]*>","")" /> 绵羊PrP前体蛋白基因真核表达载体的构建及汉逊酵母中的初步表达

• 论文 • 上一篇    下一篇

绵羊PrP前体蛋白基因真核表达载体的构建及汉逊酵母中的初步表达

兰邹然;王志亮;赵永刚;李金明;吴晓东;   

  1. 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心;山东省动物疫病预防与控制中心;
  • 出版日期:2008-06-26 发布日期:2008-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(No.30270981);; 国家科技攻关计划课题(No.2004BA519A53)

  • Published:2008-06-26 Online:2008-06-26

摘要: 根据已知的绵羊PRNP基因序列设计引物,扩增出完整的PrP前体蛋白基因,将获得的基因克隆到pGEM-T载体中,得到插入PrP前体蛋白基因的pGEM-T-OPrP质粒,经PCR、酶切、测序鉴定后,用EcoRI和NotI从pGEM-T-OPrP上切下目的片段后,连接到汉逊酵母表达载体pFMDHZ-α-A中,通过PCR、酶切、插入鉴定保证正确插入后,经电转化将重组质粒pFMDHZ-α-A-OPrP转入多形汉逊酵母中,随后通过甲醇诱导进行表达。本研究表达的绵羊PrP前体蛋白,为绵羊痒的检测及诊断、PrP的结构与功能研究奠定基础。

关键词: PrP, 前体蛋白, 多形汉逊酵母, 表达