布日期:2008-06-26

  • Published:2008-06-26 Online:2008-06-26

摘要: 根据禽网状内皮组织增生症病毒(REV)SNV株的前病毒基因组cDNA序列,设计并合成1对引物,以SNV株前病毒cDNA全基因组克隆为模板,通过PCR技术扩增出该病毒囊膜糖蛋白env基因部分片段。将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGEX-6P-1载体中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的下游,将重组质粒转化进宿主菌BL21中,在1.0mmol/LIPTG(37℃)诱导下,env基因部分片段以融合蛋白的形式获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,确定其表达的融合蛋白相对分子质量为72kD,并经Western-blot检测,发现在72kd目标条带处呈现一棕红色印迹。

关键词: 禽网状内皮组织增生症病毒, env基因, 融合蛋白, 表达, 间接荧光