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小鼠TOll样受体3基因的克隆及真核表达

彭丽娜;李力;邱亚峰;缪剑华;王晓杜;徐永莉;史子学;邵东华;魏建超;马志永;   

  1. 中国农业科学院上海兽医研究所;广西壮族自治区药用植物园;
  • 出版日期:2011-06-26 发布日期:2011-06-26
  • 基金资助:
    广西自然科学基金重点项目(桂科自08320152)

  • Published:2011-06-26 Online:2011-06-26

摘要: 采用RT-PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toll样受体3(TLR3)基因,基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA,构建了真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-TLR3。重组质粒转染293T细胞,Western blotting检测蛋白表达,表达蛋白质的相对分子量与预计相符。采用TLR3的阳性刺激物poly(I:C)刺激重组质粒转染的293T细胞,双荧光素酶报告基因系统检测发现能激活下游转录因子NF-κB的转录活性,并能诱导TLR3下游细胞因子IL-6和TNF-α的表达。小鼠TLR3基因的克隆和表达,为研究TLR3介导的信号通路及其在抗病毒免疫中的作用打下基础。

关键词: TLR3, NF-κB, 基因表达, 信号转导