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大肠杆菌腺苷脱氨酶基因的克隆表达

栾海涛;丁庆豹;欧伶;魏晓琨;许彦梅;   

  1. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海璞诚生物科技有限公司;
  • 出版日期:2010-03-26 发布日期:2010-03-26

  • Published:2010-03-26 Online:2010-03-26

摘要: 将大肠杆菌K12菌株来源的腺苷脱氨酶基因(add)克隆到载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过IPTG诱导,SDS-PAGE检测和酶活性的测定发现,重组菌表达产生大量腺苷脱氨酶,活性达到51.07U/mg蛋白。通过酶性质的研究,腺苷脱氨酶对腺苷最适pH和温度分别为7.5和40℃,且在40℃下维持稳定。

关键词: 大肠杆菌, 腺苷脱氨酶, 基因工程