生物技术通报

王光华;独军政;薛慧文;常惠芸;

2007, 0(04): 1-4.

摘要 ( 124 )

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口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产新型口蹄疫疫苗是防制该病爆发的有效措施之一。目前,基因工程疫苗成为该领域的研究热点。就口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白和非结构蛋白在大肠杆菌、昆虫细胞、酵母菌、哺乳动物细胞和转基因植物等系统中的表达现状及其基因工程亚单位疫苗研究进展进行综述。

DNA疫苗免疫机制及构建优化载体的研究

张钰;李轶杰;张富春;

2007, 0(04): 5-9.

摘要 ( 120 )

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自20世纪90年代DNA疫苗在免疫学上被第一次提出来以后,10多年来DNA疫苗以其独特的优点而倍受青睐,但近来越来越多关于其免疫效力低下和对灵长类及人等大型动物收效甚微的论证制约着其广泛的应用。即是从DNA疫苗免疫机制方面对构建优化疫苗载体的最新研究进展综述。

信息交流

2007, 0(04): 9-63.

摘要 ( 96 )

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<正>转基因抗虫植物对昆虫天敌的影响东北农业大学农学院吴研、王振营(中国农科院植保研究所)、赵长山等植保研究工作人员在转基因作物给人类带来经济效益的今天,对此课题进行了试验研究,发现转基因抗虫作物对靶标害虫有很好的控制作

植物耐盐的生理机制及基因工程新进展

韩燕燕;鲁艳;吕光辉;

2007, 0(04): 10-14.

摘要 ( 91 )

相关文章 | 计量指标

在各种环境胁迫中,盐胁迫是造成作物减产的严重环境因素之一。主要从耐盐的生理机制和一些下游调节过程入手,包括:离子区隔化、渗透调节、激素调节、去毒化作用、光合途径的改变等,讨论了植物耐盐工程的新进展;同时还讨论了分子水平育种的影响因子。

植物抗寒性研究进展

彭筱娜;易自力;蒋建雄;

2007, 0(04): 15-18.

摘要 ( 107 )

相关文章 | 计量指标

低温是限制植物生长和分布的一种非生物胁迫因素。因此,提高植物的抗寒性对农业具有十分重要的意义。综述了植物抗寒性的最新进展,包括植物抗寒性机理研究,提高植物抗寒力的方法研究和应用情况;提出了在植物抗寒性研究中存在的问题,并对未来工作重点进行了展望。

植物基因工程改善生物质能利用的研究进展

翁海波;韩绍印;高建民;杨德良;

2007, 0(04): 19-21.

摘要 ( 86 )

相关文章 | 计量指标

利用植物木质纤维资源发酵生产乙醇越来越受到人们的重视,但是要实现工业化生产仍然存在很多难题。最近,利用植物基因工程技术,改善植物自身性状,包括减少植物自身细胞壁中木质素含量、细胞中积累表达纤维素酶和木聚糖酶等方法,使自生产生的生物质更利于降解利用。目前,对这种新的能源转基因植物的研究取得了一定进展。

植物抗旱基因及其在草坪草中的应用

孙鏖;易自力;蒋建雄;陈智勇;

2007, 0(04): 22-26.

摘要 ( 85 )

相关文章 | 计量指标

从植物抗旱的生物学原理、渗透调节物质、清除活性氧、保护生物大分子及其膜结构的蛋白质、转录因子及其他酶类的基因工程等方面综述了目前抗旱基因研究的进展以及存在的一些问题。

植物病毒载体在植病互作研究中的应用

李成伟;裴冬丽;

2007, 0(04): 27-30.

摘要 ( 105 )

相关文章 | 计量指标

在植物与病原菌互作的研究中,植物抗性基因和病原菌无毒基因的研究是两个重要的热点。利用植物病毒沉默载体构建的VIGS(Virus Induced Gene Silencing)体系研究植物的防御机制;利用植物病毒表达载体克隆和研究病原菌的无毒基因,将使我们更深刻地理解植物和病原菌互作的分子机理,最终为培育番茄白粉病持久抗性品种打下理论基础。对植物病毒载体的研究进行了综述并就我们承担的课题进行了讨论。

水稻抗旱耐盐蛋白质组学研究进展

舒烈波;梅扞卫;罗利军;

2007, 0(04): 31-37.

摘要 ( 106 )

相关文章 | 计量指标

抗旱耐盐是水稻抗逆研究的重要方向。水稻抗旱耐盐蛋白质组学研究通过观察水稻在干旱和盐胁迫条件下的蛋白质组表达情况,动态分析水稻的蛋白质组变化,使研究的结果和性状联系更紧密,相对于从基因组水平上研究更具实际意义。简要介绍了水稻蛋白质组研究的基本方法和技术并重点叙述了水稻抗旱耐盐蛋白质组研究取得的成果。

生物反应器与药用植物毛状根的大规模培养

陈岺曦;王伯初;

2007, 0(04): 38-41.

摘要 ( 153 )

相关文章 | 计量指标

利用药用植物毛状根培养生产次生代谢产物具有极大的生产潜力,而开发适合毛状根培养的反应器,又是毛状根生产天然产物工业化的关键。本文系统地介绍了各种用于毛状根培养的生物反应器,对通气搅拌式、气升式、超声雾化式等生物反应器各自的特点及优势进行了详细阐述,进一步讨论了各种反应器对于毛状根生长和次生代谢物积累的影响,并提出药用植物毛状根大规模培养的生物反应器在今后的发展方向。

食药用真菌多糖构效关系研究进展

胡顺珍;贾乐;

2007, 0(04): 42-44.

摘要 ( 125 )

相关文章 | 计量指标

真菌多糖具有抗病毒、抗凝血、抗肿瘤、免疫调节、降血脂、延缓衰老等多种生物活性,而多糖的功能与结构密切相关。多糖结构与功能关系的研究已经成为人们关注的一个热点。综述了食药用真菌多糖一级结构、高级结构及多糖的理化性质与其生物学活性之间的关系。

海葵神经毒素研究进展

朱晓鹏;长孙东亭;罗素兰;

2007, 0(04): 45-50.

摘要 ( 159 )

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过去30多年的研究表明,海葵毒液中富含多肽或蛋白类生物毒素活性物质,分子量从3000到80000Da不等。这些毒素可以特异地与某些离子通道或细胞膜受体相结合,从而影响生物的某些生理功能。按照它们功能的不同,可以将海葵毒素大致分为两大类:神经毒素和溶细胞素。由于海葵神经毒素对它们的作用位点具有高度的特异性和亲和性,使得它们成为神经生理学和药理学研究的一种重要工具。就海葵毒素的类型、结构特征、生物活性、应用状况及开发前景的新进展进行综述,以期对同类研究些微启迪。

邻苯二酚2,3-双加氧酶的结构和功能研究进展

周鑫淼;陈洁君;耿立召;李丹花;陈明;林敏;

2007, 0(04): 51-54.

摘要 ( 180 )

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邻苯二酚是所有芳香族化合物降解过程中的重要的中间产物,其降解有邻位和间位裂解两条裂解途径,分别由邻苯二酚1,2-双加氧酶(C12O)和邻苯二酚2,3-双加氧酶(C23O)催化裂解。本综述简要介绍了邻苯二酚2,3-双加氧酶的结构和功能的研究进展。

黑色素及其相关基因的研究进展

刘甲斐;仇雪梅;

2007, 0(04): 55-58.

摘要 ( 104 )

相关文章 | 计量指标

黑色素对动物体色的形成起重要的作用。对黑色素的本质、功能以及生成机理做了全面的总结,并归纳了一些影响动物皮肤颜色和毛色的主要基因及其研究现状。

siRNA脱靶效应研究进展

邹凌云;王正志;

2007, 0(04): 59-63.

摘要 ( 394 )

相关文章 | 计量指标

RNA干扰过程中,siRNA和mRNA特异结合能够使得靶基因沉默。但研究证实,siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,这种现象称为siRNA脱靶效应。多种真核生物中的RNA干扰实验证实了脱靶效应的存在。对脱靶机制的研究发现脱靶可能与模体匹配、结构和长dsRNA等有关,很多新方法被提出来预测脱靶概率和检测脱靶基因。通过利用siRNApool、化学修饰和生物信息学方法能够尽可能地降低脱靶效应,提高RNAi实验的质量。对脱靶效应方面的研究进行了总结论述。

中国转基因作物风险评估技术研究进展

张志罡;付秀芹;孙继英;胡波;颜亨梅;

2007, 0(04): 64-66.

摘要 ( 155 )

相关文章 | 计量指标

现代生物技术的发展为利用外源基因培育优良作物品种提供了新的途径,目前国内外已培育出多个高抗害虫的转基因作物。但是,人们对转基因作物潜在的风险尚存在疑问,这是目前转基因作物是否能进一步获准商品化生产的一个重要原因。综述了中国转基因作物研究和转基因产品安全性检测技术取得的主要进展,对我国转基因作物的研究前景进行了展望,并对将来的工作提出了几点建议。

基因工程在农作物育种上研发应用新进展

李万云;李培夫;

2007, 0(04): 67-71.

摘要 ( 106 )

相关文章 | 计量指标

以文献调研结果为依据,概述了基因工程的基本概念与基本模式,外源DNA导入的方式与表达的条件;应用基因工程培育优质、高产、抗病、抗虫、抗除草剂与抗逆性强农作物品种的进展;预测并展望了基因工程在实现农业现代化目标中的作用、开发应用重点与前景。

葫芦科瓜类作物分子标记辅助育种研究进展

邹明学;许勇;张海英;郭绍贵;宫国义;

2007, 0(04): 72-78.

摘要 ( 122 )

相关文章 | 计量指标

综述了几种常用分子标记在葫芦科瓜类作物遗传图谱构建、重要性状基因定位、遗传多样性及亲缘关系分析、分子标记辅助选择及在葫芦科遗传育种中的应用,对目前葫芦科遗传育种中应用分子标记技术存在的问题和解决方案进行了探讨,并对葫芦科分子标记辅助育种的前景做了展望。

RNAi及其在家禽病毒病治疗上的应用

赵朴;郑玉姝;刘兴友;

2007, 0(04): 79-81.

摘要 ( 90 )

相关文章 | 计量指标

双链小RNA介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年发现的一项以序列特异方式诱导同源mRNA降解的新技术。由于RNAi精巧的特异性和有效性,已被认为是特异性基因治疗的重要工具。其中作为抑制病毒复制的潜在工具更为引人注目。因此,将RNAi的作用机制和其在家禽病毒病治疗上的应用做以综述。

RNAi技术及其应用

伍林涛;阮颖;彭琦;张源;刘春林;

2007, 0(04): 82-84.

摘要 ( 106 )

相关文章 | 计量指标

RNA干扰是指外源双链RNA进入细胞以后引起的与其同源mRNA特异性降解的现象,它参与真核生物抵抗病毒侵染,阻断转座子的异常活动,调控基因表达。RNAi已成为一种进行基因功能分析的强有力的工具,并有望成为最有潜力的基因干预治疗方法。

植物组织培养新技术:光自养微繁

占爱瑶;詹亚光;

2007, 0(04): 85-89.

摘要 ( 108 )

相关文章 | 计量指标

系统地综述了常规植物组织培养存在的不足,如易染菌、生长周期长、生产成本高等,从而引出了光自养微繁的概念、研究现状、控制方向以及它的优势。如植株长势较好、生长周期短、生产成本低等,并对该技术做了展望。光自养微繁技术作为一种新型的组织培养方法,克服了传统组培无法克服的缺陷,必将成为今后组培生产的一种重要手段。

胚胎干细胞技术的研究进展

胡彦营;王传美;

2007, 0(04): 90-92.

摘要 ( 90 )

相关文章 | 计量指标

干细胞可以分为成体干细胞和胚胎干细胞两类,是当前生物医学领域的一个热点。由于干细胞在医学领域有巨大应用前景,世界各国都对此给予了相当的重视;投入大量资金支持本国的科学家从事干细胞的科学研究。目前,干细胞的研究还处于试验室阶段,很多技术难题还没有解决,尤其是胚胎干细胞的不定向分化问题,以及一些伦理方面的争议。宗教界人士和社会论理学方面的人士对于干细胞的研究还有异议。集中论述了胚胎干细胞的研究进展和医学功用。

生物信息学在新基因全长cDNA电子克隆中的应用

胡皝;萧浪涛;

2007, 0(04): 93-96.

摘要 ( 102 )

相关文章 | 计量指标

新基因全长cDNA序列的获得常常是生物学工作者面临的难题,电子克隆是利用生物信息学手段得到新基因全长cDNA序列的新方法。介绍了电子克隆的方法及其生物信息学在其间的具体应用,并概述了一些生物信息学在序列分析中的应用。

普通小麦编码LMW-1、LMW-2基因的克隆及其与品质关系的研究

逄孝云;许瑞瑞;王宪泽;

2007, 0(04): 97-101.

摘要 ( 69 )

相关文章 | 计量指标

对12个普通小麦品种的LMW-GS进行SDS-PAGE分析表明,含有LMW-2亚基的品种的加工品质性状明显优于含有LMW-1亚基的品种。利用硬粒小麦中克隆LMW-1和LMW-2的特异引物,在"泰山201"和"PH82-2-2"两个普通小麦品种中分别克隆了一个编码LMW-1和LMW-2的基因,分别命名为PL1和PL2。通过其编码氨基酸序列分析表明,PL1属于LMW-m型,PL2属于LMW-s型。这两个基因编码的氨基酸序列的主要区别,一是PL1的氨基酸开始序列为METRCIPGL,PL2则直接以SHIPGL开始。二是PL1的氨基酸序列比PL2的有一段16个氨基酸的缺失。对PL1和PL2编码的氨基酸序列与硬粒小麦中已知的LMW-1和LMW-2序列进行了比较,PL1和PL2在与品质相关的重复区分别有三段和两段缺失。这些差异可能是影响其加工品质的重要因素。

两种茶树β-葡萄糖苷酶基因cDNA在原核中表达的研究

王让剑;江昌俊;张正竹;李叶云;邓威威;

2007, 0(04): 102-105.

摘要 ( 68 )

相关文章 | 计量指标

采用原核表达系统pET-32a(+)载体和BL21trxB(DE3)菌株对两条茶树β-葡萄糖苷酶基因cDNA(GluⅠ和GluⅡ)进行了表达,研究了不同诱导时间、不同诱导温度对两个茶树β-葡萄糖苷酶表达量的影响并测定了两者的活性。表达分析结果表明,诱导6h、25℃时,GluⅠ在总蛋白中所占比例最高;诱导6h、37℃时,GluⅡ在总蛋白中所占比例最高,活性测定结果表明,两种表达蛋白均具有正常的β-葡萄糖苷酶活性,在相同的测定条件下,GluⅡ活性(0.310±0.03U·ml-1)比GluⅠ(0.234±0.03U·ml-1)活性更高。

拟南芥JR1基因片段的克隆及分析

于涌鲲;万善霞;赵福宽;孙清鹏;

2007, 0(04): 106-109.

摘要 ( 78 )

相关文章 | 计量指标

根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计合成一对特异引物,以菠菜基因组DNA为模板,采用PCR扩增的方法扩出一条DNA特异片段并克隆到pUC18载体中。用酶切和测序分析法对克隆片段进行鉴定并进一步进行核苷酸序列分析。序列测定该片段长为430bp。OMIGA2.0软件分析结果表明,该片段与已报道的拟南芥JR1序列的一致性为99.1%。

四季桔试管苗基因组DNA微量提取方法

韩牙琴;林琳;赖钟雄;

2007, 0(04): 110-112.

摘要 ( 85 )

相关文章 | 计量指标

本试验以四季桔试管苗为试材,进行基因组DNA微量、快速提取方法的研究。结果表明:采用改良CTAB法,仅需20mg样品、2.5h就能获得高纯度、高质量的DNA,这是目前木本植物样品量最小的DNA提取方法;提取的DNA能直接被限制性内切酶BamHⅠ酶切,也能进行PCR扩增,可用于进一步的分子生物学研究。

野生垂穗鹅观草醇溶蛋白遗传多样性研究

肖海峻;徐柱;李临航;马玉宝;

2007, 0(04): 113-116.

摘要 ( 79 )

相关文章 | 计量指标

利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Acid-polyacrylamidegel electrophoresis)法对来源于内蒙古、山西、甘肃、新疆、云南、四川和西藏的25份垂穗鹅观草材料进行醇溶蛋白检测。研究结果表明,供试材料可分离出30条相对迁移率不同的谱带,每份材料可电泳出11～22条谱带,其中只有1条(3.45%)带纹是25份材料共有的,其余29条谱带均具有不同程度的多态性,多态性谱带数目占分离出总条带的96.67%,说明野生垂穗鹅观草具有较丰富的遗传多样性。聚类分析发现,材料的遗传相似系数(GS)变异范围为0.111～0.9286,平均值为0.4821。在GS值为0.4821的水平上供试材料可聚为6个类群,某些具有相同地理来源的材料聚成一类或亚类,即醇溶蛋白图谱类型与材料的生态地理环境具有相关性。

利用微卫星技术分析不同类群鸡的遗传多样性

孙凤霞;李大全;廖和荣;彭夏雨;李伟;李应生;

2007, 0(04): 117-119.

摘要 ( 100 )

相关文章 | 计量指标

利用8个微卫星标记分析了6个生产类群鸡的遗传多样性。计算了各群体在各位点上的等位基因频率,并据此计算出各群体的平均遗传杂合度(h)、多态信息含量(PIC)和有效等位基因数(Ne)。结果表明:6个鸡群在8个微卫星座位上的基因频率存在明显的差异,其平均基因杂合度为0.7317,平均多态信息含量为0.6815。其中,群体平均杂合度最高的是安卡红鸡,为0.7716;平均杂合度最低的是新罗曼鸡,为0.7073。所选的8个微卫星座位均为高度多态,可作为有效的遗传标记用于鸡群体遗传多样性的分析。

条斑紫菜多糖抗疲劳生物活性研究

顾佳雯;张陆曦;郭婷婷;何培民;

2007, 0(04): 120-124.

摘要 ( 86 )

相关文章 | 计量指标

主要应用活体动物实验技术,研究了纯化产物紫菜多糖的抗疲劳作用及量效关系。通过紫菜多糖PY-G1不同剂量对小鼠游泳时间、乳酸脱氢酶活性、肌糖原和肝糖原含量等指标的检测,分析了紫菜多糖提高小鼠抗疲劳生物活性功能及其量效关系。实验结果表明,紫菜多糖可显着延长小鼠游泳时间,最高可以提高37%;并且可以使小鼠在游泳前后乳酸脱氢酶含量分别增加35%和37.5%(P<0.05);增加小鼠肌糖原储备量和肝糖原储备量,其肌糖原储备量和肝糖原储备量最高可以分别增加85.6%和86%。实验结果表明,条斑紫菜多糖具有明显提高小鼠抗疲劳生物学活性。

海胆Runx基因保守序列的克隆与初步分析

葛辉;王秀利;仇雪梅;田春雨;刚锰;

2007, 0(04): 125-127.

摘要 ( 102 )

相关文章 | 计量指标

Runx(Runt box)是Runt结构域转录因子家族的成员之一。马粪海胆Runx基因第663位和728位碱基发生突变,分别为A→T和C→T。第一个突变为错义突变,使密码子编码的氨基酸由天冬氨酸变为酪氨酸,而第二个突变为同义突变,密码子编码的氨基酸未发生变化。海胆Runx基因保守序列的突变可能会导致其表达产物的变化,进而会影响海胆的生理机能。

槲皮素下调hTERT表达对肝癌HepG2细胞生长影响研究

宋建宁;汤利华;康楷;胡赞斓;Tong-Chuan He;李铁军;

2007, 0(04): 128-131.

摘要 ( 114 )

相关文章 | 计量指标

目的观察槲皮素对肝癌HepG2细胞生长及对hTERT基因表达的影响。方法以台盼蓝拒染法计数肝癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,western-blot、RT-PCR检测hTERT基因表达改变,PCR-TRAP法检测端粒酶活性。结果台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48h后的Ic50为25.5μm。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10～20μm/L的槲皮素处理,肝癌HepG2细胞周期阻滞于G0/G1期,且HepG2细胞hTERT蛋白和mRNA表达降低,端粒酶活性受抑制。结论槲皮素能抑制肝癌细胞的生长,呈时间、剂量依赖性,能诱导HepG2细胞发生凋亡,其抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。

人凝血因子ⅦcDNA基因的克隆与鉴定

吕茂民;周华蕾;姚站馨;章金刚;

2007, 0(04): 132-134.

摘要 ( 86 )

相关文章 | 计量指标

目的:克隆并鉴定人凝血因子ⅦcDNA基因。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,从人胎肝总RNA中扩增人凝血因子ⅦcDNA基因,将其克隆入pGEM-T载体,对阳性克隆进行序列测定和分析。结果:经RT-PCR扩增和克隆,获得了人凝血因子ⅦcDNA基因,经序列分析表明,所克隆的基因序列正确。结论:本试验成功克隆了人凝血因子ⅦcDNA基因,为重组人凝血因子Ⅶ的研究奠定了基础。

丙型肝炎病毒NS3基因对人肝细胞生物学特性的影响

何琼琼;肖旭贤;冯德云;李波;郑晖;程瑞雪;

2007, 0(04): 135-140.

摘要 ( 88 )

相关文章 | 计量指标

目的:建立稳定转染HCVNS3的人源肝细胞系,探讨HCVNS3对肝细胞生物学特性的影响。方法:通过脂质体将HCVNS3的真核表达质粒稳定转染至QSG7701细胞(pRcHCNS3/QSG细胞),PCR,WesternBlot,免疫组化检测基因的整合和表达;光学显微镜和电子显微镜观察转染前后细胞超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化;生长曲线,软琼脂集落实验,成瘤性实验探讨HCVNS3对肝细胞增殖的影响。结果:HCVNS3基因在pRcHCNS3/QSG细胞中得到整合和表达,定位于细胞浆。形态学显示出增殖旺盛的的特点,流式细胞仪检测pRcHCNS3/QSG细胞G0/G1期细胞数目减少而S期细胞数目增加,生长曲线和软琼脂集落实验表明pRcHCNS3/QSG细胞倍增时间明显缩短,停泊非依赖性生长能力明显增强,并能接种裸鼠成瘤,免疫组化证实肿瘤组织有HCVNS3蛋白表达。电镜和流式细胞仪检测显示HCVNS3能促进pRcHCNS3/QSG细胞凋亡。但其促增殖速度远大于凋亡率,表现为pRcHCNS3/QSG细胞获得恶性表型和致瘤性。结论:HCVNS3能明显促进人肝细胞QSG7701恶性转化,pRcHCNS3/QSG细胞可作为研究HCVNS3致癌机理的细胞模型。

丙烯酰胺对雄性小鼠生殖细胞遗传损伤的研究

杨建一;郭红刚;高宝珍;李莉;王文娟;杜圣家;

2007, 0(04): 141-145.

摘要 ( 98 )

相关文章 | 计量指标

以雄性小鼠的生殖细胞为研究对象,经腹腔注射丙烯酰胺建立动物模型,采用生殖细胞早期精细胞微核和初级精母细胞染色体制作技术联合评价丙烯酰胺对雄性小鼠的生殖毒性及遗传毒性,观察染毒后精子发育的不同阶段对丙烯酰胺的损伤反应,为丙烯酰胺的生殖损伤提供一定依据。

血液基因组DNA的快速提取方法

申社林;李兵;

2007, 0(04): 146-147.

摘要 ( 94 )

相关文章 | 计量指标

目的:研究血液中基因组DNA的简便快速提取方法。方法:取新鲜抗凝血,以红细胞裂解液除去红细胞,再破碎白细胞,除去杂蛋白,获得基因组DNA。结果:所得基因组DNA完整、无断裂,含量和纯度均较高。以所提基因组DNA作为模板能很好的扩增出p21因子启动子序列,因此该法所提取的DNA是完整可靠的。结论:该法能简便、快速、安全、廉价的提取血液中的基因组DNA,并适用于临床检测和分子生物学研究。

同源重组法构建枯草芽孢杆菌224 yugS基因缺失突变株

刘杰;房春红;李琬;矫洪涛;喻江;李景鹏;

2007, 0(04): 148-151.

摘要 ( 100 )

相关文章 | 计量指标

从枯草芽孢杆菌224的基因组DNA中分别扩增出溶血样基因yugS的上、下游片段,并利用携带新霉素抗性基因(neor)的重组质粒pMD18-T-neo作为骨架,构建了基于yugS基因位点的基因阻断质粒pMD18-T-neo-yugS,线性化后电转化入枯草杆菌224,从新霉素抗性平板上挑取转化子,通过对基因组的PCR鉴定和核苷酸测序证明,确定转化子yugS156为yugS基因缺失突变株。

航天对MT工程菌株的影响研究

郑重谊;谭周进;孙麟;黄桂明;严斌;蔡锐;

2007, 0(04): 152-154.

摘要 ( 98 )

相关文章 | 计量指标

为了探讨航天与常规诱变技术对MT工程菌株的影响,进行了HNO2.UV、γ-射线、LiCl及γ-射线+LiCl分别与航天共诱变对MT工程菌株活性的影响试验,并且就航天对MT工程菌株的致死作用及质粒的稳定性进行了研究。结果表明:MT工程菌株经航天处理后,活菌数降低,死亡率为34.59%,航天对MT工程菌株具有一定的致死作用;MT工程菌株经UV、γ-射线、LiCl及γ-射线+LiCl分别与航天共诱变处理后的生长活性没有改变,MT工程菌株经HNO2与航天共诱变处理后的生长速率减慢;在航天处理的作用下,MT工程菌株的质粒不易丢失,能够维持很好的稳定性,丢失率仅为8.26%,而置于地面的MT工程菌株的质粒易丢失,丢失率为83.51%。

超声波对猪胰脂肪酶催化活性影响的机理研究

郭诗静;黄卓烈;初志战;黎春怡;巫光宏;詹福建;

2007, 0(04): 155-159.

摘要 ( 93 )

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猪胰脂肪酶(porcine pancreas Lipase,PPL)反应系统经适宜参数的超声波处理,催化活性提高了11.22%～24.42%。PPL经超声波处理后,其动力学参数Km和Vmax都变小,酶分子的紫外吸收光谱不变,荧光发射光谱不变。而酶分子经超声波处理后,其紫外差示光谱出现了明显的正峰或负峰。探讨了超声波影响PPL活性的作用机理。

磷脂酰丝氨酸合成酶基因pss的克隆与表达

李斌;路福平;刘逸寒;钱磊;戴永鑫;

2007, 0(04): 160-164.

摘要 ( 105 )

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磷脂酰丝氨酸合成酶能催化转酯反应,是定向合成特定磷脂类物质特别是磷脂酰丝氨酸的工具酶,但出发菌株产量低,很大程度上限制了酶法合成磷脂酰丝氨酸的工业化应用。利用表达载体pET-22b,实现了大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成酶基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的同源高效表达。利用镍亲和柱对表达产物进行纯化,并用HPLC法对纯化后的重组酶的活力进行检测。结果表明,目的蛋白可在短时间内进行大量表达,蛋白含量是出发菌株的100倍,同时经6h的转酯反应转化率达到33%,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力达到69U/mg蛋白。

扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建

王彩梅;蔡少丽;吴义真;林琳;

2007, 0(04): 165-168.

摘要 ( 92 )

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利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并将含突变基因的重组质粒pAO815-ep8-R182K在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-R182K表达产物与野生型PEL、PEL-ep8比较实验表明:叠加突变体表达蛋白PEL-ep8-R182K最适反应温度与野生型PEL、PEL-ep8一致,均为40℃;热稳定性与野生型相似,比PEL-ep8降低2.25℃。但是,在比活上,PEL-ep8-R182K与PEL-ep8、野生型PEL相比,其比酶活分别提高了14.03%和3.86%。

南美白对虾体壁几丁质酶的理化特性研究

林建城;林俊兵;陈郁花;林秀春;

2007, 0(04): 169-172.

摘要 ( 93 )

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报道南美白对虾体壁几丁质酶(EC3.2.1.14)的理化性质。结果表明,酶的最适pH值为5.6,最适温度为55℃。该酶在pH5.0～6.2区域较稳定,而在pH>7和pH<4.6下失活加快;在50℃以下处理1h,酶活力保持稳定,高于55℃,酶稳定性较差,很快失活。研究金属离子对酶活力影响,结果表明:Li+、Na+、K+、Mg2+和Fe2+等对该酶活力没有任何效应;Ca2+、Ba2+对酶有激活作用,Cu2+、Co2+对酶的效应先表现为激活后转为抑制作用;Ni2+、Zn2+、Mn2+、Al3+、Fe3+、Hg2+、Pb2+和Cd2+对该酶活力均具有不同程度的抑制作用,以Hg2+的抑制作用最显着,10mmol/L的Hg2+可抑制酶活力95.6%。

γ-聚谷氨酸发酵培养基的Plackett-Burman法优化

疏秀林;施庆珊;冯静;欧阳友生;陈仪本;

2007, 0(04): 173-177.

摘要 ( 90 )

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以一株γ-聚谷氨酸高产菌——地衣芽孢杆菌GIM-P10为试验菌株,采用逐因子实验法确定γ-聚谷氨酸合成考察因素的参考范围,再采用Plackett-Burman设计法进行培养基的优化,10个实验因子中筛选到四个显着影响因子:柠檬酸、谷氨酸、K2HPO4和MgSO4·7H2O。另外,综合评价实验结果,表明γ-聚谷氨酸的产量与多糖含量呈负向关系,与细胞干重呈正向关系。利用Plackett-Burman设计法发酵产γ-聚谷氨酸可高达21.27g/L,为基础培养基的2倍以上。

JEV-DNA实时荧光定量标准品的构建

周净;王云龙;李智涛;李玲玲;

2007, 0(04): 178-180.

摘要 ( 108 )

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利用TaqMan荧光定量PCR技术,建立JEV-DNA定量标准品的制备方法。通过处理JEV减毒活疫苗提取病毒RNA,进行RT-PCR扩增目的片段,与T载体连接,转化感受态细胞,T-A克隆,测序鉴定后定量。获得预期的重组质粒,建立的标准曲线有较大的线性范围。此法制备的重组质粒标准品可用于对病毒载量进行测定。

限制性酶介导整合技术在盘基网柄菌的应用

黄亚丽;霍炜洁;

2007, 0(04): 181-185.

摘要 ( 91 )

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<正>1前言突变分析技术在许多功能基因的分离和表达中起着关键的作用,前人已经利用电离辐射、紫外诱变、PCR和转座子等技术对许多模式生物进行了随机突变研究。分离具有特殊细胞分化功能的基因需要建立大群体的随机突变体库,但是用传统方法产生的随机突变体的鉴定与突变表型相关基因的

中国农业科学院五十周年院庆公告

2007, 0(04): 187-187.

摘要 ( 94 )

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<正>五十年风雨兼程,五十载春华秋实。2007年金秋十月,将迎来中国农业科学院建院五十周年华诞。在此,我们谨向所有关心、支持中国农业科学院建设和发展的各级领导、各界人士和海内外朋友致以诚挚的感谢!

中国农业科学院农业信息研究所五十周年所庆公告

2007, 0(04): 188-188.

摘要 ( 77 )

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五十年风雨路,艰苦创业、锐意进取,立改革潮头,科研服务比翼齐飞;半世纪辉煌史,人才辈出、成果丰盈,揽信息精锐,创新发展一路凯歌。

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