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2009年 第0卷 第02期 刊出日期:2009-02-26
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论文
植物病毒沉默抑制因子研究进展
王法军;梁越;张飞云;
2009, 0(02): 1-5.
摘要
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计量指标
RNA沉默是广泛存在于真菌﹑动物和植物中的一种特异序列降解机制。在植物中,RNA沉默是一种抵抗外界植物病毒入侵的自然机制。但是,植物病毒通常也会采取编码沉默抑制因子的相应机制来抵抗基因沉默,以便能够入侵植物。论述了主要沉默抑制因子的机制﹑特点和相关确认沉默抑制因子实验,并对沉默抑制因子的研究前景进行了展望。
植物遗传转化中选择标记基因的研究进展
王彩芬;
2009, 0(02): 6-10.
摘要
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152
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计量指标
标记基因在为植物遗传转化提供方便的同时也存在一些问题,综述了植物遗传转化中常用的选择标记基因、标记基因存在的问题以及解决选择标记基因安全性的策略。
植物抗旱机理及相关基因研究进展
徐云刚;詹亚光;
2009, 0(02): 11-17.
摘要
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188
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计量指标
提高植物的抗旱能力已经成为现代植物研究工作中的关键问题之一。近年来,随着分子生物学的应用与发展,该领域的研究也已引起国内外学者广泛的兴趣和重视,在抗旱机理研究及相关基因克隆及表达调控方面已取得可喜进展。对植物抗旱机理及相关基因研究进展做了详细的综述,并对以后植物抗旱的研究做了展望。
植物单价阳离子:质子逆向转运蛋白-1基因家族研究进展
王宁宁;
2009, 0(02): 18-21.
摘要
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118
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445
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计量指标
植物的单价阳离子:质子逆向转运蛋白-1(CAP1)基因家族是一类在盐胁迫中起重要作用的基因,分为液泡膜单价阳离子:质子逆向转运蛋白和质膜单价阳离子:质子逆向转运蛋白两大类,在植物的发育和生长过程中起到很重要的作用。不同的成员在植物中的表达特性不同。主要综述了此类基因的结构、启动子活性、表达情况及其主要功能。
抗菌肽在转基因动植物中的研究进展
张鑫;苗向阳;尹逊河;马艳芳;曲朝杰;张秋婷;
2009, 0(02): 22-25.
摘要
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130
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计量指标
抗菌肽是一类广泛存在于生物界的小分子短肽,具有广谱的抗菌、抗病毒、抗寄生虫及抗癌等生物活性。将抗菌肽基因转入动、植物体内,不仅可以提高动、植物的抗病能力,而且有望通过转基因动、植物来大量生产抗菌肽,具有重要的研究价值和广阔的应用前景。就抗菌肽的特性、抗菌机理及其在转基因动、植物中的研究做一简要的综述。
转基因大豆及其制品的安全性研究现状
叶增民;潘婕;
2009, 0(02): 26-28.
摘要
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计量指标
我国进口转基因大豆激增,转基因大豆及其制品的安全性越来越引起人们的关注。概述了转基因大豆的研究及其生产现状,分析了转基因大豆及制品存在的安全性问题,并对转基因大豆及其制品的安全性给出一定的评价。
寄生虫热激蛋白的研究进展
颜彦;韩红玉;黄兵;
2009, 0(02): 29-33.
摘要
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141
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计量指标
热激蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是所有原核生物和真核生物在发育过程中,或为适应不同环境中合成的一组起关键作用的蛋白质家族。为全面了解寄生虫热激蛋白的研究情况,介绍了热激蛋白的发现、功能、分类及寄生虫(原虫、线虫、吸虫)热激蛋白(HSP70,HSP90,HSP60,sHSP)的研究进展,并对寄生虫热激蛋白的研究意义作了探讨。
绿色荧光蛋白在微生物根际定殖研究中的应用
李世贵;吕天晓;顾金刚;姜瑞波;牛永春;
2009, 0(02): 34-37.
摘要
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135
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计量指标
农业有益微生物根际定殖能力的强弱决定着其应用效果的好坏,而作为荧光标记分子的GFP被认为是当前用于分子生态学研究中最理想的报告基因,成为近年来研究微生物根际定殖的热点方法。简要介绍GFP的一些特性及其在微生物根际定殖研究中的应用与前景展望。
一种新型基因载体——SucPG络合物的研究进展
张书民;乔卫红;刘栋良;
2009, 0(02): 38-42.
摘要
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98
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计量指标
简要介绍了一种新型基因载体——SucPG络合物的研究进展,它由连有转铁蛋白的SucPG(琥珀酰多聚甘油)修饰的脂质体与lipoplex络合形成,具有较高的转染活性,抗血清性和毒性低等一系列的优点。
茉莉酸类化合物及其信号通路研究进展
杨东歌;张晓东;
2009, 0(02): 43-49.
摘要
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237
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计量指标
茉莉酸类化合物包括茉莉酸及其衍生物,是一类基本的植物激素,其结构上类似于后生动物的前列腺素,作为信号分子在植物的生长发育和胁迫信号响应过程中具有重要的作用。茉莉酸类化合物信号通路包括茉莉酸类化合物的生物合成以及茉莉酸信号的转导,JAZ蛋白是茉莉酸信号转导通路中的一个重要因子,JAZ蛋白的发现为茉莉酸信号转导分子机制的详细阐述铺平道路。简要介绍了茉莉酸类化合物在植物中的作用,重点介绍了其信号转导通路的研究进展。
纳米级金微粒在DNA生物传感器研究中的应用
鲁卫平;周元国;
2009, 0(02): 50-53.
摘要
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126
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计量指标
纳米金颗粒具有独特的物理、化学性质和良好的生物兼容性,已广泛应用于生命科学研究中的示踪技术。将该技术与DNA传感器相结合,可显着提高生物传感器的灵敏度,缩短检测时间和提高检测通量,已成为近年来的研究重点。
微生物源抗植物病毒物质及其抗病毒机理的研究进展
于银霞;张飞云;田兆丰;刘伟成;
2009, 0(02): 54-58.
摘要
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166
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计量指标
微生物代谢产生的有抗病毒作用的活性物质,具有内吸活性强、安全高效的优点。目前从微生物资源中筛选并获得抗植物病毒物质已经成为研究的热点,对微生物抗病毒物质的分离提取和抗病机理方面的研究已经取得了一定的进展。对来源于不同种类微生物的抗病毒活性物质,以及抗病机理作了论述,并对微生物源抗植物病毒物质研究进行了展望。
微生物法高产辅酶Q_(10)的研究进展
李焱生;方建军;钟卫鸿;
2009, 0(02): 59-62.
摘要
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计量指标
辅酶Q10是呼吸链上的一种电子传递体,具有抗氧化功能。微生物法生产辅酶Q10具有产物活性高、原料成本低并可以通过规模放大提高生产能力等优点。综述了微生物法生产辅酶Q10的生产菌种,以及能够提高辅酶Q10产量的各种不同的方法策略。
生物技术知识产权的类型及其应用
张玲;杨海麟;王武;
2009, 0(02): 63-67.
摘要
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计量指标
全面地综述了各种类型的生物技术知识产权,包括专利、着作权、商标、技术秘密和技术标准等,以及与生物技术密切相关的行业性知识产权,如植物保护品种、新药保护等;同时对不同类型、特点、用途的知识产权进行了比较,期望对医药、工业、农业等生物技术研发机构合理地应用各种知识产权有帮助。
分子生物学技术在生物修复中的应用研究进展
许科伟;周青;
2009, 0(02): 68-72.
摘要
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139
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计量指标
随着分子生物学技术如分子杂交、PCR、电泳技术等的发展,微生物学研究领域发生了深刻的变革,灵敏的检测和精确的细菌鉴定成为可能。微生物分子生态学作为分子生物学与微生物生态学交叉而形成的学科,在生物修复方面得到广泛应用。从分子生物学实验技术角度综述了各种微生物分子生物学技术在生物修复中的应用研究情况。
荧光定量PCR技术及其在科研中的应用
朱捷;杨成君;王军;
2009, 0(02): 73-76.
摘要
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荧光定量PCR技术是一种新型的核酸定量技术,与常规的PCR相比,荧光定量PCR具有检测灵敏,精确,特异性强,无污染,快速等特点。目前该技术已广泛应用于不同研究的多个领域。主要从荧光定量PCR的基本原理,主要类型和检测应用进行了综述。
芽孢杆菌β-甘露聚糖酶基因的克隆及表达
马鑫;赵仲麟;李亮;陈明;林敏;平淑珍;
2009, 0(02): 77-81.
摘要
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计量指标
从新疆极端干燥环境土壤样品中筛选到具有高β-甘露聚糖酶活性的芽孢杆菌(Bacillussp.MX)。运用PCR技术从该菌基因组中克隆得到β-甘露聚糖酶基因,连接到表达载体pET-28a上,在大肠杆菌BL21中高效表达的基因产物经亲和层析纯化,SDS-PAGE凝胶电泳分析显示该蛋白的相对分子质量为41kD。酶学性质分析表明该酶在25~95℃,pH3.0~9.6范围内均具有酶活。最适作用温度55℃和pH值5.0,酶比活力为4572U/mg。在最适pH5.0,高温85℃和95℃分别处理10min后,该酶相对酶活力仍保持51%和34%,显示β-甘露聚糖酶具有较好的耐酸性和热稳定性。
华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究
李飏;王栋;徐岩;
2009, 0(02): 82-86.
摘要
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109
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计量指标
以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白。经SDS-PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43kD和33kD。两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链脂肪酸酯底物特异性较高。MRCL上述性质与野生型RCL基本一致。研究结果表明,通过条件控制可以利用E.coli表达系统表达具有活性的华根霉前导肽脂肪酶ProRCL和成熟肽脂肪酶MRCL。与米根霉脂肪酶(ROL)不同,前导序列对华根霉脂肪酶的主要酶学特性没有显着影响。
一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法
刘明坤;刘昌财;许志茹;魏志刚;阎秀峰;刘关君;
2009, 0(02): 87-92.
摘要
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143
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计量指标
通过对几种常用植物表达载体的35S和Tnos序列进行比对,设计带有酶切位点的引物35S和Tnos,通过PCR克隆了同时带有35S和Tnos序列的目的基因片段,通过定向的酶切、连接获得双价表达载体。此方法简化了植物双价表达载体构建过程,具有明显时间短、效率高、不需要中间载体、检测简单等特点,而且引物对于多数常用35S组成型植物表达载体是通用的,为快速构建35S组成型植物双价表达载体提供了一种新方法。
王不留行中抗人微血管内皮细胞增殖的有效组分的分离和纯化
夏明星;冯磊;张莲芬;李英;储敏;金坚;
2009, 0(02): 93-97.
摘要
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121
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计量指标
从中药王不留行中筛选具有抑制内皮细胞增殖的有效单一组分。大孔树脂吸附法进行总皂甙的分离纯化,分别收集不同浓度乙醇溶液洗脱液用SRB法进行细胞活性检测,选择有效部分用AKTA Resource柱分离,按紫外吸收峰收集洗脱液并进行活性验证,通过蒸发光散射检测组分复杂程度,选择活性高、丰度大、成份简单的峰进行C18柱分离。结果表明,王不留行提取液经大孔树脂分离和细胞活性检测发现50%~90%乙醇浓度洗脱液具有细胞活性,经AKTA Resource柱分离得7种组份群(0~6),细胞活性测得3~6号组分有活性,选择4号组分过C18柱得5组分(A~E),B组分为有紫外吸收的主峰,但无细胞活性,其活性分布于D和E组分中,其IC50值为3.75μg/ml,D组分经蒸发光散射检测为单峰。经上述方法分离纯化获得抑制人微血管内皮细胞增殖的单一组分群,其单一化合物具有潜在的利用价值。
条斑紫菜藻胆蛋白提纯方法优化探索
蔡春尔;周铭;李春霞;柳俊秀;汪卿;何培民;
2009, 0(02): 98-102.
摘要
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121
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计量指标
采用溶胀法与组织捣碎法相结合的紫菜叶状体细胞破碎方法,研究了不同物液比、缓冲液浸泡时间和硫酸氨盐析次数对藻胆蛋白纯度和产率的影响,对比了各种羟基磷灰石的层析效果,并对所得藻红蛋白和藻蓝蛋白做了吸收光谱、荧光发射光谱和SDS-PAGE鉴定。结果表明,在物液比为1∶5,浸泡时间为36h时,紫菜综合破碎效果最佳;经过4次硫酸氨盐析后,藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到1.71和0.98,采用Siegelman的方法制备的羟基磷灰石一次层析所得藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到4.73和4.42,产率分别为0.144%和0.042%,且光谱和电泳鉴定结果均达到商品化要求。
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的原核表达与生物学活性分析
李任峰;田香勤;何启盖;王三虎;郑玉姝;胡建和;赵坤;
2009, 0(02): 103-106.
摘要
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计量指标
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型菌株基因组为模板,根据其鞭毛区与其它细菌高度同源性设计引物,利用PCR方法扩增鞭毛蛋白基因flic片段,将其亚克隆到pMD-18T载体中并进行PCR和酶切鉴定,再将其亚克隆与载体pGEX-kG分别双酶切和连接,构建重组表达载体pGEX-flic,并将其转化大肠杆菌工程菌BL21进行原核表达。结果表明,目的基因片段长度为528bp,在大肠杆菌BL21中获得成功表达,且表达蛋白能与猪抗APP血清发生反应。为进一步研究细菌鞭毛的抗原性及其他功能提供参考。
斑马鱼干扰素基因工程菌发酵条件及稳定性研究
梁晶晶;陆开宏;凌红丽;王宏华;
2009, 0(02): 107-111.
摘要
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115
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计量指标
采用液体传代的方法,研究表达斑马鱼干扰素(IFN)工程菌株pRSET-B-zIFN的遗传稳定性,并对其发酵工艺进行了优化。结果表明,构建的工程菌株遗传稳定性良好,在没有选择压力的情况下,传代100次质粒稳定性仍然保持100%,菌落形态及生长情况与原代菌无明显区别,SDS-PAGE结果显示zIFN表达量无明显差异。发酵条件研究表明,工程菌在LB培养基中,接种量为1%,诱导剂终浓度为0.1mmol/L,zIFN的表达量最高。
鳙的线粒体基因组核苷酸全序列分析(英文)
杨琴玲;李思发;徐嘉伟;陈琴;王成辉;
2009, 0(02): 112-117.
摘要
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111
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计量指标
对采集自我国长江的鳙的线粒体DNA全序列进行了测定。结果表明,鳙的线粒体DNA全长为166221bp,其碱基因组成为A=31.6%;C=27.1%;G=16.0%;T=25.3%,A+T含量为56.9%。鳙线粒体基因组的排列、结构和组成与其它鲤科鱼类相似,包括37个基因,即13个蛋白质编码基因,2个rRNA基因,22个tRNA基因和一个非编码控制区(D-loop)。在13个蛋白编码基因中,除ND6由轻链编码外,其余12个基因均由重链编码。COI基因的起始密码子为GTG,而其它12个蛋白编码基因的起始密码子均为ATG。
SSR不对称PCR法分析虾夷扇贝遗传多样性
高祥刚;曹洁;刘莹;刘卫东;傅立元;鲍相渤;赫崇波;
2009, 0(02): 118-123.
摘要
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98
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计量指标
采用微卫星引物的不对称扩增法(即不对称PCR-SSR方法),得到了较为准确的微卫星,运用8对微卫星标记对取自日本青森县的自然群体(QSX)、俄罗斯海参崴自然生群体(HSW)和大连旅顺口的自然群体(LSK)及大连的广鹿岛(GLD)、獐子岛(ZZD)、小长山(XCS)和凌水桥(LSQ)养殖群体进行遗传多样性分析。平均观察杂合度(Ho)和期望杂合度(He)分别为0.51563~0.64583和0.67575~0.74535,其中QSX群体的平均杂合度最高,HSW群体的最低,各群体间的差异不显着,说明中国的扇贝的群体遗传多样性仍然处于一个很高的水平,种质资源较丰富。并对常规PCR和不对称PCR方法扩增微卫星的优缺点进行了探讨。
黄泥螺提取物对小鼠黑色素瘤细胞B16生长的影响
朱佳;许学书;金坚;谢静莉;
2009, 0(02): 124-128.
摘要
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计量指标
为研究黄泥螺提取物对小鼠黑色素瘤细胞B16生长的影响,以及初步研究其作用机制,采用磺酰罗丹明B(SRB)法测黄泥螺提取物对B16细胞的生长抑制作用,得到48h后半数抑制浓度(IC50)为68.56μg/ml。当黄泥螺提取物浓度为70μg/ml时,台盼蓝排斥试验显示有部分细胞死亡。经Hoechest 33258染色并用荧光显微镜观察,发现培养的细胞中出现凋亡小体,细胞核发生固缩;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现出DNA大片段;用流式细胞仪进一步检测表明,细胞生长周期发生变化并检测到凋亡峰。结果表明,体外培养的B16细胞经过黄泥螺提取物处理后,B16细胞增殖受到抑制,细胞周期被阻滞,B16细胞受到诱导后存在凋亡。因此,黄泥螺提取物对小鼠黑色素瘤细胞B16生长有明显的影响。
发酵虫草菌质与天然虫草主要活性成分含量比较研究
游明乐;
2009, 0(02): 129-131.
摘要
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用大米作为固体发酵基质,通过蛹虫草菌种发酵后制成虫草菌质,测定菌质中腺苷、虫草素、多糖等成分含量。比较人工发酵虫草菌质与天然虫草腺苷、虫草素、多糖等主要活性成分的含量。结果表明,虫草菌质中虫草素、多糖含量分别超过天然虫草的40倍和3倍。因此,人工发酵虫草菌质可以替代天然虫草应用。
欢迎订阅2009年《生物技术通报》
2009, 0(02): 131-131.
摘要
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<正>《生物技术通报》(月刊)创刊于1985年,是我国生物技术领域的国家级综合性科技期刊和中文核心期刊、中国农业核心期刊以及中国核心期刊遴选数据库来源期刊、中国学术期刊综合评价数据库来源期刊、中国科学引文数据库来源期刊等。
布洛芬对肝癌细胞HepG2增殖及wnt/β-catenin信号通路的影响
马骏飞;赵迎泽;李青岭;吴明军;冯涛;
2009, 0(02): 132-137.
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研究非甾类抗炎药布洛芬对肝癌细胞增殖和β-catenin信号通路的影响,探讨布洛芬影响肝癌细胞增殖的可能机制。体外培养HepG2细胞,MTT法检测不同浓度布洛芬分别作用24、48和96h后细胞增殖情况;应用RT-PCR检测布洛芬处理HepG248h后β-catenin、cyclinD1和c-myc转录水平的变化;western blotting检测布洛芬对HepG2中β-catenin1蛋白表达量的影响;免疫细胞化学法观察布洛芬处理组HepG2细胞β-catenin的亚细胞定位。结果表明0.7mmol/L的布洛芬处理细胞48h后能明显见到细胞增殖受到抑制,抑制率达到53.8%,且抑制作用有时间、剂量依赖性;经布洛芬处理后细胞的β-catenin、cyclinD1和c-myc转录也受到显着抑制;布洛芬处理组细胞β-catenin蛋白表达低于对照组;布洛芬处理后β-catenin在胞核中定位减少,胞浆定位增多。因此,布洛芬能抑制肝癌细胞的增殖,且随着处理时间和药物浓度的增加,其抑制作用逐渐增强,其抑制作用可能与调控β-catenin信号通路,影响β-catenin的表达和定位,调节下游相关靶基因的转录有关。
氨苄青霉素人工抗原的制备及抗体特性鉴定
张海棠;李桂平;季跃光;王自良;
2009, 0(02): 138-141.
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根据氨苄青霉素(AMP)分子结构上存在的化学活性基团羧基,用碳化二亚胺法(EDC)将AMP偶联于载体蛋白BSA,合成人工抗原BSA-AMP,用紫外扫描(UV)和SDS-PAGE进行鉴定,推算分子结合比;用BSA-AMP免疫新西兰白兔,间接ELISA测定多抗血清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-AMP偶联成功,分子结合比为1∶17.6,获得了高效价、敏感、特异的AMPpAb,为AMP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。
《生物技术通报》稿约
2009, 0(02): 142-142.
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<正>《生物技术通报》系中国农业科学院农业信息研究所与生物技术研究所及中国农学会高新技术农业应用专业委员会共同主办的国家级综合性科技刊物。2008年入选中文核心期刊,2006年首批进入中国农业核心期刊。主要