青霉菌聚半乳糖醛酸酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

青霉菌聚半乳糖醛酸酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

曹威;张宇宏;张伟;

河北农业大学食品科技学院;中国农业科学院生物技术研究所;

出版日期:2011-11-26 发布日期:2011-11-26
基金资助:
中央级公益性科研院所基本科研业务费(2011-08)

Published:2011-11-26 Online:2011-11-26

摘要/Abstract

摘要： 筛选得到一株能分解果胶的青霉菌(Penicillium sp.),使用简并引物PCR和TAIL-PCR方法从该菌中克隆了一个聚半乳糖醛酸酶基因pgp1。pgp1基因全长1 225 bp,包含2个内含子,其cDNA全长1 104 bp,编码367个氨基酸和一个终止密码子,前18个氨基酸为信号肽序列。将pgp1基因连接pPIC9载体,在巴斯德毕赤酵母表达系统中进行了异源表达。在3L发酵罐水平,培养基中聚半乳糖醛酸酶活力达到700 U/mL。酶学性质测定表明,重组酶蛋白PGP1的最适pH为5.0,在pH4.0-6.0下处理1 h后,剩余酶活力超过90%;最适温度为38℃,以聚半乳糖醛酸为底物,PGP1的Km=(1.172±0.169)mg/mL,Vmax=(0.061±0.002)mg/min/mL。

关键词: 聚半乳糖醛酸酶, 青霉菌, 毕赤酵母, 异源表达

曹威;张宇宏;张伟;. 青霉菌聚半乳糖醛酸酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究[J]. .

[1]	赵思佳, 王晓璐, 孙纪录, 田健, 张杰. 代谢工程改造毕赤酵母生产赤藓糖醇[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 137-147.
[2]	王帅, 冯宇梅, 白苗, 杜维俊, 岳爱琴. 大豆GmHMGR基因响应外源激素及非生物胁迫功能研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 131-142.
[3]	董聪, 高庆华, 王玥, 罗同阳, 王庆庆. 基于联合策略提高FAD依赖的葡萄糖脱氢酶的酵母表达[J]. 生物技术通报, 2023, 39(6): 316-324.
[4]	马玉倩, 孙东辉, 岳浩峰, 辛佳瑜, 刘宁, 曹志艳. 具有辅助降解纤维素功能的大斑刚毛座腔菌糖苷水解酶GH61的鉴定、异源表达及功能分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(4): 124-135.
[5]	陈楠楠, 王春来, 蒋振忠, 焦鹏, 关淑艳, 马义勇. 玉米ZmDHN15基因在烟草中的遗传转化及抗冷性分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(4): 259-267.
[6]	赵昕, 杜玉瑶, 殷子扬, 毛淑红. 胆固醇7α-羟化酶在毕赤酵母中的异源表达[J]. 生物技术通报, 2023, 39(10): 304-310.
[7]	牛馨, 张莹, 王茂军, 刘文龙, 路福平, 李玉. 解淀粉芽胞杆菌不同整合位点对外源碱性蛋白酶表达的影响[J]. 生物技术通报, 2022, 38(4): 253-260.
[8]	王玥, 高庆华, 董聪, 罗同阳, 王庆庆. 密码子优化的吡喃糖氧化酶基因在毕赤酵母中的表达[J]. 生物技术通报, 2022, 38(4): 269-277.
[9]	王博雅, 姜勇, 黄艳, 曹颖, 胡尚连. 慈竹纤维素合酶BeCesA4的克隆及功能分析[J]. 生物技术通报, 2022, 38(11): 185-193.
[10]	王小桃, 邹杭, 吴怡, 向省维, 吕华, 刘超兰, 林家富, 王欣荣, 褚以文, 宋涛. Paraglaciecola hydrolytica中新型β-琼胶酶Aga2的异源表达及酶学性质分析[J]. 生物技术通报, 2022, 38(11): 258-268.
[11]	张彤彤, 郑登俞, 吴忠义, 张中保, 于荣. 玉米NF-Y转录因子基因ZmNF-YB13响应干旱和盐胁迫的功能分析[J]. 生物技术通报, 2022, 38(10): 115-123.
[12]	杨威, 伍茜, 程建国, 罗燕, 王印, 杨泽晓, 姚学萍. 林麝干扰素α基因克隆、表达及转录调控分析[J]. 生物技术通报, 2022, 38(1): 194-204.
[13]	廖兆民, 蔡俊, 林建国, 杜馨, 王常高. 黑曲霉葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母中的表达及产酶条件的优化[J]. 生物技术通报, 2021, 37(6): 97-107.
[14]	杨悦, 陶妍, 谢晶, 钱韻芳. 基于重组毕赤酵母的草鱼C型溶菌酶生物合成及其抑菌活性[J]. 生物技术通报, 2021, 37(12): 169-179.
[15]	刘珊, 叶伟, 朱牧孜, 李赛妮, 邓张双, 章卫民. 一种新型酰基转移酶GPAT的克隆、表达与酶学性质研究[J]. 生物技术通报, 2021, 37(11): 257-266.

青霉菌聚半乳糖醛酸酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价