生物技术通报

生物信息学在发现新基因方面的应用

冯浩咏;苗向阳;罗绪刚;胡婕;

2007, 0(05): 1-5.

摘要 ( 104 )

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自生物信息学作为一门交叉学科诞生以来,其在计算机、农业和生命科学等各方面发挥了重要的作用,在后基因组时代,更是成为发现新基因的重要手段。对生物信息学的概况做了回顾与展望,并简述了生物信息学近年在发现新基因方面所取得的成果。

细菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶分子改造和表达策略

樊英;王建华;滕达;

2007, 0(05): 6-8.

摘要 ( 120 )

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β-1,3-1,4-葡聚糖酶作为一种饲料和食品添加剂有着广泛用途。迄今在杆菌、梭菌、瘤胃细菌、真菌、高等植物中都发现了β-1,3-1,4-葡聚糖酶。综述了细菌来源β-1,3-1,4-葡聚糖酶的性质、结构、分子改造与表达研究进展。

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的分子结构研究进展

赵艳;陈丽梅;李昆志;

2007, 0(05): 9-13.

摘要 ( 235 )

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磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)广泛存在于高等植物、藻类及大多数细菌中,催化C4光合作用固定CO2的第一步反应。在过去的10年中关于PEPC分子的一级结构研究已取得显着的进展,最近,通过X-射线衍射分析阐明了大肠杆菌和玉米C4型PEPC分子的三维结构,就这些研究进展进行总结。

毕赤酵母表达系统外源基因表达序列优化的软件设计

黄义德;杨林骥;张彦定;

2007, 0(05): 14-17.

摘要 ( 110 )

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作为真核生物表达系统,毕赤酵母已成功表达了包括病毒、细菌和真核生物在内的多种外源蛋白。但并非所有的外源序列在毕赤酵母中都能得以高表达,外源序列含有毕赤酵母中低频密码子或是序列中A+T含量不合理是限制高表达的重要原因。根据毕赤酵母密码子使用的有关特性,利用遗传算法,建立外源基因表达序列优化的数学模型,并依此设计一套毕赤酵母外源基因表达序列的优化软件。

微生物代谢工程原理与应用

郝伟丽;刘景芝;赵宝华;

2007, 0(05): 18-23.

摘要 ( 233 )

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代谢工程是利用分子生物学原理系统分析细胞代谢网络,并通过DNA重组技术和应用分析生物学相关的遗传学手段对细胞进行有精确目标的基因操作,改变微生物原有的代谢或调节系统,实现目的产物代谢活性的提高。代谢工程综合了生物化学、化学工程、数学分析等多学科内容,是当前国内外学者研究热点之一。论述了微生物代谢工程的理论基础及其应用进展和前景。

DNA疫苗佐剂研究进展

张天笑;王秀利;袁野;

2007, 0(05): 24-28.

摘要 ( 173 )

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DNA疫苗在免疫应答中能诱导机体产生持久的体液免疫和细胞免疫,然而DNA疫苗刺激机体免疫应答能力往往比常规疫苗引起的免疫反应弱。最近研究表明:使用DNA疫苗佐剂如细胞因子、CpGODN、补体C3d等有助于提高DNA疫苗的免疫效价。就DNA疫苗佐剂的研究进展做一综述。

抗菌肽的筛选策略及其应用研究进展

王海娇;李莉云;刘国振;

2007, 0(05): 29-33.

摘要 ( 166 )

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抗菌肽是生物体产生的、抵抗外源病原物侵袭并具有广谱抗微生物作用的多肽类物质,是天然免疫系统的重要组成部分。从首次发现抗菌肽以来,现在已经获得了上千个有不同活性的抗菌肽候选者。回顾和总结了抗菌肽筛选的策略,包括经典方法、差异显示法、基于核酸的方法以及基于生物信息学分析法等,并重点介绍了最近提出的一种高通量筛选方法。最后本文对抗菌肽的临床应用研究,尤其是对进入临床评价阶段的抗菌肽研究进展进行了综述。

抗生素产生菌诱变育种的研究进展

彭燕;李戈;陈秀贤;曾会才;

2007, 0(05): 34-38.

摘要 ( 109 )

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一种抗生素能否产业化决定于抗生素产生菌菌种的产素水平。因而如何提高抗生素产生菌的产素水平成为抗生素研究工作者长期不懈探索的重要课题。其中,诱变育种以其技术设备简单、省时省力等优点得到了微生物育种工作者的青睐,在诱变育种技术上取得了巨大进展,为抗生素工业化生产发挥了重要作用。综述了抗生素产生菌的诱变育种研究进展。

GAI/RGA蛋白家族的研究进展

李巍;萧浪涛;

2007, 0(05): 39-42.

摘要 ( 150 )

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赤霉素(GAs)通过同细胞膜上的受体结合,经过一系列信号分子传递从而调节植物的生长发育。在已发现的植物GA信号传递分子中,有一类重要的组成元件—GAI/RGA家族蛋白,不仅作用于植物的种子萌发、茎的伸长和花的发育等许多方面,而且在GA信号转导途径与其他植物激素信号转导途径的相互作用中起着非常重要的作用。最近几年,对GAI/RGA家族蛋白的研究取得了惊人的进展。现就GAI/RGA家族蛋白的结构、在GA信号转导中的作用、在植物生长发育中的作用以及在激素相互关系中的作用等方面进行综述。

植物低温诱导转录因子CBF研究进展

刘洋;吴学彦;李海燕;

2007, 0(05): 43-48.

摘要 ( 142 )

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植物在低温驯化过程中能诱导许多基因的表达。其中CBF转录因子是目前植物抗寒分子生物学领域研究的热点之一。它通过与低温诱导基因启动子区域中的CRT/DRE调控元件结合,调控一系列低温诱导基因的表达,从而提高植物的抗寒性。对植物低温诱导CBF转录因子的结构、功能及其表达调控等方面的研究进展进行了综述。

流式细胞仪原理及其在奶牛性别控制上的应用

李楠;王秀利;崔玉东;甘文平;张洪涛;

2007, 0(05): 49-52.

摘要 ( 187 )

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流式细胞仪分离得到的定性奶牛精子,借助人工授精技术或其他相关技术已经生产出许多预知性别的后代奶牛。流式细胞仪分离精子的原理是基于携带有X或Y性染色体精子的DNA含量不同。高性能的流式细胞仪可以达到每小时分离1.5～2×108个精子,并且准确率可达到90%。该项技术的应用使得奶牛的人工授精和低温保存技术更为便利,并且该项技术也可以用于其他养殖动物X、Y精子的分离。

鱼类干扰素系统基因研究进展

李淑英;陈新华;

2007, 0(05): 53-57.

摘要 ( 138 )

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干扰素是一类多基因家族诱导性细胞因子,可在脊椎动物细胞中诱导建立抗病毒状态,并在抗病毒防御中起重要作用。干扰素系统包括应答外界刺激(如病毒感染)而合成干扰素的细胞,和应答干扰素建立抗病毒状态的细胞。干扰素系统基因主要包括Ⅰ型干扰素、Ⅱ型干扰素、干扰素刺激基因以及组成干扰素信号传导系统的基因。鱼类干扰素类作用发现较早,而对其基因的克隆和鉴定较晚。随着哺乳类和鸟类中干扰素及其相关基因研究的开展和深入,近年来鱼类干扰素及其相关基因的研究也得到快速发展。综述了鱼类干扰素系统基因的克隆、鉴定,以及其功能方面的研究进展。

脱落酸受体及相关信号传导的研究进展

赵玄之;萧浪涛;

2007, 0(05): 58-60.

摘要 ( 106 )

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对脱落酸信号传导的研究主要集中在种子成熟和休眠和气孔的运动上。研究者对脱落酸受体上作了大量的工作,但很长时间来仍没有发现脱落酸受体基因。最近,脱落酸受体的研究有了重大突破。研究者在拟南芥中发现FCA和CHLH两个脱落酸受体基因。

功能基因组学及其研究方法

陶彦彬;蒋建雄;易自力;李骏智;

2007, 0(05): 61-64.

摘要 ( 392 )

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随着水稻基因组测序工作的完成以及人类基因组计划(HGP)的顺利进行,生命科学的研究已经进入了后基因组时代。对功能基因组学的研究方法进行了综述,主要包括:微阵列、基因表达系列分析、反义RNA和RNAi、基因敲除、基因陷阱、蛋白质组、生物信息学和功能基因组系统学等。

RNA干扰技术及其在植物研究中的应用

唐少冰;周冬根;

2007, 0(05): 65-67.

摘要 ( 147 )

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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是最近几年发现和发展起来的一门新兴的在转录水平上的基因阻断技术,它是生物体内由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导同源mRNA降解的现象。RNAi广泛存在于从真菌到高等植物、从无脊椎动物到哺乳动物各种生物中。研究表明通过转入目的基因序列的双链RNA可以诱导产生基因沉默现象。同时,RNAi能监控异常的或外源的遗传物质在机体内的水平,并调控基因的表达,是生物体抵御外在感染的一种重要的保护机制,这使得RNA干扰技术具有十分诱人的应用前景。介绍了RNAi的研究历史、作用机制、特点及其在植物研究中的应用。

RAPD在植物研究中的应用

喻晓;文涛;丰先红;

2007, 0(05): 68-71.

摘要 ( 101 )

相关文章 | 计量指标

RAPD作为现代生物科学研究的一项技术得到了广泛应用,在此介绍了RAPD的原理和主要技术步骤及其存在的优缺点,并介绍了RAPD在植物的系统分类、种质资源研究、性状育种、抗性育种、观赏植物育种五个方面的应用;同时,对RAPD在植物研究中的前景作了探讨。

植物中活性氧的检测方法

祁艳;王冬梅;

2007, 0(05): 72-75.

摘要 ( 239 )

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主要对超氧阴离子自由基(O2-·)、过氧化氢(H2O2)等活性氧的检测方法,包括化学发光法、分光光度法、荧光染色法,EPR波谱学方法、DAB组织染色法和电子显微技术检测法等进行了综述,并简单介绍了最近发展起来的一些新技术。

ELISA检测技术在猪瘟诊断中的应用

韩庆功;崔艳红;张智勇;

2007, 0(05): 76-78.

摘要 ( 126 )

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猪瘟是危害养猪业发展的重要传染病,给养猪业带来巨大的经济损失。对此,猪场迫切需要及时诊断猪瘟和定期检疫猪瘟。只有研究出快速、灵敏、准确、便捷的实验室诊断方法,才有助于清除猪瘟亚临床感染猪,更有效地控制和扑灭猪瘟。ELISA检测方法是近年来研究和应用较多的检测方法,其在猪瘟的诊断上已广泛研究开发,并且取得了较好的检测效果。

转基因鸡的制备方法探讨

张红涛;苗向阳;白林;刘羞菲;

2007, 0(05): 79-83.

摘要 ( 124 )

相关文章 | 计量指标

由于鸡本身的众多优点,转基因鸡的研究逐渐受到了研究者的重视,简要介绍了转基因鸡的发展史,对各种转基因技术方法进行了比较和分析,提出了每种方法的优缺点,尤其在精子介导法上作了较为详细的论述,并展望了转基因鸡的应用前景。

分子生物学技术在腐霉菌分类上的应用研究

陈秀贤;曾会才;H.H.Ho;彭燕;

2007, 0(05): 84-88.

摘要 ( 92 )

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腐霉是一类世界性分布菌物,它可腐生、寄生或兼性寄生,又可陆生、水生或者水陆两栖生。目前世界各地被描述的腐霉种达250个,超过80种是植物重要的病原菌。腐霉主要引起各种植物根腐和幼苗猝倒,对农作物造成较大的损失。通过对近年来发展起来的腐霉分子生物学分类技术,诸如核糖体DNA(rDNA)转录内间隔区(ITS)的直接测序方法、分子杂交技术、PCR及改良PCR技术、基于线粒体DNA(mtDNA)的分析方法等进行了简述,为更快捷、准确的病原腐霉的鉴定及诊断技术的开发打下基础。

生物膜脂及脂肪酸的分析方法评述

石玉杰;姚洪军;

2007, 0(05): 89-92.

摘要 ( 112 )

相关文章 | 计量指标

膜脂是生物膜的基本骨架,膜蛋白是膜功能的主要体现者。生物膜脂研究是生物膜研究的一个重要组成部分。结合近几年来的新进展,从生物膜脂的分离和脂肪酸的分析角度出发,综合评述了应用于脂类物质分析的TLC、GC、HPLC、CE为代表的主要分析方法,以及CE-MS、HPLC-MS在脂类物质分析中的应用前景。

实时荧光定量PCR技术综述

邓文星;张映;

2007, 0(05): 93-95.

摘要 ( 186 )

相关文章 | 计量指标

实时荧光定量PCR技术是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。与传统PCR相比,实时定量PCR能够更加快速、灵敏,并有效地对核酸进行定量检测。

包涵体蛋白复性的几种方法

罗惠霞;李敏;王玉炯;

2007, 0(05): 96-98.

摘要 ( 199 )

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外源基因在大肠杆菌中高水平表达时,通常会形成无活性的蛋白聚集体即包涵体。包涵体富含表达的重组蛋白,经分离、变性溶解后须再经过一个合适的复性过程实现变性蛋白的重折叠,才能够得到生物活性蛋白。

生物传感器及其实际应用

金振华;李勇;孙君茂;

2007, 0(05): 99-103.

摘要 ( 120 )

相关文章 | 计量指标

以萤火虫发光为例,简述什么是生物传感器;生物传感器的特点和应用效益;生物传感产品在医学诊断、食品、饮料生产企业的卫生检测、环境污染监测等诸多领域中的应用;并对生物传感产品的现有和未来潜在市场作了分析和评价。

枯草杆菌α-淀粉酶基因克隆及其在毕赤酵母中表达的初步研究

柳辉;杨江科;闫云君;

2007, 0(05): 104-108.

摘要 ( 104 )

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以B.subtilis XL-15基因组为模板,运用PCR法成功克隆了α-淀粉酶基因,其开放式阅读框(ORF)为1980bp,编码659个氨基酸残基。分别将该基因转入大肠杆菌BL21(DE3)和毕赤酵母GS115中,进行诱导表达。结果表明,大肠杆菌破碎上清液中未检出酶活,SDS-PAGE电泳分析显示表达产物均以无活性包涵体存在;而毕赤酵母在α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,经高密度培养,表达产物分泌至胞外,发酵液酶活力为4.3U/ml,实现了B.subtilis α-淀粉酶基因的分泌表达。

来源于玫瑰微球菌的麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因在大肠杆菌中的融合表达

许雅琴;袁其朋;李文进;

2007, 0(05): 109-112.

摘要 ( 79 )

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设计引物克隆玫瑰微球菌QS412中麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)的基因treZ,通过与pET-28a(+)载体相连,转化入宿主菌E.coli BL21,进行发酵诱导。通过SDS-PAGE检测到外源基因在大肠杆菌中有很高的MTHase表达量,但大部分都以不溶性包含体形式存在。对菌体超声破碎全菌液检测酶活,结果显示了水解酶酶活。这是来源于微球菌属的麦芽寡糖基海藻糖水解酶首次获得基因克隆和活性表达,为进一步提高酶活、增大海藻糖产量奠定了基础。

梨α-法尼烯合成酶基因的克隆及其序列分析

陈新;刘庆忠;张建鹏;吕慧贞;张元湖;李玲玲;李萌;

2007, 0(05): 113-115.

摘要 ( 97 )

相关文章 | 计量指标

利用RT-PCR技术从鸭梨的果皮中获得了一个全长为1824bp的α-法尼烯合成酶基因(α-Farnesene Synthase,PFS)克隆,该cDNA包含一个由1728个核苷酸组成的开放阅读框架,编码分子量约66kDa的576个氨基酸残基的蛋白质。序列相似性分析结果表明,它与苹果中克隆到的AFS1基因具有很高的同源性,核苷酸序列一致性为97.34%,且具有典型的萜类合成酶基因保守结构域。与来源于黄瓜、杉树、松树的α-法尼烯合成酶基因的同源性较低。

透明颤菌血红蛋白基因在提高枯草芽孢杆菌产脂肽功能中的研究

王大威;胡鸢雷;刘永建;林忠平;

2007, 0(05): 116-119.

摘要 ( 87 )

相关文章 | 计量指标

脂肽是一类具有特殊作用的生物表面活性剂。本实验将血红蛋白基因(vhb)置于RDR细菌启动子驱动下的质粒PSET中,构建PSET-RDR-vhb重组质粒,并通过电激作用转入脂肽代谢菌株-枯草芽孢杆菌株(bacillus subtilis)ZW-3中,转化菌株经酶切和PCR电泳检测鉴定,Southern-blot杂交显示部分转化菌株中外源基因插入基因组DNA,采用一氧化碳差异色谱法测定了血红蛋白的表达量。实验进一步对转化菌株的生长曲线、总蛋白量、过氧化氢酶活性、脂肽的产率进行了测定,结果显示,相比于原始菌株,转化菌株数据均有明显提高。

嗜碱性芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达

孙同毅;陈坤;郝继兴;路福平;杜连祥;

2007, 0(05): 120-123.

摘要 ( 111 )

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从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,Mapr分别插入到大肠杆菌载体pET-22b(+)和枯草芽孢杆菌载体pWB980中构建成重组分泌型表达载体pET22b(+)-Mapr、pWB980-Mapr。碱性蛋白酶基因分别在大肠杆菌宿主BL21和枯草芽孢杆菌DB104中得到表达。SDS-PAGE分析,重组蛋白酶的分子量为28kD。在大肠杆菌,所得酶活为231U/ml,而在枯草芽孢杆菌,其酶活为1563U/ml。大概是由于碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌折叠成熟机制与大肠杆菌的不同造成的。

天花粉蛋白突变基因TCS_(A-S)在大肠杆菌BL21中的表达

姜毅;王林华;赵言安;汪澎;姜国勇;

2007, 0(05): 124-127.

摘要 ( 101 )

相关文章 | 计量指标

天花粉蛋白是具有N-糖苷酶活性的一种植物Ⅰ型核糖体失活蛋白,本研究用PCR方法获得了天花粉蛋白的突变基因TCSA-S,构建了表达载体pET-30a(+)-TCSA-S,转化大肠杆菌BL21(DE3),并在30℃条件下诱导表达。经SDS-PAGE电泳检测,重组的突变体基因TCSA-S表达产物主要存在于包含体中。

康氏木霉基因组DNA提取方法的比较研究

张晓晖;郭春华;江晓霞;罗虹;

2007, 0(05): 128-130.

摘要 ( 118 )

相关文章 | 计量指标

采用3种常规DNA提取方法提取瑞氏木霉基因组DNA。结果表明:冷冻研磨CTAB法更适合此真菌DNA的提取,试剂盒提取的总DNA纯度和浓度也较高,但是价格昂贵,饱和酚抽提法提取的DNA浓度不高,且易有降解现象,不适合分子生物学操作的要求。

不同因素对两株细菌原生质体制备的影响

郑重谊;谭周进;肖克宇;谢达平;蔡锐;

2007, 0(05): 131-135.

摘要 ( 133 )

相关文章 | 计量指标

为了获得较多的原生质体用于原生质体融合,进行了酶解时间与浓度、稳定剂、菌龄、pH值等因素对革兰氏阳性菌株芽胞杆菌KR和革兰氏阴性菌株假单胞菌B13的原生质体制备影响的研究,结果表明:在以0.6mol/L蔗糖为稳定剂,pH8.0,溶菌酶浓度8mg/ml,37℃,酶解80min的条件下,芽胞杆菌KR原生质体得率为31.6%;在以.0.6mol/L NaCl为稳定剂,pH7.0,溶菌酶浓度6mg/ml,37℃,酶解45min假单胞菌B13原生质体得率最高,为95.2%。

RNA干扰抑制结肠癌血管内皮生长因子的体内实验研究

康楷;李铁军;胡丽娜;张才全;张秉强;

2007, 0(05): 136-140.

摘要 ( 72 )

相关文章 | 计量指标

目的:应用RNA干扰技术抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达,并通过体内实验,观察在体内复杂环境下能否有效抑制VEGF表达,以及结肠癌细胞凋亡的情况,为RNA干扰技术的临床应用奠定基础。方法:体内实验中,将RNA干扰质粒以水动力法导入结肠癌裸鼠模型,通过RT-PCR观察VEGF mRNA表达受抑的程度;Western杂交检测VEGF蛋白的表达情况;通过测量比较瘤体大小和Tunel法,观察VEGF受抑制后,肿瘤形态和细胞凋亡的变化。结果:体内实验中,通过RT-PCR和Western杂交检测,发现这两种抗VEGF表达载体能够有效抑抑制裸鼠结肠癌模型瘤体VEGF的表达;VEGF受抑制后,瘤体增长受到抑制,Tunel法显示,RNA干扰可致肿瘤细胞凋亡增加。结论:Tunel法分析显示,当VEGF受抑制后,肿瘤细胞凋亡发生率明显增加,针对VEGF基因的shRNA表达载体能够明显抑制裸鼠VEGF基因的表达。

拟除虫菊酯抗性家蝇的交互抗药性研究

罗浑金;李梅;傅童生;邱星辉;候慧丽;姚艳;

2007, 0(05): 141-143.

摘要 ( 83 )

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拟除虫菊酯的广泛使用使家蝇普遍产生了抗药性,为有效的控制家蝇的危害,需要了解家蝇对轮换或新杀虫剂的交互抗性状况。作者用点滴法测定了两个实验室汰选的拟除虫菊酯抗性家蝇品系对几种杀虫剂的交互抗性,结果表明:二氯苯醚菊酯和溴氰菊酯之间存在较高程度的交互抗药性;拟除虫菊酯抗性较高的家蝇对作用机制不同的新农药(多杀菌素、氟虫腈)表现较低程度的交互抗性。

小型猪与梅山猪Prop1基因的比较分析

衡文娜;郭春华;张晓晖;张重庆;陈玉红;

2007, 0(05): 144-147.

摘要 ( 91 )

相关文章 | 计量指标

Prop1是一种新发现的参与早期胚胎垂体发育的特异性转录因子。在人和动物均已发现由于该基因突变而引起的综合性垂体功能障碍,进而影响生长和繁殖。小型猪与梅山猪比较,其繁殖力和生长性能差异显着,为了了解这些差异的遗传基础,本试验对五指山猪、藏猪和版纳猪三种小型猪的Prop1基因进行克隆测序,并与已知梅山猪的序列进行对比,结果为:五指山猪与藏猪外显子1第69位发生G-A碱基替换,编码同义氨基酸;藏猪外显子2第115位发生A-G碱基替换,编码终止密码子;藏猪与版纳猪外显子3第466位和第631位均发生C-T碱基替换,第466位藏猪编码同义氨基酸;第631位版纳猪编码丝氨酸(TCC),梅山猪编码脯氨酸(CCC),即两种猪的Prop1基因产物不同。在Prop1基因终止密码下游250左右有一个腺苷酸丰富区,五指山猪与藏猪有15个腺苷酸串联,版纳猪有12个。上述结果为进一步研究大猪和小型猪之间生产性能差异的遗传基础提供了新线索。

猪IGF2基因外显子4b的遗传多态性及其遗传效应

薛慧良;徐来祥;

2007, 0(05): 148-152.

摘要 ( 141 )

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采用PCR-SSCP方法检测猪胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)基因外显子4b的多态性,并分析其对初生重、断奶重、6月龄重和背膘厚的遗传效应。根据猪IGF2基因的DNA序列(AY044828)设计引物,在exon4b上发现了一个多态性位点,并对纯合子进行测序,发现13位C→A转换,且存在3种基因型(AA、AB、BB)。统计结果表明,3种基因型在各品种中的分布不一致,长白猪与大白猪比较,莱芜猪与大薄莲猪比较,沂蒙黑猪和里岔黑猪比较差异不显着(P>0.05);其他猪种间基因型分布的差异均显着(P<0.05)。固定效应模型分析结果表明,初生重,断奶重和背膘厚基因型间差异显着(P<0.05),而6月龄重基因型间差异不显着(P>0.05)。最小二乘分析结果表明,BB基因型个体同AA和AB、基因型个体比较初生重和断奶重的差异显着(P<0.05),3种基因型在初生重和断奶重的大小排列顺序为AA>AB>BB;AA基因型个体同AB和BB基因型个体比较背膘厚的差异显着(P<0.05),3种基因型在背膘厚的大小排列顺序为BB>AB>AA。因此,推测IGF2基因对个体的生长速度和胴体瘦肉率存在一定的影响,将IGF2基因应用于猪育种过程中的标记辅助选择可以加快猪的育种进程。

缢蛏基因组DNA的提取及其效果分析

于颖;王秀利;郑明洁;单雪;

2007, 0(05): 153-155.

摘要 ( 73 )

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应用酚/氯仿抽提法提取缢蛏基因组DNA,并以所提取的基因组DNA为材料进行酶切反应及RAPD分析。结果显示,用酚/仿提取法提取的缢蛏基因组DNA质量高、稳定性好,酶切效果明显,RAPD扩增条带清晰,能满足DNA的酶切、PCR和RAPD等分子生物学实验对于模板DNA质量高的要求。

转基因大豆非同源对照模板QC-PCR检测方法的建立

徐景升;阙友雄;李峰;陈华墙;陈如凯;

2007, 0(05): 156-159.

摘要 ( 85 )

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建立了转基因大豆CP4EPSPS基因的非同源对照模板QC-PCR检测方法。非同源竞争对照构建方法如下:利用CP4EPSPS基因特异引物,以大肠杆菌基因组DNA为异源模板,在低严谨度PCR扩增,回收适宜DNA片段并克隆到pMD-8载体上。该片段与CP4EPSPS基因相应序列除两端引物序列完全相同外,其他部分没有同源性。

棉花生长素应答因子克隆和序列分析

张锋;崔百明;黎娟华;彭明;

2007, 0(05): 160-162.

摘要 ( 95 )

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通过电子克隆和RACE相结合的方法,从陆地棉中克隆到一个新ARF基因。序列分析表明,该基因序列全长为2393其中包括87bp的5′非编码区(5′UTR),1941bp的蛋白质编码区,终止密码子TAA和362bp的3′非编码区。该基因可编码647个氨基酸的蛋白质,分子量为71.9kD,等电点(PI)为8.2。该基因含有一个与拟南芥中ARF基因相似的B3结构域和一个Auxin_resp结合位点,表明该基因与拟南芥ARF基因有很高的同源性,推测具有相似或相同的功能。

甘蓝型油菜Fad2与Fae1基因双干扰RNAi载体的构建

彭琦;张源;双桑;魏然;伍林涛;丁昕;阮颖;刘春林;

2007, 0(05): 163-166.

摘要 ( 101 )

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将来源于甘蓝型油菜XY15的Fad2与Fae1基因编码区,长度分别为349bp和426bp的两个保守序列片段连接成807bp的大片段。然后分别以正反向插入到pFGC5941干扰载体查耳酮合成酶内含子的两端,构建成RNAi载体。以期在菜籽中转录后能有效抑制Fad2与Fae1两个基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长3kb,经限制性内切酶消化、PCR扩增验证和序列测定,证明目标序列与GenBank数据库中的碱基序列一致,并且为正反向插入到pFGC5941载体上。通过农杆菌介导的油菜转化,已获得油菜抗性再生植株144个。

甘蓝迟抽薹基因的RAPD标记

曹维荣;王超;

2007, 0(05): 167-169.

摘要 ( 88 )

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运用RAPD技术,利用混合分离群体法(Bμlked Segregant Analysis,BSA),进行了甘蓝迟抽薹基因相连锁的分子标记研究,得到了与甘蓝迟抽薹基因相连锁的RAPD标记N1-750,其连锁距离为7.9cM。

甜樱桃品种的SSR鉴定

蔡青;姜立杰;马焕普;张开春;张晓明;闫国华;

2007, 0(05): 170-172.

摘要 ( 100 )

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在建立甜樱桃品种SSR分析体系基础上,从24对引物中筛选出5对多态性高、分辨能力强的引物(即PceGA25、PMS3、PMS49、PS08E08、pchpgms3),并且结合S-基因共同对30个甜樱桃品种进行区分鉴别。对生产上应用SSR技术和S-基因检测甜樱桃品种真实性和纯度作了展望。

串叶松香草高效再生体系的建立与兔出血症病毒YL株外壳蛋白基因VP60对其遗传转化

李传山;张婷婷;宋书峰;李维英;孔栋;郭蔼光;

2007, 0(05): 173-178.

摘要 ( 118 )

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通过对串叶松香草(Silphium perfoliatumL.)不同激素浓度配比的诱导分化实验,建立了串叶松香草离体培养高效再生体系,结果表明MS+6-BA(2.0mg/L)+NAA0.1(mg/L)培养基可高效诱导愈伤组织和芽的分化,1/2MS+IBA(0.1mg/L)培养基可快速诱导根的生成,形成再生植株。构建了植物表达载体pBI121-VP60,利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导叶盘法转化串叶松香草以研究高效的串叶松香草转化体系,结果显示以农杆菌LBA4404为介导菌株、以叶片为转化外植体、3d预培养时间和3～4d共培养时间、400mg/L羧苄青霉素和40mg/L卡那霉素筛选浓度转化效果较好,并已筛选到两株拟转基因植株,为利用串叶松香草生产兔出血症病毒动物可食用疫苗建立了初步的技术基础。

曼陀罗茎段愈伤组织诱导和再生植株的研究

黄静;赵琦;赵玉锦;李楠;张世煌;

2007, 0(05): 179-183.

摘要 ( 106 )

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本试验以曼陀罗茎段为外植体,在附加不同植物激素组合的培养基中对愈伤组织的诱导和植株再生进行研究。结果表明:采用修改的MS培养基(除去甘氨酸,维生素B1含量增加至0.5mg/L,pH5.5)附加2mg/L2,4-D可由曼陀罗茎段诱导大量胚性愈伤组织;愈伤组织继代选用0.5mg/L2,4-D为宜;不定芽的诱导采用MS培养基(20g蔗糖,8g琼脂,0.1g水解干酪素)+6-BA(0.5mg/L);幼苗进一步转接至1/2MS+IBA(0.2mg/L)生根培养基中,可完成曼陀罗茎段愈伤组织诱导和再生植株的组织培养过程。

复合诱变法选育香兰素高转化率菌株

王昌禄;包全帅;周庆礼;陈勉华;

2007, 0(05): 184-187.

摘要 ( 101 )

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通过紫外线照射和He-Ne激光修复对香兰素生产菌链霉菌Streptomyces sp.L1936进行复合诱变,得到香兰素高产菌株Streptomyces sp.L1936-8。结果表明:出发菌株经过诱变处理后,脱乙酰酶酶活提高了75%,香兰素氧化酶酶活降低了37.5%,香兰素产量提高了33%。

西洋参悬浮细胞发酵工艺研究

张小兵;闫静辉;李亚璞;吴萌;李春生;陈英珠;程华;

2007, 0(05): 188-193.

摘要 ( 112 )

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探讨了西洋参悬浮细胞分步培养与稀土、D-半乳糖和甘露醇等诱导子对悬浮细胞生长及皂甙产量的影响。发现继代4d后换液一次再继续培养获得的培养物,在皂甙产率和糖利用率等方面优于连续培养;D-半乳糖作为诱导子,对悬浮培养的西洋参细胞生长、皂甙产率及皂甙的分泌等方面都有非常明显的促进作用。

中国香港能否成为中国大陆发展生物技术的桥梁

汪开治;

2007, 0(05): 194-195.

摘要 ( 91 )

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<正>外刊《自然:生物技术》最近刊载了GraceHWWong撰写的有关中国生物技术如何发展的短论。现译介于下。很多年以来,一直有不少的中国学生和学者前来美国学习。这些中国人随后常常在美国找到了工作,并且决定在美国度过其学术生涯。很多来美国

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