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基于序列分析的天蚕素A串连融合表达载体的构建

杨细媚;文阳安;万祥辉;涂植光;   

  1. 重庆医科大学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室;
  • 出版日期:2009-01-26 发布日期:2009-01-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(30600790)

  • Published:2009-01-26 Online:2009-01-26

摘要: 天蚕素A(Cecropin A,CA)是来源于惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的含有37个氨基酸的抗菌肽,在非极性环境中形成α螺旋型结构,具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点。为降低天蚕素A对宿主的毒性及提高其表达丰度和稳定性,在序列分析的基础上设计了3条天蚕素A氨基酸序列,分别为CA19、CA36和CA210。根据大肠杆菌密码子的偏爱性分别合成相应的3对寡核苷酸链,并通过重叠PCR方法合成成熟肽CA。将含有CA19、CA36、CA210和CA1~5个拷贝基因的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和BLR(DE3)PlysS,成功构建了串连融合表达载体,为下一步的抗菌活性及免疫表位的分析打下基础。

关键词: 抗菌肽, CA, 重叠PCR, 串连表达, 序列分析