]*>","")" /> 碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究

• 论文 • 上一篇    下一篇

碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究

金辉;廖思明;王青艳;刘筱梦;黄日波;   

  1. 广西大学生命与科学技术学院;广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心;
  • 出版日期:2011-11-26 发布日期:2011-11-26
  • 基金资助:
    广西自然科学基金重点项目(2010GXNSFD013030);;

  • Published:2011-11-26 Online:2011-11-26

摘要: 将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHIS1525-JH。SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。酶学性质研究表明,该酶的最适温度与pH值分别为60℃与pH8.5,在pH7.0-10.5之间具有较好的稳定性,Km值为1.94 mg/mL,酶活力可达2 516.5 U。

关键词: 碱性α-淀粉酶, 巨大芽孢杆菌, 芽孢杆菌表达系统, 基因表达, 酶学性质