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α-HNP-1转基因细胞系的建立

高其双;黄海军;欧阳静萍;吴建英;陶弼菲;杨悦;张德玲;蒋思文;   

  1. 武汉市畜牧兽医科学研究所,华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室&农业部猪遗传育种重点开放实验室,武汉大学医学院过敏及免疫相关疾病重点实验室,武汉市畜牧兽医科学研究所,武汉市畜牧兽医科学研究所,武汉大学医学院过敏及免疫相关疾病重点实验室,武汉大学医学院过敏及免疫相关疾病重点实验室,华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室&农业部猪遗传育种重点开放实验室 武汉430065,武汉430070,武汉430071,武汉430065,武汉430065,武汉430071,武汉430071,武汉430070
  • 出版日期:2007-12-26 发布日期:2007-12-26
  • 基金资助:
    湖北省科技攻关计划课题(2003AA303B06)

  • Published:2007-12-26 Online:2007-12-26

摘要: 目的构建稳定表达人α-HNP-1的转基因细胞系,为稳定生产α-HNP-1并将其应用于医药开发提供生产细胞源。方法真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNP-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染昆明白小鼠胚胎干细胞来源的上皮细胞,通过不同浓度的G418加压筛选,建立稳定转染的胚胎干细胞来源的上皮细胞系,用RT-PCR及抑菌试验检测α-HNP-1的表达。结果建立了稳定转染的ES来源的上皮细胞系,成功地表达目的基因,其培养上清液及细胞冻融液具有抑菌作用,结论真核表达载体稳定转染胚胎干细胞来源的上皮细胞系,为进一步研究α-HNP-1的功能奠定了基础。

关键词: 人α-防御素-1, 真核表达载体, ES细胞, 上皮细胞系, 稳定转染, 基因表达