生物技术通报

LEA蛋白研究进展

白永琴;杨青川;

2009, 0(09): 1-7.

摘要 ( 315 )

PDF (313KB) ( 884 )

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LEA蛋白(late embriogenesis abundant prote in,LEA)是生物体中广泛存在的一类与渗透调节有关的家族蛋白,该蛋白的编码基因在植物种子胚胎发育晚期表达量丰富,而且在环境胁迫如干旱、低温、盐胁迫、ABA、紫外辐射和NaHCO3等条件下LEA基因的mRNA也会大量累积。LEA蛋白显着的理化特性是具有很高的亲水性和热稳定性,即使在煮沸条件下也能保持水溶状态。LEA蛋白在细胞中可以稳定细胞膜结构,作为分子伴侣,具有结合离子和防止氧化等作用,被认为是在胁迫过程中对植物起保护作用的物质之一。针对这些重要特性,分别综述了LEA蛋白的分类、结构、编码基因和表达调节方式及其在植物生长过程中的作用。

科学出版社新书

2009, 0(09): 7-22.

摘要 ( 114 )

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诱导多能干细胞的研究进展

张鹏;

2009, 0(09): 8-12.

摘要 ( 169 )

PDF (239KB) ( 321 )

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体细胞诱导成为多能性干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS cell)的研究成果被国际生命科学界誉为具有里程碑意义的创新之举。在短短3年多的时间里,这项研究已经在细胞重编程的机理研究、探索疾病的发生发展机制以及临床医学的应用等领域引发了很多突破性的进展,而且,这一非克隆干细胞技术的诞生,成功地避开了长期以来争论不休的伦理问题,极大地推动该领域和相关科学领域的发展。从iPS细胞的研究历程、iPS细胞的构建机理、iPS细胞研究的最新应用成果以及iPS细胞的发展前景和研究方向等方面进行了评。

新生儿Fc受体研究进展

张春林;王加启;卜登攀;魏宏阳;杨永新;董晓丽;刘光磊;周凌云;赵国琦;

2009, 0(09): 13-17.

摘要 ( 121 )

PDF (238KB) ( 1635 )

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新生儿Fc受体(FcRn)是由α链和β链两个亚基以非共价键的形式组成的异源二聚体,在免疫球蛋白IgG转运和代谢中发挥着重要作用。对FcRn的分子结构、转运机制及其功能进行了综述。

动物胃肠道微生物元基因组学研究进展

赵圣国;王加启;刘开朗;李旦;于萍;

2009, 0(09): 18-22.

摘要 ( 156 )

PDF (182KB) ( 779 )

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动物胃肠道中寄居着庞大复杂的微生物,它们对宿主营养、健康和生产有着重要的作用。随着分子生物学的发展,未培养微生物的研究越来越被重视,宏基因组学方法研究胃肠道微生物不仅能了解未培养微生物多样性,还能获得微生物的遗传、代谢和生理等方面的信息。探讨了元基因组文库的构建和分析方法,并重点介绍了元基因组学在动物胃肠道尤其是反刍动物瘤胃微生物研究中的应用。

拟南芥核苷糖转换相关基因研究进展

庞朝友;喻树迅;

2009, 0(09): 23-27.

摘要 ( 104 )

PDF (272KB) ( 719 )

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核苷糖是植物细胞壁多聚糖合成时的活化底物。综述了近年来拟南芥核苷糖转换相关基因的克隆及功能分析等方面的研究进展。使人们能够深入认识核苷糖转换酶在植物生长发育中的重要作用,并且为人工改造植物细胞壁提供了理论依据。然而,对核苷糖转换酶的转录调控和代谢调节等方面研究还有待加强。

衣藻叶绿体表达系统的研究

刘国宪;沈桂芳;胡英考;

2009, 0(09): 28-33.

摘要 ( 288 )

PDF (238KB) ( 841 )

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真核藻类作为一种新型的蛋白表达系统,因其培养方法简单,成本低廉并且能大规模繁殖,最近几年成为人们关注的焦点。作为一种模式生物,单细胞的真核生物莱茵衣藻已经成为人们研究的重点。外源蛋白不仅能在衣藻核中进行表达而且也能在叶绿体中表达,但衣藻叶绿体的表达系统较之核表达有巨大的优越性。在到目前为止,已经有许多的药用蛋白在莱茵衣藻的叶绿体中成功表达的报道,证明了莱茵衣藻叶绿体作为生物反应器的能力。将对衣藻叶绿体的表达做详细的描述。

青霉素酰化酶表达调控的研究进展

蒋咏梅;章文贤;魏东芝;

2009, 0(09): 34-37.

摘要 ( 206 )

PDF (294KB) ( 453 )

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青霉素酰化酶(penicillin acylase,PAC)是抗生素工业的重要酶。它在大肠杆菌中需经过复杂的转录、翻译和后翻译才能成熟,且后翻译过程对活性酶的最终形成影响很大。在阐述PAC的苯乙酸诱导机制的基础上,详细论述了PAC的后翻译过程,并对几种主要的影响因素进行了分析。

蛋白质功能研究方法及技术

蒋英芝;贺连华;刘建军;

2009, 0(09): 38-43.

摘要 ( 478 )

PDF (315KB) ( 2035 )

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随着后基因时代的到来,蛋白质功能研究已经成为蛋白质组学研究的核心内容,是生物科学极具挑战的领域之一。近年来虽已有大量文章涉及某些蛋白质功能方面的研究,但对蛋白质功能研究方法方面进行系统综述的文章非常少,因此,从差异蛋白的筛选鉴定、蛋白质相互作用、蛋白质亚细胞定位、蛋白质表达改变的分子遗传学手段(如RNAi)、生物信息学等方面对目前蛋白质功能研究方法和技术及其最新研究进展进行综述,研究者可根据不同的蛋白和实验需要选择适宜的方法。

哺乳动物精原干细胞的增殖分化及其移植技术的应用

孙可;郭彤;常灏;彦萌;朱宝长;

2009, 0(09): 44-49.

摘要 ( 264 )

PDF (155KB) ( 616 )

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精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是指位于睾丸生精小管基膜上既能自我更新以维持自身群体数量恒定,又能定向分化形成精母细胞,最终形成精子的一类成体干细胞。鉴于其独具的生物学特性,SSCs的研究在干细胞生物学、医学、畜牧业等领域均具有重要意义。通过其建立转基因动物模型,对研究精子的发生机制、重建不育个体的生精功能等都有着重要意义。综述了哺乳动物SSCs的形态特性,增殖分化特性及其调控因素,简述了SSCs移植技术的应用。

环介导等温扩增技术原理及其在检测诊断病原微生物中的应用

焦文强;殷相平;柳纪省;

2009, 0(09): 50-53.

摘要 ( 175 )

PDF (271KB) ( 967 )

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环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是近年来发展出来的一种核酸扩增技术。通过设计识别目的片段6个序列的4个特异引物,整个反应可以在恒温(60~65℃)条件下1 h内完成,由于采用4个引物,与传统的核酸扩增技术相比,它具有敏感、特异的特点;且产物中有大量的副产物——白色焦磷酸镁沉淀,扩增产物可通过肉眼观察或浊度计即可判定结果;反应不需要精密控温设备和高级复杂的分析仪器,对操作人员的熟练度和专业水平要求不高,因此该方法特别适合基层或者实验条件较差的试验室进行病原微生物的快速检测。就其原理及其在病原微生物的检测中的应用做一综述。

简单重复序列间扩增分子标记技术及其应用

张玉星;马艳芝;赵国芳;

2009, 0(09): 54-56.

摘要 ( 133 )

PDF (168KB) ( 915 )

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简单重复序列间扩增(ISSR)技术是在PCR基础上发展起来的一种新型的分子标记技术,因其标记通常为显性标记,呈孟德尔遗传,且在进行PCR反应时,稳定性和多态性均很好,而成为是非常理想的分子标记技术。将从ISSR分子标记技术的原理及其在绘制DNA指纹图谱、遗传多样性分析、种质鉴定等领域的应用进行综述。

离子环境对Acinetobacter sp. ADP1的salR基因活性的影响

李超;周琳;张永军;宋福平;张杰;

2009, 0(09): 57-63.

摘要 ( 121 )

PDF (523KB) ( 409 )

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革兰氏阴性菌Acinetobacter sp. ADP1可以利用水杨酸作为惟一的碳源和能源生长,与这一代谢过程相关的基因为sal基因。利用sal基因启动子与细菌荧光素酶基因(lux)编码区融合而构建的工程菌Acinetobacter ADPWH_lux,通过定量测定活细胞发光度可以检测出salR基因在不同离子环境中的活性。本试验测定了不同浓度梯度的10种金属离子对处于指数期和稳定期的细菌的salR基因活性的影响。发光度检测表明重金属离子均会抑制指数期和稳定期的细菌的发光能力。RT-PCR试验也证明,凡能够抑制细菌发光能力的离子,均会抑制细菌的salA基因的转录。

LeERF2基因对旱稻耐盐性的影响

常英芬;丁在松;高聚林;

2009, 0(09): 64-68.

摘要 ( 109 )

PDF (363KB) ( 277 )

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采用T2代转LeERF2基因旱稻(旱297)为材料,研究分蘖期盐胁迫下植株光合性能和生理反应。结果表明,50mM NaCl胁迫条件下,转基因植株(T)和野生型对照(WT)的各项光合参数差异不明显,但在100 mM NaCl胁迫条件下,转基因植株仍能维持较高的光合速率和气孔导度。随着NaCl胁迫浓度增加,野生型旱稻和转基因旱稻植株叶片SOD活性增加幅度加大,但都表现为转基因植株增幅更明显,而MDA含量则表现为野生型植株增幅更明显,表明LeERF2基因增强了旱稻盐胁迫下抗氧化能力,提高了耐盐性,能维持较高光合速率。

利用重叠PCR技术对OsAMT1.2进行定点突变

李宝珍;李素梅;施卫明;苏彦华;

2009, 0(09): 69-72.

摘要 ( 124 )

PDF (296KB) ( 577 )

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铵是植物吸收利用的主要氮源之一,而铵转运蛋白对铵的吸收、转运和代谢方面有重要的作用。为了深入研究水稻铵转运蛋白的结构功能特性,利用重叠PCR技术对OsAMT1.2蛋白质序列中保守的253 aa和257 aa的苯丙氨酸(F)和丝氨酸(S)分别突变为丙氨酸,成功获得了相应的2个点突变基因。因此,重叠PCR技术是一种简单有效的进行体外基因重组和突变的方法,对于研究高等植物功能基因的结构功能特性具有重要的意义。

无机焦磷酸化酶基因转化甘蔗的遗传研究

赵丽宏;王俊刚;杨本鹏;张树珍;黄东杰;蔡文伟;

2009, 0(09): 73-77.

摘要 ( 92 )

PDF (427KB) ( 399 )

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甘蔗是我国最为重要的糖料作物,也是一种重要的能源作物,提高甘蔗的含糖量是甘蔗育种的主要目标。通过农杆菌介导法将无机焦磷酸化酶(PPase)基因导入甘蔗,以期获得提高蔗糖含量的转基因植株。经过PPT抗性筛选获得72株抗性植株,并对其进行PPase基因和bar筛选标记基因的双重PCR检测,其中有13株都呈阳性。结果初步证明无机焦磷酸化酶基因已整合到甘蔗的基因组中。

落叶松体细胞胚胎发生诱导多倍体的研究

张清国;韩素英;梁国鲁;齐力旺;

2009, 0(09): 78-82.

摘要 ( 130 )

PDF (515KB) ( 551 )

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通过检测细胞系增值率及细胞分裂指数确定细胞系分裂最旺盛时期,利用秋水仙素和氨磺灵诱导落叶松多倍体体细胞胚胎的发生,揭示了两种抗微管物质对落叶松体细胞胚胎发生的影响。秋水仙素在浓度为500 mg.L-1,浸泡处理36 h时能使多倍体体细胞胚胎发生的比例达到85.2%,体细胞胚发生率达到351.1个/g;氨磺灵在1~5 mg.L-1的浓度下处理后的细胞系几乎失去体细胞胚分化能力,无法大量获得多倍体体细胞胚。通过细胞压片及去壁-低渗涂片对比观察发现氨磺灵诱导后的细胞系除了染色体数目加倍外还有部分细胞发生程序性死亡。该研究初步证明了秋水仙素较适合落叶松多倍体体细胞胚的诱导,氨磺灵对落叶松毒害明显,不适合其多倍体的诱导。

人胃黏膜上皮细胞与胃癌细胞间酪氨酸磷酸化的比较蛋白质组学研究

贾红玲;朱用阳;晏光荣;徐振;孙黎;

2009, 0(09): 83-86.

摘要 ( 136 )

PDF (401KB) ( 476 )

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比较人正常胃黏膜上皮细胞GES-1与人胃癌细胞SGC-7901间酪氨酸磷酸化蛋白质的差异,筛选差异磷酸化蛋白质分子,为揭示胃癌发生发展的分子机制提供新的理论依据。采用免疫沉淀方法从人胃黏膜上皮细胞GES-1与人胃癌细胞SGC-7901总蛋白质中免疫沉淀出酪氨酸磷酸化蛋白质,用SDS-PAGE和二维凝胶电泳技术分离沉淀出的酪氨酸磷酸化蛋白质,银染,差异蛋白点进行胶内酶解,采用MALDI-TOF/TOF-MS质谱进行差异蛋白质鉴定。结果显示获得了7个差异酪氨酸磷酸化蛋白质,这些蛋白质涉及细胞骨架、细胞调控等。通过比较正常胃黏膜上皮细胞与胃癌细胞内酪氨酸磷酸化蛋白质的差异,筛选获得7个差异酪氨酸磷酸化蛋白质分子,有助于深入研究胃癌发生发展的分子机制,进而为胃癌的早期诊断和防治提供新的理论依据和作用靶标。

携带人NFBD1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

程莉;袁成福;黄秀凝;卜友泉;易发平;刘革力;汪长东;宋方洲;

2009, 0(09): 87-91.

摘要 ( 93 )

PDF (400KB) ( 319 )

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建立逆转录病毒介导的NFBD1基因RNA干扰表达体系,并观察其在宫颈癌SiHa细胞中对NFBD1表达的影响。将人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段重组到pSUPER Retro质粒中,构建携带人NFBD1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pSUPER-shRNA-NFBD1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株SiHa细胞,并用嘌呤霉素筛选产生稳定的细胞克隆,用实时荧光定量PCR和Westernblotting检测细胞中NFBD1mRNA和蛋白表达的变化。重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确;逆转录病毒感染SiHa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;实时荧光定量PCR和Westernblot-ting检测人NFBD1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。携带人NFBD1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染SiHa细胞后能明显抑制NFBD1mRNA和蛋白表达,为进一步研究NFBD1在宫颈癌中的作用奠定了基础。

超声微泡介导P53对宫颈癌HeLa细胞转染效率的试验研究

董培婷;熊正爱;李攀;王志刚;唐艳;

2009, 0(09): 92-96.

摘要 ( 129 )

PDF (308KB) ( 389 )

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探讨超声微泡介导野生型P53质粒转染人宫颈癌HeLa细胞的最优参数及转染效率,为外源性基因的高效定向转移奠定基础,为宫颈癌的基因治疗提供一条新的思路。将培养的HeLa细胞分别给予超声时间10 s,30 s,60 s,超声强度0.5,0.75,1 W/cm2的组合辐照,以筛选出对HeLa细胞无明显抑制作用的参数组合,再在筛选出的条件下将P53转染入HeLa细胞,24~48 h后,用荧光显微镜观察转染情况。将优化的超声条件用于下步转染,试验分为5组,即空白对照组、质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组,用RT-PCR分析各组转染情况。结果显示:当超声条件为0.5 W/cm2,30 s时,P53在HeLa细胞的转染率较其他试验组高,差异具有统计学意义;超声联合微泡可促进野生型P53质粒转染宫颈癌HeLa细胞,单独超声辐照有较弱的促转染作用。因此,适当的微泡浓度在优化的超声条件下能有效的提高P53质粒在HeLa细胞中的转染效率。

猪流感病毒HA基因的克隆及杆状病毒转移载体的构建

赵朴;郑玉姝;贾贝贝;乔传玲;陈化兰;刘兴友;李海燕;

2009, 0(09): 97-100.

摘要 ( 95 )

PDF (196KB) ( 344 )

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猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)不仅给养猪业造成重大经济损失,而且威胁人类健康。血凝素(hemag-glutinin,HA)是SIV囊膜上的重要免疫原,介导病毒吸附和膜融合。针对流感病毒的中和抗体主要以HA靶标阻断受体结合,本研究通过RT-PCR扩增了猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01(H3N2)的HA基因,并将其克隆入pMD18-T载体。重组pMD18-T经KpnI和PstI酶切后得到的HA基因插入pMelBacA载体的KpnI/PstI位点。PCR和限制性内切酶分析鉴定表明成功构建了pMelBacA-HA转移载体。这为开发HA亚单位疫苗奠定了基础。

鸭肠炎病毒gB基因的分子特征

马波;刘峰源;张扬;乌伊罕;刘晓玫;王君伟;

2009, 0(09): 101-106.

摘要 ( 95 )

PDF (329KB) ( 381 )

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鸭肠炎病毒是鸭病毒性肠炎的病原,被划分为疱疹病毒科成员。gB是疱疹病毒感染和复制所必需的糖蛋白,能刺激机体产生中和抗体和细胞免疫应答,在疱疹病毒家族中高度保守。通过PCR技术获得了DEV C-KCE株gB基因的核苷酸序列,首次对DEVgB基因及编码氨基酸进行了较为详尽的生物信息学分析。结果表明,DEVgB基因与α-疱疹病毒的马立克氏病毒属亲缘关系最近;DEV gB蛋白具有与其他疱疹病毒gB相同或相似的结构、N糖基化位点、半胱氨酸残基、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)结合位点、弗林蛋白酶水解位点和胞浆区PACS-1识别位点。

梅花鹿FSHβ亚基基因克隆与融合表达

张建肖;关洪斌;

2009, 0(09): 107-110.

摘要 ( 103 )

PDF (293KB) ( 371 )

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以原构建的克隆载体为模板,PCR扩增梅花鹿FSHβ亚基基因,TA克隆后经双酶切插入表达载体pGEX-6P-2,阳性克隆导入E.coliBL21,IPTG诱导表达GST-FSHβ融合蛋白,SDS-PAGE进行分析鉴定。结果显示,FSHβPCR产物大小约410 bp,测序结果与GenBank序列一致,成功构建了重组表达载体pGEX-6P-2-FSHβ,融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子量39.5 kD处,出现特异性蛋白条带,说明梅花鹿FSHβ亚基基因片段已在E.coliBL21中成功表达了FSHβ-GST融合蛋白,融合蛋白功能有待进一步分析。

蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究

房国梁;刘志国;宗义强;张大川;曾丽娟;付云洁;屈伸;

2009, 0(09): 111-116.

摘要 ( 124 )

PDF (541KB) ( 448 )

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旨在研究蛋白G IgG Fc段结合域(PGFB)的克隆、表达及其抗体结合功能,用于抗体的纯化。根据PGFB的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了4个寡核苷酸片段。通过重叠延伸PCR方法合成了PGFB DNA片段,测序鉴定后克隆至原核表达系统pET-28a-c(+)上,转化大肠杆菌,获得表达菌株;IPTG诱导表达PGFB,经Ni+-NTA琼脂糖凝胶层析纯化后偶联到琼脂糖凝胶6B上,用其纯化多克隆抗体。结果显示,PGFB在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,纯化后纯度达到90%以上,相对分子量为12.25 kD,与预期值相符。此外,偶联产物纯化多克隆抗体达到了良好的效果,每毫升基质可结合20 mg抗体。本研究克隆构建并高效表达了具有较好抗体亲和能力的PGFB,为多克隆抗体的快速纯化提供了方便。

筛选dbat启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库的构建

姚瑞枫;张蒙;张鹏;李书涛;陈丽;付春华;余龙江;

2009, 0(09): 117-120.

摘要 ( 114 )

PDF (285KB) ( 625 )

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旨在构建酵母单杂交文库用于筛选与dbat基因启动子顺式元件结合的转录因子。首先,分离dbat启动子上的顺式作用元件,并进行3个拷贝的重复后,和报告质粒pHis 2.1连接构建诱饵载体pHis 2.1-dp3。然后,从茉莉酸甲酯诱导的红豆杉细胞中提取总RNA,以纯化出的mRNA为模板,依次完成ss cDNA和ds cDNA的合成,并将纯化的ds cDNA、线性化载体pGADT7-Rec2和诱饵载体pHis 2.1-dp3共转化酵母细胞Y187,各取100μl分别涂布于SD/-leu和SD/-leu/-trp平板,用于计算重组效率和转化效率,剩余转化液涂布于SD/-leu/-trp/-his/20 mM3-AT平板,用于筛选阳性克隆。结果表明,重组效率为1.49×106CFU/μg,共转化效率为1.93×105CFU/μg;对阳性克隆质粒进行酶切、测序分析,得到6个可编码结合蛋白的基因。以上工作为筛选调控紫杉醇合成关键酶基因dbat表达的转录因子奠定了基础。

人类抗菌肽hepcidin在毕赤酵母中的分泌表达和纯化

Farzana Rashid;Ijaz Ali;袁其朋;孙新晓;李文进;李飞;

2009, 0(09): 121-124.

摘要 ( 141 )

PDF (328KB) ( 377 )

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报道了一种低分子量的人类抗菌肽hepcidin基因的克隆、表达以及纯化。试验证明在毕赤酵母中能成功分泌有活性的hepcidin,hepcidin在重组菌株中的表达量约为3 mg/L,Western blot显示2.2 kD的重组hepcidin条带,重组hepcidin通过凝胶过滤及反向高效液相色谱纯化,质谱验证,重组蛋白对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌表现出抗菌活性。

含绿色荧光蛋白标记的木霉表达载体的构建

吕天晓;李世贵;顾金刚;姜瑞波;牛永春;

2009, 0(09): 125-129.

摘要 ( 90 )

PDF (282KB) ( 507 )

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ACCC 30150是由本实验室筛选的一株对黄瓜枯萎病、青椒疫病等多种土传病害具有较好防治效果的长柄木霉生防菌,为研究其在蔬菜根际的定殖情况,本试验将含绿色荧光蛋白(GFP)和潮霉素B抗性的融合基因交换整合到真核表达骨架载体pNOM102上。通过酶切鉴定和测序鉴定证明目的片段与载体片段连接正确,木霉表达载体pNOM102-HygEGFP构建成功,为下一步进行生防木霉根际定殖研究奠定基础。

三七法呢基焦磷酸合酶原核表达载体的构建及其表达

周娟;赵瑞强;陈莉;吴耀生;

2009, 0(09): 130-133.

摘要 ( 92 )

PDF (463KB) ( 343 )

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在克隆得到三七法呢基焦磷酸合酶(FPS)cDNA的基础上,构建原核表达载体pET32 a(+)/FPS,并转化大肠杆菌BL21(DE3)受体菌,在37℃,1 mmol/L IPTG浓度条件下,诱导表达FPS融合蛋白,对诱导表达条件进行了优化。结果表明:成功构建了原核表达载体pET32 a(+)/FPS,并在大肠杆菌中成功表达FPS蛋白,分子量约为40 kD,为进一步开展FPS的蛋白纯化和功能分析奠定了基础。

绿色糖单孢菌-木素过氧化物酶的发酵工艺研究

杨暖;丁梦璇;汪文静;谢响明;何晓青;赵国柱;李志茹;

2009, 0(09): 134-138.

摘要 ( 94 )

PDF (418KB) ( 353 )

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本研究以一株中度耐热耐碱放线菌——绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)为研究对象,用16 L发酵罐对该菌进行了木素过氧化物酶(lignin peroxidases,LiP)的诱导发酵,确定了最适的产酶工艺条件:接种量为10%,C/N为1∶3,搅拌速度为250 r/min,通气量为5 L/min,通过控制通气量和调整搅拌转速,使溶氧维持在35%以上,此条件下绿色糖单孢菌较摇瓶实验提前将近24 h达到产酶高峰,酶活最高可达0.41 U/ml;同时在发酵罐中测定该菌株的生长曲线和代谢曲线以确定其发酵代谢规律。

发酵产氢菌株的筛选及影响因素研究

霍丹群;武琳琳;廖强;王永忠;侯长军;田鑫;

2009, 0(09): 139-142.

摘要 ( 89 )

PDF (289KB) ( 279 )

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采用双层平板法从污泥池中筛选出一株产氢较高的发酵菌株,经生理生化鉴定表明,分离菌株初步鉴定为消化链球菌属(Peptostreptococcus)。研究静态培养条件下葡萄糖、pH、温度及和酵母膏对菌株产氢的影响及不同发酵时间段的产氢情况。结果表明,在葡萄糖浓度20.0 g/L,pH7.0,温度37℃和酵母膏2.0 g/L时,产氢量达21.07 mmol/L,为初始培养条件下的4.14倍。同时,在24~36 h时间段产氢率达到最高,为0.44 mmol/(L.h),并且在60 h时产氢量达到最大累计产氢量的89.2%。

石油烃降解菌的筛选与鉴定

崔丽虹;郭萍;李宝明;田云龙;刘雪;朱昌雄;

2009, 0(09): 143-147.

摘要 ( 137 )

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从胜利油田的石油污染土壤中经富集培养分离出50株细菌,其中33株菌在以石油为惟一碳源和能源的选择性培养基中生长良好。采用紫外分光光度法对菌株的降解能力进行测定,结果有16株菌在石油初始浓度为2 500 mg.L-1的培养液中振荡培养4 d降解率超过30%,其中PU-34、PU-15、PU-2、PU-4、PU-1降解能力较高,4 d能够使石油烃类含量分别减少58.38%、55.55%、55.17%、53.09%、52.36%,在生物修复石油污染技术中具有应用前景。结合形态特征观察、生理生化特性和16S rDNA序列分析的方法对这5株菌进行菌种鉴定,确定PU-34为假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas sp.),PU-15和PU-2为戈登氏菌(Gordonia sp.),PU-4为红球菌(Rhodococcus sp.),PU-1为假单胞菌(Pseudomonas sp.)。

利用烟草生物技术治疗癌症

孙国凤;

2009, 0(09): 148-149.

摘要 ( 110 )

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