生物技术通报

胡亚平;吴刚;张丽;卢长明;

2009, 0(06): 1-6.

摘要 ( 125 )

PDF (329KB) ( 698 )

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长链多不饱和脂肪酸(LCPUFA)对人体健康和发育具有极为重要的作用。由于海洋鱼类资源过度捕捞和环境污染的加剧,长链多不饱和脂肪酸的来源日益枯竭。利用转基因油料作物生产LCPUFA,特别是DHA和EPA成为目前研究的热点。归纳了LCPUFA合成代谢途径相关基因的最新研究进展,描述了利用植物基因工程合成长链多不饱和脂肪酸(特别是EPA和DHA)取得的主要成果,讨论了影响转基因油料作物合成DHA和EPA的关键因素,最后对利用转基因油料作物合成DHA和EPA的研究前景进行了展望。

植物小孢子胚胎发生机理

赵建平;姚祥坦;

2009, 0(06): 7-11.

摘要 ( 115 )

PDF (276KB) ( 1170 )

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植物小孢子胚胎发生是作物遗传育种研究中的一个重要内容,也可以用来作为一个研究离体胚胎发育的优良模式系统。小孢子胚胎发生可以分为获得胚性潜能、启动细胞分裂和图式形成等3个特征阶段,对这3个阶段中主要的细胞分子特征进行综述。

书讯

2009, 0(06): 11-50.

摘要 ( 65 )

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内源小RNAs在植物病原体抗性反应中的作用

谢兆辉;

2009, 0(06): 12-15.

摘要 ( 111 )

PDF (313KB) ( 414 )

相关文章 | 计量指标

内源小RNAs是动植物基因表达的重要调节分子,它们可以通过指导mRNA的降解、抑制翻译或染色体修饰等机制,在转录水平或转录后水平或两个水平沉默基因。内源小RNAs在植物生长发育和生物和非生物胁迫适应反应中具有重要作用,其中3种内源性的小RNAs参与了植物基本免疫反应和对病原体的特异性免疫反应。内源小RNAs的发现为植物抗菌和抗病研究开辟了新思路,就这几种内源性的小RNAs的产生和它们在植物抗病原体反应中的作用做一概述。

高铁功能型水稻研究进展

贾倩;赵琦;

2009, 0(06): 16-19.

摘要 ( 97 )

PDF (123KB) ( 577 )

相关文章 | 计量指标

主要介绍了高铁功能型水稻的概念,对目前国内外缺铁造成的影响进行了综述。介绍了目前国际上常用的3种测定水稻中铁含量的方法,分别是原子吸收光谱法、等离子发射光谱法和紫外分光光度计法;重点阐述了国际和国内利用诱变育种、分子辅助标记育种及转基因育种等技术,在培育高铁功能型水稻新品种(系)研究中所取得的进展,并展望了我国高铁功能型水稻的发展趋势。

棉花耐盐性及抗氧化性研究进展

李向前;王艳;张富春;

2009, 0(06): 20-24.

摘要 ( 144 )

PDF (280KB) ( 669 )

相关文章 | 计量指标

棉花(Gossypum hirsutum L.)具有一定的耐盐能力,但盐分过量会对棉花造成离子毒害、渗透胁迫和氧化危害。棉花能够通过调控Na+/H+反向转运蛋白将盐离子排出胞质或区隔在液泡内,以减轻离子毒害;还能通过调节渗透相关基因合成脯氨酸、甜菜碱等小分子物质及LEA保护蛋白来进行渗透保护调节。棉花通过抗坏血酸-谷胱甘肽循环途径及提高体内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶等的活性,清除活性氧物质。总结了棉花在耐盐和抗氧化机制方面的研究结果,探讨了棉花耐盐和抗氧化机制之间的相互关系,为提高棉花抗性水平的研究提供理论依据。

O-连接的N-乙酰葡糖胺糖蛋白的研究进展

潘丽晶;庞义;

2009, 0(06): 25-29.

摘要 ( 153 )

PDF (256KB) ( 352 )

相关文章 | 计量指标

O-连接的N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)修饰是普遍存在的翻译后修饰。已有许多的蛋白被发现是O-GlcNAc蛋白。目前,许多分析方法可以检测O-GlcNAc,将其从内膜系统的多种糖基化中区分出来。O-GlcNAc修饰在细胞事件中发挥着重要的功能,O-GlcNAc的调控异常可能会引起某些人类疾病,如癌症、阿尔茨海默病和II型糖尿病。杆状病毒GP41蛋白也是糖蛋白,它介导芽殖型病毒粒子(budded virus,BV)的核衣壳通过胞核。O-GlcNAc的调控研究为探讨GP41蛋白O-Glc-NAc的调控作用提供了参考模式。

乙型肝炎病毒C蛋白和X蛋白的修饰及其意义

钱冠华;段昌柱;

2009, 0(06): 30-33.

摘要 ( 117 )

PDF (239KB) ( 466 )

相关文章 | 计量指标

乙型肝炎病毒(HBV)作为一个外来入侵的病毒可以激发人体的免疫反应,导致人体一系列与HBV感染有关的病理变化与临床表现。HBC和HBX是由HBV基因编码的两种重要蛋白。HBC对病毒基因组的复制和成熟是必不可少的,其蛋白修饰后的产物对病毒在宿主细胞内的组装、成熟和对外分泌中发挥着作用。HBX能与多种蛋白发生相互作用,在HBV的复制中起着不可或缺的作用,也影响着肝细胞癌的形成。现有的对HBC和HBX的磷酸化和泛素化过程的研究,为进一步揭示HBV的致病机制提供了依据,希望最终为乙型肝炎的临床治疗寻找一条新的途径。

siRNA核糖分子化学修饰对RNAi功能的影响

武文斌;

2009, 0(06): 34-37.

摘要 ( 159 )

PDF (124KB) ( 780 )

相关文章 | 计量指标

RNA干扰(RNAi)是基于正常RNA生理调节反应,主要由小干扰RNA(siRNA)引发的转录后基因沉默现象。RNAi技术是基因功能研究的重要手段。目前困扰siRNA进入临床的主要困难有siRNA分子易降解、稳定性差、转运效率低、存在靶外效应和免疫刺激反应等。siRNA分子骨架中核糖化学修饰能够一定程度克服上述障碍,降低siRNA给药剂量,减少副作用,是siRNA进入临床最可能的方式。对核糖分子常用位点尤其是2-′羟基化学修饰后siRNA分子的药动学性状及RNAi功能做了分析。

杆状病毒凋亡抑制基因

舒端阳;陈娟;郭素英;彭建新;洪华珠;

2009, 0(06): 38-41.

摘要 ( 102 )

PDF (281KB) ( 354 )

相关文章 | 计量指标

杆状病毒(baculoviruses)感染昆虫细胞会引发细胞凋亡,然而病毒为了确保自身的复制和繁殖会抑制宿主细胞的凋亡。杆状病毒在长期进化过程中获得了凋亡抑制基因,如苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica MNPV,AcMNPV)中的p35基因,棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组中的IAP基因家族,以及莲纹夜蛾核形多角体病毒(Spodoptera littoralismulticapsid nucleopolyhedrovirus,SpliMNPV)的p49基因等。尽管这些基因都具有抑制细胞凋亡的功能,但是作用途径和方式却各有差异。对杆状病毒3种抗凋亡基因的结构和功能作一简单的介绍和评述。

Bac-to-Bac系统在杆状病毒功能基因研究上的应用

习欠云;张永亮;江青艳;王珣章;

2009, 0(06): 42-44.

摘要 ( 132 )

PDF (165KB) ( 477 )

相关文章 | 计量指标

利用Bac-to-Bac系统,在大肠细菌中复制增殖杆状病毒质粒bacmid,并通过RecA介导法、ET-recombination法在bacmid DNA上缺失或插入功能基因,构建功能基因缺陷型或补回型的杆状病毒质粒。该质粒转染到昆虫细胞中产生重组病毒,进而在细胞甚至虫体水平上研究基因的功能,极大改善了传统上用空斑实验筛选重组病毒的不足。

分泌高效蛋白的地衣芽孢杆菌及其工业应用

牛丹丹;石贵阳;王正祥;

2009, 0(06): 45-50.

摘要 ( 193 )

PDF (337KB) ( 1504 )

相关文章 | 计量指标

革兰氏阳性、腐生性地衣芽孢杆菌是高温α-淀粉酶、碱性蛋白酶的重要工业生产用菌株。其基因组大小约为4.22 Mb,已被多个国际机构认定为GRAS工业菌株。地衣芽孢杆菌具有完善的蛋白分泌体系,蛋白合成与分泌能力可达到20~25 mg/ml。在作为外源基因表达系统的研究中,建立了其遗传转化方法,完成了多种表达载体的构建与应用,以及进行了作为宿主细胞的地衣芽孢杆菌的遗传改良与多种重组蛋白表达的研究。显示地衣芽孢杆菌具有作为重组蛋白高效分泌表达的巨大潜力与工业应用价值。

禽类多能干细胞的研究与应用

何文俊;叶玲玲;陈昭烈;

2009, 0(06): 51-54.

摘要 ( 117 )

PDF (143KB) ( 432 )

相关文章 | 计量指标

禽类多能干细胞是一种未分化的细胞,来源于X期未孵化的胚盘细胞或5.5 d性腺的原始生殖细胞,具有自我更新能力,并能分化为所有类型细胞,包括生殖系。禽类多能干细胞最重要的应用就是在体外对其基因组进行特异性修饰,用来制备转基因禽类。禽类多能干细胞的培养已取得显着进步,随着对其多能性分子基础等研究的深入,禽类多能干细胞也将得到充分运用。综述了禽类多能干细胞的培养方法、生物学特性及其应用进展。

饲养层及细胞因子对鸡PGCs体外培养的影响

张秋婷;苗向阳;安铁洙;

2009, 0(06): 55-58.

摘要 ( 100 )

PDF (201KB) ( 416 )

相关文章 | 计量指标

原始生殖细胞(PGCs)具备发育全能性,而且数量较多,与数量较少的内细胞团(ICM)相比更有利于进行分离克隆。不同动物的PGCs的生长条件不同,因此建立适宜的培养体系是PGCs培养的关键。对饲养层细胞及细胞因子对鸡PGCs体外培养的影响作了简单的介绍。

活性污泥合成聚羟基脂肪酸脂的研究进展

黄媛媛;

2009, 0(06): 59-61.

摘要 ( 125 )

PDF (123KB) ( 783 )

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聚羟基脂肪酸(PHAs)是许多原核微生物在不平衡生长条件下合成的细胞内能量和碳源储藏性物质,同时也是一种可完全生物降解的塑料,由于其良好的环境效应及机械性能而受到广泛关注。使用活性污泥合成PHA既能降低PHA的生产成本,又能充分利用活性污泥资源,减少对环境的污染。综述了活性污泥合成PHA的研究进展,包括合成PHA的主要微生物、碳源及影响PHA积累的因素。

细胞分子生物学技术在靶向药物筛选中的应用

刘明;赵琦;李亚男;胡文祥;

2009, 0(06): 62-66.

摘要 ( 144 )

PDF (362KB) ( 1470 )

相关文章 | 计量指标

随着细胞及分子生物学的发展,新技术方法越来越多地用于新靶点建立和药物筛选研究,为药物设计、靶点的选择和用药方案的确定提供理论依据,同时使药物筛选有了更高的特异性,对药物筛选和药理学研究起到了极大的促进作用。论述了功能基因的筛选、高通量细胞筛选和高内涵筛选技术、反义核酸技术、转基因/基因敲除技术、基因芯片、蛋白质芯片、组织芯片、酶免疫分析、荧光免疫分析、流式细胞技术等方法在靶向药物筛选中的应用。

糖微阵列技术在糖组学研究中的进展

陈礼刚;陈晓艺;郭继强;刘志文;李宪臻;

2009, 0(06): 67-70.

摘要 ( 260 )

PDF (306KB) ( 776 )

相关文章 | 计量指标

聚糖多以蛋白质和脂配基形式存在,在生物体内的信息传递、细胞识别和蛋白质折叠等生物过程中具有十分重要作用,是继核酸和蛋白质之后被发现的第三类生物信息分子。但聚糖结构复杂,并存在大量异构体,无法象DNA一样进行合成和测序。根据聚糖分子能够与凝集素或糖结合蛋白特异性结合,提出并发展了糖微阵列技术。此技术在聚糖结构与功能研究中已显示出优越性。通过对糖微阵列构建方式及检测方法的探讨,对近些年来糖微阵列技术的发展进行了综述。

差异表达基因分离技术的研究进展

高雪;

2009, 0(06): 71-74.

摘要 ( 149 )

PDF (203KB) ( 766 )

相关文章 | 计量指标

分离并克隆差异表达基因是生命科学的研究热点。近年来,以差示筛选、扣除杂交等基本方法为基础,先后出现了抑制差减杂交,微阵列技术等多种分析差异表达基因的技术,使差异表达基因分离方法不断完善。对这些方法的优缺点、发展趋势及应用前景进行了简要综述。

两种阳离子纳米基因载体及植物基因介导效果的研究

宋瑜;李颖;崔海信;李瑶;

2009, 0(06): 75-80.

摘要 ( 121 )

PDF (716KB) ( 590 )

相关文章 | 计量指标

以阳离子聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)和壳聚糖(chitosan,CS)作为两种植物基因载体,分别制备了载基因PEI纳米粒(PEI/DNA)和壳聚糖-DNA纳米粒(CS/DNA),并对其形态、粒度分布、包封率、DNA结合的稳定性及纳米颗粒对DNA的保护等方面进行表征。并以GFP基因为报告基因进行植物细胞转染,比较两者转化效率。结果表明PEI/DNA纳米粒稳定性,对DNA的保护以及转染效率等方面均优于壳聚糖-DNA纳米粒。

水稻赤霉素代谢关键酶基因表达的检测分析

梅进;杨远柱;林建中;周波;俞竞;唐冬英;刘选明;

2009, 0(06): 81-85.

摘要 ( 99 )

PDF (711KB) ( 417 )

相关文章 | 计量指标

赤霉素(GA)与水稻矮化突变体的产生有密切的关系。根据GenBank数据库中水稻赤霉素代谢关键酶基因的cDNA序列,在保守序列区域设计引物,经过反应条件优化,建立了相对定量RT-PCR双标准曲线检测方法,并对中9B及其体细胞无性系矮化突变体SV9B的相关基因表达情况进行了检测。结果表明,该方法设计的引物特异性强,所构建的标准曲线相关性好,实验具有很高的可信度,可以应用于水稻赤霉素相关突变体的研究。

拟南芥冷诱导CBF/DREB类结合因子的克隆及其生物信息学分析

刘俊;蔡平钟;张志雄;马林;向跃武;张志勇;王闵霞;

2009, 0(06): 86-90.

摘要 ( 100 )

PDF (766KB) ( 556 )

相关文章 | 计量指标

CBF/DREB结合因子广泛存在于植物中,主要参与诸如干旱、高盐以及冷胁迫等相关基因的表达调控。以拟南芥DNA为模板,PCR扩增出3个冷诱导的CBF/DREB结合因子,即CBF1、CBF2及CBF3,利用生物信息学手段对三者的cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、功能域、进化树、二级结构及DNA保守域的三级结构等进行了较为全面的分析。结果显示,CBF1、CBF2和CBF3的氨基酸序列同源性很高,达到91.4%,且都属于亲水性蛋白,三者在理化性质以及蛋白质二级结构乃至三级结构上也极为相似。另外,CBF1和CBF2都不具跨膜结构,CBF3含有1个跨膜螺旋。

拟南芥氮代谢相关基因T-DNA插入突变体低氮响应的初步研究

刘菲;林熊;尹辉;张富春;

2009, 0(06): 91-95.

摘要 ( 107 )

PDF (441KB) ( 539 )

相关文章 | 计量指标

氮代谢相关基因家族的拟南芥T-DNA插入突变体幼苗期对低氮环境有不同的响应。叶绿素含量,干物重,全氮含量测定结果表明:有2个氨转运蛋白基因(ammonium transport gene mutant,AMTm)和8个硝酸还原酶基因(nitrate reduc-tases gene mutant,NRm)的T-DNA突变体与野生型对照相比对外界低氮环境的适应能力存在显着差异。

桃多聚半乳糖醛酸酶基因的cDNA克隆及序列分析

陈鑫;李唯;王旺田;杨德龙;

2009, 0(06): 96-99.

摘要 ( 99 )

PDF (464KB) ( 434 )

相关文章 | 计量指标

以白粉桃成熟果实为材料,用Trizol法提取桃总RNA,根据已发表的多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因的序列设计合成一对特异引物,经RT-PCR扩增出一条1 188 bp的目的片段,包括一个393个氨基酸组成的开放阅读框。通过TA克隆,把它连接到pGEM-Tvector上。PCR、酶切鉴定后进行基因测序,结果表明所克隆的PG基因与GenBank中肥城桃PG基因序列(AF095577)同源性为98.65%,相应的氨基酸的同源性为97.46%,说明此片段为桃PG基因片段。

烟草主要栽培类型的SRAP标记研究

王日新;任民;贾兴华;冯全福;杨爱国;付宪奎;王绍美;罗成刚;

2009, 0(06): 100-104.

摘要 ( 92 )

PDF (459KB) ( 367 )

相关文章 | 计量指标

利用SRAP分子标记从700对引物中筛选到普通烟草栽培种内(Nicotiana tabacum L.)两条晾烟(马里兰烟、白肋烟)类型的特征标记带、一条晒烟(香料烟和名优晒烟)类型的特征标记带,一条烤烟与晾烟特征标记带。这些标记不但可以直接转化成SCAR标记,而且可通过分离群体的遗传分析用于烟草类型间遗传转化的特征带,也可进一步用于测序发掘新基因。在分子水平上为研究普通烟草种内不同栽培类型间的遗传差异和类型划分奠定了可行性实验基础。

无芒雀麦愈伤组织在氩离子(Ar~+)注入过程中冻害耐受性研究

黄洪云;那日;刘美玲;邢万金;

2009, 0(06): 105-108.

摘要 ( 112 )

PDF (150KB) ( 252 )

相关文章 | 计量指标

以无芒雀麦愈伤组织为研究对象,探讨了甘油处理对愈伤组织在氩离子注入过程中冻害的防护。结果表明:经甘油处理后,当离子注入剂量小于2.6×1015Ar+.cm-2时,愈伤组织存活率在85%以上,失水率在12%,比未经甘油保护的有大幅度提高,甘油预处理的愈伤组织生长比较正常。注入剂量增加到一定程度,愈伤组织不能继续生长。

陆地棉子叶节高效再生体系的建立

胡根海;王清连;郭敏敏;张金宝;胡存科;

2009, 0(06): 109-111.

摘要 ( 93 )

PDF (120KB) ( 314 )

相关文章 | 计量指标

对3个陆地棉材料子叶节进行离体培养,建立了高效的再生体系。其中,启动培养基为MSB+2.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/LKT,芽分化培养基为MSB+0.3 mg/L 6-BA+0.3 mg/LKT,通过器官发生途径诱导形成丛生芽,芽伸长培养基MSB。以上培养基均含葡萄糖糖30 mg/L。此再生体系每个外植体可获得2.75个以上不定芽,嫁接移栽驯化后,成活率接近95%。

甘露醇在根癌农杆菌转化石斛兰中的作用

冯莹;赖钟雄;

2009, 0(06): 112-116.

摘要 ( 89 )

PDF (363KB) ( 487 )

相关文章 | 计量指标

以淡绿色细小且致密的石斛兰原球茎为材料,研究甘露醇在根癌农杆菌转化石斛兰中的作用。结果表明:原球茎侵染前经过附加0.3 mol/L甘露醇的高渗固体培养基中进行前处理6 h,GUS瞬时表达率为60.00%,而对照的GUS瞬时表达率为0.0。甘露醇高渗处理对石斛兰根癌农杆菌的转化具有提高转化效率的作用。

联合使用低剂量环磷酰胺有效增强热休克蛋白gp96免疫佐剂功能

刘振;崔玉东;孟颂东;

2009, 0(06): 117-121.

摘要 ( 124 )

PDF (567KB) ( 451 )

相关文章 | 计量指标

前期研究发现热休克蛋白gp96作为分子伴侣,能特异结合乙肝病毒(HBV)表位肽,并将结合的多肽交叉呈递给MHCⅠ类分子,从而激活病毒特异性CD8+T细胞(CTL)。在此基础上,研究BALB/c小鼠模型联合低剂量环磷酰胺(cy-clophosphamide,CTX)对热休克蛋白gp96免疫佐剂功能的影响。以gp96或其N端片段(N355)与H-2Kd限制的乙肝病毒核心蛋白表位HBcAg87-95作为佐剂联合低剂量CTX免疫BALB/c小鼠。联合使用低剂量CTX的试验组CD8+T细胞、IFN-γ+CD8+T细胞、乙肝抗原特异T细胞比例显着高于未使用CTX的对照组(P<0.05),且联合使用CTX的试验组CD4+CD25+调节性T细胞(TRegulatory Cells,Treg)比例显着低于单独使用gp96和N355试验组(P<0.05),说明低剂量的CTX能特异性抑制Treg从而导致T细胞的增加。以上研究表明联合使用低剂量的环磷酰胺能有效增强gp96免疫佐剂功能,这为进一步优化gp96佐剂疫苗的使用提供了依据。

肝再生增强因子RNAi对肝癌细胞株HepG2表达MHCI、DR、CD80、CD86的影响

谢松丽;张云霞;孙航;刘杞;

2009, 0(06): 122-126.

摘要 ( 103 )

PDF (653KB) ( 345 )

相关文章 | 计量指标

利用肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)的siRNA阻断人肝癌细胞株HepG2表达ALR,观察HepG2细胞MHCI、DR、CD80、CD86的表达是否受影响,以探讨ALR是否通过影响MHCI、DR、CD80、CD86表达参与肝癌细胞逃避机体的免疫监视。培养HepG2,分为未转染组、转染阳性SiRNA组、转染阴性SiRNA组、转染脂质体空质粒组;RT-PCR检测转染前后hALR mRNA的表达,RT-PCR、Western blot印迹法、流式细胞术(FCM)检测HepG2细胞表达MHCI、DR、CD80、CD86的水平。结果表明,转染阳性SiRNA组hALR mRNA的表达较转染阴性SiRNA组明显下降,转染阳性SiRNA组和转染阴性SiRNA组MHCI、DR、CD80、CD86的表达均无差异;脂质体转染组除CD80 mRNA外,MHCI、DR、CD86 mRNA表达均较未转染组增高;脂质体转染组MHCI、DR、CD80、CD86的表达水平均较未转染组有上升趋势。因此,阳性SiRNA具有显着和特异性抑制hALR表达的作用,阻断ALR的表达不影响HepG2细胞表达MHCI、DR、CD80、CD86,ALR不通过影响MHCI、DR、CD80、CD86的表达参与肝癌细胞逃避机体免疫监视。转染载体可能影响某些基因的表达。

ErbB-4受体介导卵巢癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的实验研究

汤雄文;杨竹;朱元方;樊萍;王露颖;

2009, 0(06): 127-130.

摘要 ( 87 )

PDF (388KB) ( 388 )

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探讨ErbB-4受体在卵巢癌细胞增殖、侵袭等生物学行为中的作用。免疫组化检测ErbB-4受体在卵巢癌细胞株OVCAR-3表达;噻唑蓝比色法(MTT)测定不同浓度的ErbB-4单克隆抗体(Ab-3)对体外培养的卵巢癌OVCAR-3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;侵袭实验观察Ab-3对OVCAR-3侵袭能力的影响。结果表明,ErbB-4在OVCAR-3细胞株中呈阳性表达;不同浓度(0.625~10μg/ml)的Ab-3均能抑制OVCAR-3细胞生长,且具有浓度和时间依赖性,其作用72 h的中效浓度为4.48μg/ml。流式细胞仪检测发现Ab-3(2.0μg/ml)作用24、48及72 h后,OVCAR-3细胞出现S期阻滞,肿瘤细胞的凋亡率逐渐增加;抗体处理组穿透侵袭小室滤膜的细胞数(78.0±6.1)明显少于对照组(132.0±17.2)(P<0.01)。因此,Ab-3可抑制内源性ErbB-4表达的OVCAR-3细胞株的增殖、侵袭能力,诱导细胞凋亡。

人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104抗癌细胞活性的检测

张世奇;孙嘉琳;胡坤;朱秀珊;边小鹤;

2009, 0(06): 131-134.

摘要 ( 141 )

PDF (407KB) ( 521 )

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检测人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104对癌细胞的杀伤活性以及此杀伤活性对白细胞介素-2的依赖性,动态观察其体外增殖能力。用台盼兰拒染法计算细胞扩增倍数;用MTT法检测细胞毒杀伤活性,实时观察细胞的杀伤过程。结果表明,在200 IU/ml IL-2刺激下,TALL-104细胞增殖能力较强;在效靶比5∶1,作用时间为24 h,TALL-104细胞表现出对癌细胞MCF-7和A-431较高的杀伤率分别为50.4%和69.5%;当作用时间在72 h以内,效靶比不高于10∶1时,杀伤率随作用时间和效靶比的增加而明显升高(P<0.05);最大杀伤率分别为79.8%(MCF-7细胞)和90.4%(A431细胞)。因此,TALL-104细胞体外增殖能力较强,其细胞毒活性不严格依赖于IL-2的存在。

pH值对FOXO1、GDF-8基因反义RNA寡核苷酸吸收的影响

丛浩龙;刘建玲;杨倬;孙仑泉;刘长梅;

2009, 0(06): 135-139.

摘要 ( 149 )

PDF (409KB) ( 345 )

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研究不同pH值下,口服靶向FOXO1与GDF-8基因反义RNA寡核苷酸药物对药效的影响。化学合成靶向FOXO1与GDF-8基因的有效反义RNA寡核苷酸片段,调节药物PH值,通过灌胃方式给药,给药20 d后处死小鼠,进行体重,腿部肌肉增长情况分析。提取腿部肌肉组织总RNA,用real time PCR检测FOXO1与GDF-8基因的表达。结果表明,服用RNA oligos的试验组小鼠腿部肌肉重量均比对照组肌肉重量增长快。其中pH为7.0的RNA oligos的效果比pH为5.0的效果好,pH9.0的RNAoligos的作用效果最弱。与小鼠体重变化结果一致,real time PCR检测实验组FOXO1与GDF-8基因转录水平较对照组均有明显下降,其中服用pH为7.0的RNA oligos的下降最多。因此,口服靶向FOXO1与GDF-8基因的反义RNA寡核苷酸药物的最适pH值应为中性偏酸。

斑马鱼外源基因acta1-AcGFP重组及其最佳注射浓度初探

潘鸿捷;刘红;蔡生力;张俊;叶斐菲;王豪杰;

2009, 0(06): 140-146.

摘要 ( 170 )

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肌动蛋白纤维(actin filament)又称微丝(microfilament,MF),由肌动蛋白(actin)组成,是骨骼肌的重要组成部分。通过PCR从斑马鱼基因组DNA中分离得到大小为2 019 bp的α肌动蛋白1(α-actin1)启动子所在区域片段。序列分析表明,该片段序列与NCBI公布的α-actin1基因5′侧翼区相应序列的相似性为98.7%,并且含有多个MEF2,E-box等对肌肉表达起调控作用的顺式元件以及在转录中起重要作用的TATA-box。将该启动子片段与绿色荧光蛋白基因(AcGFP)重组,构建肌动蛋白特异性表达载体。采用显微注射法,将线性化表达载体注入斑马鱼受精卵中,获得转绿色荧光蛋白基因斑马鱼,平均表达率最高为16.5%。并初步确定400 ng/μl为外源基因(acta1-AcGFP)的最佳注射浓度。通过观察发现,AcGFP基因主要在骨骼肌中表达,且表达量随仔鱼肌肉的发育呈增长趋势。证明了分离得到的α-actin1启动子所在区域片段具有有效的驱动功能,为进一步开展转基因观赏鱼的研究与开发提供了依据。

类球红菌自诱导物合成酶基因cerI的克隆及其原核表达

苗艳;叶姜瑜;习劲;廖强;

2009, 0(06): 147-150.

摘要 ( 115 )

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根据类球红菌(Rhodobacter sphaeroides2.4.1)自诱导物合成酶基因cerI的序列,设计并合成了1对特异性引物,在引物的5′和3′分别加入含有HindIII和XhoI限制性酶切位点的序列,以类球红细菌Rhodobactersphaeroides基因组为模板扩增了cerI基因序列。将PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α。鉴定成功获得目的片段,经HindIII和XhoI双酶切后与载体pET-28a(+)连接,构建原核表达质粒pET-28a(+)-cerI,并将其转化宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导其表达。SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-28a(+)-cerI可成功地在大肠杆菌中表达cerI蛋白。

脂肪酸组分分析在不动杆菌鉴定中的应用

张晓霞;王直强;李世贵;顾金刚;姜瑞波;

2009, 0(06): 151-154.

摘要 ( 103 )

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以不动杆菌属(Acinetobacter)中的A.baumannii、A.haemolyticus、A.johnsonii、A.junii、A.lwoffii模式菌株为参比菌株,对中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)所保藏的6株不动杆菌进行脂肪酸组分分析及16S rRNA基因系统进化分析。结果表明,利用脂肪酸分析可将6株菌完全准确地鉴定到属的水平上,这一点与16S rRNA基因分析结果一致;在种的水平上,16S rRNA基因进化分析与脂肪酸组分分析的结果可互为补充,相互印证。同时,通过对不动杆菌部分模式菌株及供试菌株的脂肪酸组分分析,报道了不动杆菌的特征性脂肪酸为C18:1 w9c、C16:00和C16:1w7c/C16:1w6c。

乌拉尔甘草内生真菌拮抗菌株的筛选和鉴定

王丽;刘磊;韩素贞;

2009, 0(06): 155-158.

摘要 ( 98 )

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从乌拉尔甘草样品的根、茎中共分离出54株内生真菌,统计发现从根中分离得到的内生真菌的种类比茎中多。抑菌实验共得到20株活性菌株,其中编号为dG9-1的菌株对多种病原菌有抗菌活性。通过进一步对其培养特征,显微形态特征观察以及ITS序列测定和系统发育树构建与分析,发现该菌与灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)的亲缘关系最接近,相似性为99.46%。

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