]*>","")" /> 家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

• 论文 • 上一篇    下一篇

家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

金小宝;王婷婷;朱家勇;李小波;马艳;褚夫江;卢雪梅;   

  1. 广东药学院基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室;
  • 出版日期:2010-09-26 发布日期:2010-09-26
  • 基金资助:
    2007年度广东省科技计划项目(2007B020708015)

  • Published:2010-09-26 Online:2010-09-26

摘要: 拟通过酵母系统表达家蝇抗菌肽Defensin基因,并初步鉴定其抗菌活性。采用限制性内切酶SacⅠ将分泌型重组表达质粒pPIC9K/Defensin线性化后,运用氯化锂转化法将其转入巴斯德毕赤酵母GS115中,行G418加压筛选和PCR鉴定;所得阳性转化子转至摇瓶,28℃条件下0.5%甲醇诱导表达,连续诱导培养4 d后,上清液进行Tricine-SDS-PAGE检测表达效果,并采用琼脂糖孔穴扩散法检测表达产物对大肠杆菌E.coliK12D31的抑制作用。结果显示,家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中得到了成功表达,表达产物对大肠杆菌E.coliK12D31的生长有抑制作用。说明酵母系统适合抗菌肽的表达。

关键词: 家蝇, 抗菌肽, Defensin, 毕赤酵母, 表达