LOH12CR1 互作蛋白GPS2 的筛选及鉴定

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (4): 201-205.

LOH12CR1 互作蛋白GPS2 的筛选及鉴定

王永俊¹, 王迎伟², 施小六¹, 林若蘅¹, 张文婷¹, 沈宏伟¹

1. 中南大学湘雅二医院，长沙 410011 ；2. 柳州市人民医院，柳州 050000

收稿日期:2012-10-19 修回日期:2013-04-22 出版日期:2013-04-22 发布日期:2013-04-22
作者简介:王永俊，女，博士，主治医师，研究方向：消化道肿瘤的发病机制

Screening and Identifying of GPS2 ：a Novel Interactive Protein of LOH12CR1

Wang Yongjun¹, Wang Yingwei², Shi Xiaoliu¹, Lin Ruoheng¹, Zhang Wenting¹, Shen Hongwei¹

1. The Second Xiangya Hospital of Central South University，Changsha 410011 ；2. The People’s Hospital of Liuzhou City，Liuzhou 050000

Received:2012-10-19 Revised:2013-04-22 Published:2013-04-22 Online:2013-04-22

摘要/Abstract

摘要： 12 号染色体短臂杂合子缺失的现象存在于多种血液科肿瘤和实体瘤患者中，提示此区域中可能存在抑瘤基因， LOH12CR1 是此区域中已鉴定的基因之一。为探讨LOH12CR1 的生物学功能，首先采取酵母双杂交系统筛查其互作蛋白，鉴定到转录调控因子GPS2 是其互作蛋白。进一步在HEK293 细胞中运用免疫共沉淀方法证实GPS2 与LOH12CR1 在体内存在相互作用；免疫荧光共定位结果显示GPS2 与LOH12CR1 在细胞核内存在共定位信号。

关键词: LOH12CR1, GPS2, 酵母双杂交, 蛋白质相互作用, 免疫共沉淀

Abstract: Loss of heterozygosity of the short arm of chromosome 12 is a frequently observed in a wide variety of haematological malignancies and solid tumours, suggesting the presence of tumour suppressor genes in this region. LOH12CR1 is one of the genes identified in 12p12. To explore the normal function of LOH1CR12, yeast two-hybrid system was used to screen proteins interacting with LOH1CR12, and the transcriptional regulator GPS2 was identified as a LOH1CR12- interacting protein. Furthermore, GPS2 was confirmed to interact with LOH1CR12 in vivo in HEK-293 cell by co-immunoprecipitation, and the co-localization of GPS2 and LOH1CR12 in nucleus was observed by immunofluorescent co-localization.

Key words: LOH12CR1, GPS2, Yeast two-hybrid system, Interactive protein, Co-immunoprecipitation

王永俊, 王迎伟, 施小六, 林若蘅, 张文婷, 沈宏伟1. LOH12CR1 互作蛋白GPS2 的筛选及鉴定[J]. 生物技术通报, 2013, 0(4): 201-205.

Wang Yongjun, Wang Yingwei, Shi Xiaoliu, Lin Ruoheng, Zhang Wenting, Shen Hongwei, . Screening and Identifying of GPS2 ：a Novel Interactive Protein of LOH12CR1[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(4): 201-205.

参考文献

［1］ Montpetit A, Boily G, Sinnett D, et al. A detailed transcriptional map of the chromosome 12p12 tumour suppressor locus[J]. Eur J Hum Genet, 2002, 10（1）：62-71.
［2］ Montpetit A, Larose J, Boily G, et al. Mutational and expression analysis of the chromosome 12p candidate tumor suppressor genes in pre-B acute lymphoblastic leukemia[J]. Leukemia, 2004, 18（9）: 1499-1504.
［3］ Beausoleil SA, Ville?n J, Gerber SA, et al. A probability-based approach for high-throughput protein phosphorylation analysis and site localization[J]. Nat Biotechnol, 2006, 24（10）：1285-1292.
［4］沈宏伟, 王向平, 殷照初, 等. 新的STK11 互作蛋白LOH12CR1 的筛选及鉴定[J]. 自然科学进展, 2008, 18（1）：25-31.
［5］ Green AS, Chapuis N, Lacombe C, et al. LKB1/AMPK/mTOR signaling pathway in hematological malignancies：from metabolism to cancer cell biology[J]. Cell Cycle, 2011, 10（13）：2115-2120.
［6］ Fields F, Song O. A novel genetic system to detect protein- protein interactions [J]. Nature, 1989, 340 ：245-246.
［7］ Spain BH, Bowdish KS, Pacal AR, et al. Two human cDNAs, including a homolog of Arabidopsis FUS6（COP11）, suppress G-protein- and mitogen-activated protein kinase-mediated signal transduction in yeast and mammalian cells [J]. Mol Cell Biol, 1996, 16（12）：6698-6706.
［8］ Jin DY, Teramoto H, Giam CZ, et al. A human suppressor of c-Jun N-terminal Kinase 1 activation by tumor necrosis factor α[J]. J Biol Chem, 1997, 272（41）：25816-25823.
［9］ Zhang J, Kalkum M, Chait BT, et al. The N-CoR-HDAC3 nuclear receptor corepressor complex inhibits the JNK pathway through the integral subunit GPS2 [J]. Mol Cell, 2002, 9（3）：611-623.
［10］ Diederichs S, Baumer N, Ji P, et al. Identification of interaction partners and substrates of the cyclin A1-CDK2 complex[J]. J Biol Chem, 2004, 279（32）：33727-33741.
［11］ Degenhardt YY, Silverstein SJ . Gps2, a protein partner for human papillomavirus E6 proteins [J]. J Virol, 2001, 75（1）：151-160.
［12］ Peng YC, Kuo F, Breiding DE, et al. AMF1（GPS2）modulates p53 transactivation[J]. Mol Cell Biol, 2001, 21（17）：5913-5924.
［13］ Lee TH, Yi W, Griswold MD, et al. Formation of hMSH4-hMSH5 heterocomplex is a prerequisite for subsequent GPS2 recruitment [J]. DNA Repair（Amst）, 2006, 5（1）：32-42.
［14］ Zhang D, Harry GJ, Blackshear PJ, et al. G-protein pathway suppressor 2（GPS2）interacts with the regulatory factor X4 variant 3（RFX4_v3）and functions as a transcriptional coactivator [J]. J Biol Chem, 2008, 283（13）：8580-8590.

[1]	王子颖, 龙晨洁, 范兆宇, 张蕾. 利用酵母双杂交系统筛选水稻中与OsCRK5互作蛋白[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 117-125.
[2]	温晓蕾, 李建嫄, 李娜, 张娜, 杨文香. 小麦叶锈菌与小麦互作的酵母双杂交cDNA文库构建与应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 136-146.
[3]	张新博, 崔浩亮, 史佩华, 高锦春, 赵顺然, 陶晨雨. 低起始量的免疫共沉淀技术研究进展[J]. 生物技术通报, 2023, 39(4): 227-235.
[4]	侯筱媛, 车郑郑, 李姮静, 杜崇玉, 胥倩, 王群青. 大豆膜系统cDNA文库的构建及大豆疫霉效应子PsAvr3a互作蛋白的筛选[J]. 生物技术通报, 2023, 39(4): 268-276.
[5]	蔡佳, 梁振宇, 黄瑜, 鲁义善, 施钢, 简纪常. 利用酵母双杂交系统筛选与鉴定石斑鱼EcBAG3互作因子[J]. 生物技术通报, 2022, 38(8): 77-83.
[6]	陈桂芳, 杨佳怡, 高运华, 任歌. 染色质免疫共沉淀测序技术研究进展[J]. 生物技术通报, 2022, 38(7): 40-50.
[7]	石佳, 朱秀梅, 薛梦雨, 余超, 魏一鸣, 杨凤环, 陈华民. 基于水稻原生质体的染色质免疫共沉淀技术优化及应用[J]. 生物技术通报, 2022, 38(7): 62-69.
[8]	杨华杰, 周玉萍, 范甜, 吕天晓, 谢楚萍, 田长恩. 拟南芥IQM4互作蛋白的筛选和鉴定[J]. 生物技术通报, 2021, 37(11): 190-196.
[9]	郝小花, 戴佳利, 暨文劲, 黄丹, 李东屏, 田连福. 水稻籽粒低镉蛋白LCD互作蛋白的筛选与鉴定[J]. 生物技术通报, 2020, 36(11): 21-29.
[10]	王艺桥,赵新杰,牛芳芳,郭小华,杨博,江元清. 拟南芥中WRKY31转录因子的转录活性与互作蛋白分析[J]. 生物技术通报, 2018, 34(5): 101-109.
[11]	尚攀, 付元帅, 施志仪, 喻杰, 刘素萍. 甲状腺激素受体与Drosha蛋白互作鉴定分析[J]. 生物技术通报, 2017, 33(8): 206-212.
[12]	李书鹏, 杨秀芬, 袁京京, 邱德文. 蛋白激发子Hrip1互作蛋白的筛选及其原核表达[J]. 生物技术通报, 2017, 33(6): 182-189.
[13]	李雨，赵磊，陈利，周宇荀，李凯，肖君华. 利用外源RNA作为内参结合qPCR准确检测SF2蛋白RIP富集RNA的效率[J]. 生物技术通报, 2017, 33(5): 78-82.
[14]	袁敏,王莉,葛伟娜,张岚. 拟南芥FD与14-3-3/GRF7蛋白的相互作用研究[J]. 生物技术通报, 2017, 33(5): 117-122.
[15]	郭欣欣,王刚,邓巧亭,吴涵韬,李坤,吴英松,刘天才. 人白细胞介素10受体α基因真核表达及与JAK1蛋白的相互作用的检测[J]. 生物技术通报, 2017, 33(5): 170-175.