生物技术通报

王彦杰;张超;王晓庆;董丽;

2012, 0(03): 1-8.

摘要 ( 282 )

PDF (1700KB) ( 929 )

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Ethylene-insensitive3(EIN3)和EIN3-like(EIL)蛋白是乙烯信号转导途径中重要的核转录因子。目前已经从多种高等植物中分离得到EIN3/EILs,其属于一个小的转录因子家族。这类转录因子在氨基酸序列N端高度保守,包括酸性氨基酸区、脯氨酸富集区、碱性氨基酸簇等涉及DNA结合的重要结构域,它们通过直接结合到初级乙烯反应元件(PERE)上来调节相关基因的表达。EIN3/EILs转录因子家族不同成员在不同物种间时空表达特性、表达调控模式等均有所差异,各成员主要参与调节植物对乙烯的反应,包括影响幼苗的"三重反应"、植株的生长发育等,并作为乙烯与其他信号间交叉点发挥重要作用。就近几年关于高等植物EIN3/EILs转录因子的研究进展进行综述,以期为后续研究提供理论依据。

生长素的运输及其在信号转导及植物发育中的作用

任怡怡;戴绍军;刘炜;

2012, 0(03): 9-16.

摘要 ( 346 )

PDF (280KB) ( 1884 )

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生长素作为一种重要的植物激素,参与调节植物生长发育的诸多过程,如器官发生、形态建成、向性反应、顶端优势及组织分化等,其作用机理长期以来备受人们关注。生长素的极性运输能使生长素积累在植物体某些特定部位,从而形成生长素浓度梯度,生长素对植物生长发育的调节主要依赖于这一特性。系统阐述生长素的运输特点、运输机理和相关生长素极性运输载体的研究进展;并对生长素信号转导途径中的重要组分及其机理进行了总结;同时较系统地对生长素参与植物体各器官发育过程及调节情况进行综述。

ABA和SA对于提高植物抗旱及抗盐性的研究进展

任菲;张荣佳;陈强;白艳波;黄菲;李雪梅;

2012, 0(03): 17-21.

摘要 ( 190 )

PDF (206KB) ( 783 )

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植物受到环境胁迫后体内会产生活性氧自由基等有害物质,破坏质膜透性,导致植物生长受到抑制。经研究发现脱落酸(ABA)和水杨酸(SA)作为植物的生长调节物质对于提高植物抗性,维持植物正常生长具有重要的意义。综述近年来国内外有关ABA和SA提高植物抗性的最新进展,为研究提高植物抗性提供理论参考。

ERFs转录因子及其在植物胁迫应答中的作用

卢丞文;潘晓琪;朱本忠;

2012, 0(03): 22-27.

摘要 ( 183 )

PDF (237KB) ( 725 )

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ERFs(ethylene-responsive factors)是植物特有的一类转录因子,位于乙烯信号转导途径的下游,具有一个高度保守的含58或59个氨基酸的DNA结合域,通过结合相关基因的启动子顺式作用元件调控植物生物和非生物胁迫反应。综述ERF转录因子的结构特征和分类及其在植物抗逆作用中的研究进展。

n-3 PUFAs对脂质代谢和炎症-免疫的调节机制

段叶辉;印遇龙;李丽立;李凤娜;杨焕胜;孙效名;

2012, 0(03): 28-34.

摘要 ( 145 )

PDF (262KB) ( 1285 )

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n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)是一种重要的营养物质,其具有多种生理作用,可作为一种基因表达的调控物直接和独立地调控基因表达,并广泛地影响着动物体内有关代谢及生理病理现象。主要从调节机制方面对n-3 PUFAs对机体脂质代谢和炎症-免疫的影响进行综述。

杆状病毒在载体疫苗中应用的研究进展

万婧;周向阳;方维焕;

2012, 0(03): 35-41.

摘要 ( 153 )

PDF (253KB) ( 514 )

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目前利用来源于哺乳动物的病毒作病毒载体介导动物和人体的免疫应答存在诸多问题,如预存免疫和高致病力重组病毒的出现等。将自然条件下宿主为非哺乳类动物的病毒发展为载体的过程中,由于杆状病毒内在的免疫刺激活性、广泛的组织趋向性及生物安全性使杆状病毒成为疫苗载体发展中的有效工具。随着分子生物学的深入发展,国内外学者应用基因工程技术对杆状病毒转移载体进行了深入研究,并取得丰富的研究成果。对杆状病毒作为转移载体在未来载体疫苗发展中的应用进行综述。

酶法制备海洋活性肽及其功能活性研究进展

张岩;吴燕燕;李来好;杨贤庆;宫晓静;

2012, 0(03): 42-48.

摘要 ( 570 )

PDF (251KB) ( 50243 )

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海洋生物活性肽(Marine biological active peptide)是从海洋生物中提取的具有优化机体代谢环境、有益于机体健康的一类多肽。酶法制备海洋生物活性肽是目前最常用的制备方法,是通过适当的蛋白酶水解海洋生物蛋白来制备生物活性肽的一种方法。海洋生物活性肽在降血压、抗氧化、抗凝血及抗菌等方面效果显著,对治疗和预防疾病具有巨大潜力。介绍海洋生物活性肽在酶解制备及其生物学功能方面国内外研究进展,为进一步开展海洋活性多肽研究提供参考。

微核技术研究进展

龚婧婧;黄海涛;米其利;倪红梅;季秀玲;夭建华;

2012, 0(03): 49-56.

摘要 ( 369 )

PDF (279KB) ( 1582 )

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微核试验作为检测染色体损伤最常用而有效的细胞遗传学检测方法之一,经济、简便、快速,在敏感性、特异性和准确性方面,与经典的染色体畸变分析方法基本相当。主要综述国内外微核检测技术的最新研究进展,尤其是微核的自动化检测技术。其中流式细胞仪自动化检测和激光扫描细胞仪自动化检测,以及微核试验高内涵筛选方法由于其特有的优势,应用和发展前景广阔。

拟南芥转录因子NF-YC的原核表达及多克隆抗体制备

卫静;李长江;刘亚静;黄桂雪;张凌云;

2012, 0(03): 57-62.

摘要 ( 176 )

PDF (980KB) ( 537 )

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采用PCR方法扩增NF-YC基因得到其全长cDNA序列,并将其克隆至原核表达载体pET-48b中,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导出分子量约为45 kD的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。利用亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,纯化后的目的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。间接ELISA检测抗体效价大于1 62 500,Western blotting结果显示,该抗体可特异性识别NF-YC蛋白。

拟南芥中柯浩体蛋白Atcoilin的克隆、表达及纯化

张静;田兆丰;朱文壮;张飞云;

2012, 0(03): 63-68.

摘要 ( 128 )

PDF (2034KB) ( 482 )

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旨在制备柯浩体的标志蛋白——Atcoilin蛋白,利用pET-28a与目的基因构建重组表达质粒,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,产物用SDS-PAGE及Western blotting分析鉴定。通过分别改变IPTG的浓度、培养时间、培养温度等来优化Atcoilin蛋白的表达条件。表达出的重组蛋白经过镍柱、分子筛进行纯化。结果显示,原核表达载体pET28a-At1g13030成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相应的重组蛋白经Western blotting鉴定正确。在IPTG浓度为0.7 mmol/L,18℃培养20 h的条件下,目的蛋白表达量最高。经过SDS-PAGE分析鉴定,过镍柱、分子筛后得到的重组蛋白纯度较高。

花生白藜芦醇合酶基因的克隆与生物信息学分析

黄秀琴;郭丽琼;李小明;林俊芳;袁致浩;谭铭琛;

2012, 0(03): 69-74.

摘要 ( 158 )

PDF (1304KB) ( 541 )

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利用Protparam、iPSORT prediction、ProtScale、SOPMA、Swiss-Modeling和Scan Prosite等生物信息学工具分别对其理化性质、信号肽、疏水性、亲水性、二级结构和三级结构进行分析。以花生粤油45总DNA和总RNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术克隆花生白藜芦醇合酶基因的DNA和cDNA序列,并利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息学工具对其基因和蛋白质序列进行了分析。测序结果显示,该基因的DNA和cDNA序列长度分别为1 498 bp和1 251 bp,cDNA序列具有完整的开放性阅读框,编码389个氨基酸的多肽。该白藜芦醇合酶氨基酸368-378位点上存在芪合酶家族的特征位点GVLFGFGPGLT。同源性分析表明,其碱基序列与已报道的花生白藜芦醇合酶基因的一致性为99%,其氨基酸序列与已报道的花生白藜芦醇合酶氨基酸序列的一致性为100%。

花生金属硫蛋白基因AhMT3a的克隆及其表达

全先庆;高成香;王兴军;赵传志;

2012, 0(03): 75-79.

摘要 ( 140 )

PDF (1374KB) ( 410 )

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以鲁花14号花生为材料,从花生cDNA文库和基因组中筛选和克隆了花生的金属硫蛋白基因AhMT3a。该基因全长785 bp,有2个内含子,开放阅读框由201个碱基组成,编码66个氨基酸,其中包含13个半胱氨酸(Cys),预测其分子量为6.83kD,等电点为4.59。运用生物信息学手段对AhMT3a蛋白的信号肽、跨膜区、亚细胞定位和疏水性进行了预测。与拟南芥、棉花和草莓等植物type 3 MTs的序列比对结果表明,花生和其他不同植物的MT3在氨基酸序列上具有较高的同源性,从系统发育树中可以看出AhMT3a和蒿麦的金属硫蛋白亲缘关系较近。半定量RT-PCR和芯片杂交结果显示花生AhMT3a在花中表达量最高,在种子中表达量最低;在ABA、NaCl及PEG等不同处理下,表达量变化不大。

M yb28基因表达载体的构建及拟南芥转化

任莉;刘慧英;王华森;朱祝军;

2012, 0(03): 80-84.

摘要 ( 169 )

PDF (944KB) ( 592 )

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利用通过RT-PCR扩增到的M yb28(GenBank注册号:HQ270468)基因分别构建正义和反义植物表达载体,采用冻融法转入农杆菌LBA4404菌株,通过花序浸泡法对Myb28基因缺失的拟南芥进行了遗传转化,经RT-PCR和酶切鉴定,结果表明Myb28正义和反义真核表达载体构建成功,经基因组PCR鉴定表明正义表达载体已成功整合到拟南芥基因组中。

亲环素AtCYP1 RNA干涉载体的构建及对拟南芥发育的影响

范继业;张静;翟少华;武明明;张滨;

2012, 0(03): 85-89.

摘要 ( 162 )

PDF (1497KB) ( 968 )

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根据拟南芥AtCYP1基因序列设计特异引物,以拟南芥总DNA为模板,扩增AtCYP1基因中344 bp转录本,插入表达载体PTCK303,构建目的基因RNA干扰载体Ubi::AtCYP1i。利用改良的农杆菌浸染技术获得拟南芥RNAi转基因株系,RT-PCR分析结果表明转基因株系中AtCYP1基因的表达量低于野生型,表型观察结果表明RNAi转基因纯合株系抽苔时间比野生型晚3.32 d,抽苔叶片数较野生型多2.49片,其开花时间、结出第一个种荚的时间、株高等方面也与野生型存在明显差异。此结果说明AtCYP1可能参与了拟南芥的早花发育过程,为进一步研究其在植物生长发育中的功能奠定了基础。

内蒙古白绒山羊4E-BP1基因cDNA克隆及组织表达特异性分析

傅海霞;杨娇馥;梁燕;陈宇浩;王志钢;

2012, 0(03): 90-94.

摘要 ( 114 )

PDF (1021KB) ( 379 )

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旨在克隆内蒙古白绒山羊4E-BP1(真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1)基因并进行生物信息学及表达模式分析。根据已报道物种4E-BP1基因cDNA序列,用primer premier5软件设计引物,通过RT-PCR从绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA中扩增出4E-BP1基因编码区cDNA序列,对目的片段进行测序及表达模式分析。克隆到的内蒙古白绒山羊4E-BP1基因cDNA全长357 bp,包含了完整的的ORF,编码118个氨基酸残基。核酸序列与牛、马、人、大鼠及小鼠的同源性分别为98%、90%、90%、88%和87%。4E-BP1基因在绒山羊脑、心脏、睾丸及胰腺组织中均有表达。

山羊传染性胸膜肺炎病原快速诊断方法的建立

张双翔;周碧君;程振涛;文明;王开功;崔亚兰;李泽民;覃岚;钟文彬;

2012, 0(03): 95-99.

摘要 ( 88 )

PDF (1345KB) ( 401 )

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为准确快速鉴定临床疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原,针对丝状支原体山羊亚种(Mmc)与绵羊肺炎支原体(Mo)16S rRNA基因设计两对特异性引物Ps/Pa、Ms/Ma,通过优化反应条件及体系,建立检测CCPP两种主要致病支原体的双重PCR方法,并检测了所建方法特异性、敏感性及临床应用。当引物、Mg2+及dNTP浓度分别为0.8 pmol/μL、1.5 nmol/μL、0.2 nmol/μL,Ps/Pa与Ms/Mo比例为1 1时,于54℃退火40 s,可最小检出Mmc与Mo核酸量分别为0.1 ng、0.01 ng,敏感性良好。通过特异性与临床疑似病例检测,证明所建方法具较好特异性,可初步应用于临床诊断。

小鼠MKP4基因组织、细胞表达谱研究

黎兵;郑国波;杨艳;欧阳旭红;刘艳君;

2012, 0(03): 100-103.

摘要 ( 105 )

PDF (756KB) ( 480 )

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为了探讨MKP4基因mRNA在正常雄性C57小鼠的组织表达分布及其在3T3-L1脂肪细胞诱导进程中的表达谱。采用经典诱导分化方案诱导3T3-L1前脂肪细胞,分别收集前脂肪细胞、诱导分化day0、day2、day5、day8和day9的细胞,同时取正常C57雄性小鼠(鼠龄12周,数量n=3)多处组织如心、胰、肝、脂肪、脑、肾及睾丸等,并提取组织、细胞总RNA,RT-QPCR(荧光染料法)检测MKP4基因mRNA表达水平。结果显示MKP4基因在C57小鼠体内存在较广的表达谱,在肝脏、脂肪的表达量最高,其次为脑组织,其它组织存在低度表达;在3T3-L1前脂肪细胞、诱导分化day0、day2中表达极低,在day5中表达骤然升高,随后表达相对增高,于day9表达水平趋于平稳。MKP4基因组织表达谱结果表明其在维持正常生理功能可能发挥一定的作用,在胰岛素敏感相关组织肝脏、脂肪中表达量较高,提示可能参与胰岛素抵抗(IR)的发生与发展过程。此外,MKP4在3T3-L1前脂肪细胞诱导进程中表达上调,表明MKP4可能参与了脂质积累、肥胖等代谢疾病的发生与发展。

哺乳动物抗凝血酶基因的分子特征、微共线性与适应性进化

张国俊;胡利宗;李书粉;宋向凤;

2012, 0(03): 104-110.

摘要 ( 120 )

PDF (1701KB) ( 588 )

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抗凝血酶(AT)是哺乳动物体内重要的天然抗凝血因子之一,它隶属于丝氨酸蛋白酶抑制物家族,主要参与并调节复杂的血凝过程。基于比较基因组学手段,共挖掘出17个哺乳动物抗凝血酶基因(AT),并剖析了它们的基因结构、微共线性、保守基序、功能结构域、以及系统进化关系。基因结构与微共线分析表明,哺乳动物AT基因具有5-12个外显子,大多数是7个外显子;不同物种AT基因所处区段之间具有较好的共线性。哺乳动物AT蛋白特征分析显示,SERPIN功能结构域与保守基序1、2、3、4、5、8和9存在相互重叠的部分。AT基因进化树揭示基因进化和通常认为的物种进化几乎一致。同时,利用PAML中Codeml的位点特异模型在AT基因中发掘了1个正选择位点328D。

一株脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件优化研究

欧阳敏;孙晗笑;莫雪梅;李秀英;张光;

2012, 0(03): 111-116.

摘要 ( 186 )

PDF (1003KB) ( 536 )

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通过利用溴甲酚紫显色培养基初筛和酶活测定法复筛得到产脂肪酶的一株细菌HP2,经形态学观察和生理生化测定初步鉴定该菌株为不动杆菌属。并对该菌株的摇床培养产酶条件进行了初步研究,采用正交试验对HP2菌株发酵产脂肪酶的条件进行了优化,得到最佳发酵条件为初始pH为7.7,培养温度为35℃,接种量(V/V)为1.5%,发酵周期为48 h,酶活力达到129.7 U/mL。

一株根际放线菌的分离鉴定及其生物活性初探

袁丽杰;刘爱华;张玉琴;余利岩;张月琴;

2012, 0(03): 117-122.

摘要 ( 130 )

PDF (628KB) ( 366 )

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从四川重庆药用植物蒿本根际土中分离到一株放线菌I06-02658,该菌株的发酵产物具有Caspase7抑制活性。菌株I06-02658在供试培养基上生长良好,形成丰富的基内菌丝,颜色从乳白到肉粉。在部分供试培养基上形成丰富的气生菌丝,产生浅黄至浅粉色可溶性色素。系统发育、化学分类特征、形态特征、生理生化特性等分析表明菌株I06-02658是糖霉菌属(Glycomyces)的一个菌株。

拟茎点霉ISSR-PCR反应体系的优化

吴鸣谦;闫淑珍;陈双林;

2012, 0(03): 123-127.

摘要 ( 134 )

PDF (987KB) ( 365 )

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旨在探讨TaqDNA聚合酶、dNTP、Mg2+、引物和模板DNA等因素对ISSR-PCR扩增的影响,采用单因子试验和正交设计方法相结合建立并优化拟茎点霉反应体系。在此基础上进行引物筛选,同时通过梯度PCR试验,确定引物的最佳退火温度。通过对19个拟茎点霉菌株的检验,结果表明已确立的体系稳定可靠,对不同模板均有较好的适用性和通用性,为利用ISSR技术对拟茎点霉进行遗传分析奠定基础。

固氮类芽孢杆菌YUPP-5中环糊精糖基转移酶基因的克隆与功能分析

周燚;杨廷宪;杨佩;孙正祥;王斌先;杨晓秋;孙明;

2012, 0(03): 128-134.

摘要 ( 170 )

PDF (1762KB) ( 613 )

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从魔芋根际分离的固氮类芽孢杆菌Paenibacillus azotofixans YUPP-5对多种β-1,4糖苷键连接的多糖具有水解作用。通过构建该菌的fosmid文库,克隆到2 157 bp的基因片段,编码环糊精糖基转移酶。大肠杆菌中表达此酶,能降解葡甘聚糖、羧甲基纤维素钠盐、几丁质、木聚糖等多种β-1,4糖苷键连接的多糖,同时该酶还能以葡甘聚糖为底物生成β-1,4糖苷键连接的环糊精,而文献报道这种酶仅能利用α-1,4糖苷键连接的淀粉为底物生成环糊精;并展示了环糊精糖基转移酶的一些新功能。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达

戴苏;赵小兰;林影;韩双艳;

2012, 0(03): 135-140.

摘要 ( 172 )

PDF (1072KB) ( 599 )

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将来自枯草芽孢杆菌的碱性脂肪酶基因经密码子优化,全基因合成后克隆到pPICZαA载体,构建了pPICZαA-bsl分泌型重组质粒,该重组质粒经限制性内切酶PmeI线性化后使用LiCl法转化到毕赤酵母X-33,经过筛选获得分泌表达碱性脂肪酶的重组毕赤酵母X-33/pPICZαA-bsl。摇瓶发酵液上清酶活最高可达4.78 U/mL,初步研究了该脂肪酶的酶学性质,其最适作用温度为40-60℃,最适pH9.0,且具有高度耐碱的特性。该重组脂肪酶对旧新闻纸具备较明显的脱墨能力。

农杆菌介导的河北杨遗传转化体系的建立

王沛雅;杨晖;杨涛;张军;郭琪;强维亚;周剑平;

2012, 0(03): 141-147.

摘要 ( 147 )

PDF (387KB) ( 429 )

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以兼具生态和能源植物功能的木本模式植物——杨树(河北杨)为材料,研究了携带促生长基因(35S-DAS5)的根癌农杆菌载体介导的河北杨遗传转化若干因素对转化效果的影响。结果显示,较适宜的转化系统为预培养2-4 d,农杆菌菌液(OD600值为0.4)侵染20 min,共培养4 d,在含30 mg/L卡那霉素(Km)的培养基上诱导不定芽,生根培养基中Km的适宜浓度为10 mg/L。

HeLa细胞cDNA文库及酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308的构建

田颖新;王春苗;刘雪晴;贾晓晖;贾天军;

2012, 0(03): 148-152.

摘要 ( 161 )

PDF (879KB) ( 532 )

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旨在利用酵母双杂交系统构建HeLa细胞的cDNA文库,并构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308。从HeLa细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以pGADT7-Rec为载体的HeLa细胞酵母GAL4 AD融合cDNA文库。应用PCR技术扩增目的片段CPn0308,并成功克隆该基因到诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒转化酵母菌株AH109后,检测诱饵载体有无自激活和细胞毒性作用。结果显示,文库展现良好的多态性,重组诱饵载体pGBKT7-CPn0308不具有毒性且未自主激活报告基因,说明该文库和诱饵质粒可用于酵母双杂交系统。

SUA41蛋白表达和纯化及其多克隆抗体制备

黄国文;韩玉珍;傅永福;

2012, 0(03): 153-158.

摘要 ( 119 )

PDF (1239KB) ( 572 )

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旨在制备特异性SUA41多克隆抗体,为深入研究其在植物生长发育中的功能提供有力的分子生物学和生物化学的工具。PCR扩增拟南芥SUA41基因中编码280个氨基酸(401-680位氨基酸)的特异片段,经过GATEWAY的DNA重组技术构建了原核表达载体pDEST17-SUA41,用热休克法转化到E.coliBL21(DE3)star感受态细胞,以异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达出6×His-SUA41融合蛋白,用8 mol/L尿素缓冲液溶解包涵体并且经过水逐级去除尿素获得提纯的融合蛋白,并利用Western blotting鉴定确认。融合蛋白经Ni金属螯合柱亲和层析得以纯化,用SDS-PAGE进一步纯化。纯化的融合蛋白经过SDS-PAGE后切胶回收,免疫小白兔,制备多抗血清,然后用Western blotting进行检测,鉴定血清特异性和效价。结果显示,融合蛋白6×His-SUA41免疫兔,产生特异性的SUA41兔抗血清,可以检测到细菌和拟南芥组织中SUA41蛋白。用水提纯变性剂尿素溶解的包涵体蛋白具有可行性。制备的特异性SUA41兔抗血清效价高,能够有效地识别大肠杆菌表达的和拟南芥的SUA41蛋白。在有合适的对照情况下,该兔抗血清可以用于分析植物中SUA41蛋白的功能。

米曲霉F-81产中性蛋白酶的固定化条件及其特性

汤鸣强;薛盛果;叶鹏;

2012, 0(03): 159-165.

摘要 ( 134 )

PDF (945KB) ( 331 )

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以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂固定化米曲霉F-81产中性蛋白酶,研究了固定化条件及固定化酶的性质。结果表明,固定化的最佳条件为:固定化时间1 h、海澡酸钠浓度4%、戊二醛浓度9%、CaCl2浓度0.7 mol/L。在此条件下固定化的中性蛋白酶活力为游离酶活力的68%。固定化酶的最适作用温度为65℃,最适作用pH值为7.0。60℃下酶稳定性较好,80℃下处理60 min,粗酶中几乎检测不到酶活力;中性蛋白酶pH稳定范围为6.5-9.5。Km值为24.83 mg/mL,最大反应速率Vmax为0.043 12 mg/min。

水稻类受体蛋白激酶基因OsESG1的克隆与生物信息学分析

房孝良;刘炜;

2012, 0(03): 166-172.

摘要 ( 125 )

PDF (1108KB) ( 482 )

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类受体蛋白激酶(receptor-like protein kinase,RLK)在植物生长发育等多种信号的响应中发挥重要作用。以水稻基因组为模板,通过PCR方法,扩增到一条全长2.2 kb左右的目的片段,序列分析结合RT-PCR表明,该片段由一个完整的开放阅读框组成,无内含子,命名为OsESG1(GenBank登录号:HE 584611),其编码蛋白产物包含749个氨基酸残基。结构分析显示,该蛋白产物包含1个跨膜区、胞外S位点糖蛋白(SLG)、PAN_AP结构域和S_TKc结构域,属于S-结构域型类受体蛋白激酶,推测其在植物生殖发育过程中起作用。

重叠延伸PCR法扩增EB病毒BZLF1N-BLRF2融合基因及生物信息学分析

张毅;周淑艳;陈锐;孙业红;李体远;

2012, 0(03): 173-178.

摘要 ( 121 )

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利用重叠延伸PCR技术扩增EB病毒BZLF1N-BLRF2融合基因,构建原核表达载体pGEX-4T-1-BZLF1N-BLRF2,并进行了蛋白的诱导表达。通过序列测定和ORF软件分析,该融合基因含有1个1 005 bp的ORF,编码335个氨基酸。应用生物信息学方法,对该融合基因编码的蛋白ZtaN-p23从氨基酸组成、理化性质、信号肽、疏水性/亲水性、二级结构、亚细胞定位、功能域和高级结构等方面进行了预测和分析。结果表明,该蛋白的预测分子量为46.2 kD,理论等电点约为8.97,是亲水性蛋白,推测它定位于细胞质中。序列分析表明,该蛋白可能具有信号转导、转录调控、免疫应答等功能。预测的二级结构及三级结构都表明该蛋白含有较多的不规则卷曲和α-螺旋,三级结构上呈对称形状。

乙肝相关性肝癌中新基因CHCHD2的生物信息学分析

姚杨;苏杰;刘凯歌;徐锐;成碧萍;

2012, 0(03): 179-185.

摘要 ( 130 )

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应用基因芯片技术获取以稳定转染HBx基因的肝癌细胞HepG2(HepG2-X)及非转染的肝癌细胞HepG2的差异表达的基因,利用生物信息学方法对新基因CHCHD2进行初步分析表明,该蛋白开放性读码框长456 bp,编码151个氨基酸残基,相对分子量为15.55 kD,等电点9.43,是主要定位于线粒体中的亲水性蛋白,二级结构均以α-螺旋和无规则卷曲为主要构件。同源性比较分析结果表明,其碱基序列与已经报道的其他17个物种相似性为64%-99%,且符合种属之间的进化关系。

菜籽降压肽双酶水解液脱色工艺的研究

张艳;刘志伟;

2012, 0(03): 186-190.

摘要 ( 110 )

PDF (357KB) ( 331 )

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用活性炭对菜籽降压肽双酶水解液进行脱色处理,采用单因素试验以及单因素试验基础上的正交试验法。考察活性炭用量、pH、温度、时间对水解液脱色率、肽损失率、活性及ACE抑制率的影响。正交试验优化结果表明,菜籽降压肽双酶水解液脱色最佳工艺为活性炭的用量为1%、脱色pH值为3.0、脱色温度为80℃、脱色时间为50 min,在此条件下脱色率为85.52%、ACE抑制率为57.83%、活性损失率为5.69%。

整合素α_vβ_3对MDA-MB-231BO乳腺癌细胞AKT信号通路的调控

彭远远;王捷;夏冰;杨传红;冼江;

2012, 0(03): 191-195.

摘要 ( 142 )

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旨在探究整合素αvβ3的单克隆抗体LM609在BSP不同表达水平的乳腺癌细胞中对AKT(蛋白激酶B)信号通路的影响。利用免疫细胞化学法检测BSP不同表达水平的乳腺癌细胞中整合素αvβ3的表达量。BSP基因沉默乳腺癌MDA-MB-231BO细胞,Western blotting在蛋白水平检测磷酸化AKT的表达,MTT试验和细胞划痕试验分别检测细胞增殖、迁移能力的变化。结果显示,与231BO-Scrambled细胞相比,231BO-BSP27细胞中BSP蛋白水平明显降低,抑制率达到(59.43±1.71)%;LM609分别处理两株细胞后,与对照组231BO-Scrambled细胞相比,BSP基因沉默组21BO-BSP27细胞中AKT磷酸化水平下调明显,为(33.78±1.51)%(P<0.01);231BO-BSP27细胞和对照组231BO-Scrambled中细胞的增殖和迁移能力均有不同程度的下降(P<0.05)。LM609能够抑制胞内整合素αvβ3功能的表达,进而对AKT信号通路进行调控,并影响细胞增殖和迁移的发生。

基于生物大分子DNA的纳米硫化银的合成

何乃彦;崔薇;郭威;于源华;

2012, 0(03): 196-200.

摘要 ( 104 )

PDF (1128KB) ( 538 )

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利用DNA生物大分子为模板,硫代乙酰胺和硝酸盐为原料,制备出了颗粒状硫化银纳米结构体。同时采用琼脂糖电泳、FESEM、FTIR和XRD等多种表征手段对其结构组成进行了系统的分析,对其形成机理进行了探讨。

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