生物技术通报

滕海涛;吕波;赵久然;徐岩;王凤格;堵苑苑;杨坤;唐浩;李祥羽;

2009, 0(01): 1-6.

摘要 ( 173 )

PDF (320KB) ( 1137 )

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随着分子生物学技术的发展,植物品种分子指纹图谱的建设逐渐成为当前的重要应用领域。综述了DNA指纹数据库建设及辅助植物新品种保护DUS测试进展,综合分析了DNA指纹图谱和分子标记应用于植物新品种保护的优越性和存在的问题,以便更好地服务于新品种DUS测试工作。

《临床合理用药杂志》征稿启事

2009, 0(01): 6-6.

摘要 ( 99 )

相关文章 | 计量指标

<正>《临床合理用药杂志》是由国家新闻出版总署批准新创办的(2008年9月创刊)综合性医药卫生类学术期刊,本刊由河北省科技协会主管、主办。中国标准连续出版物号:ISSN1674-3296,CN13-1389/R;国内邮发

钙依赖的蛋白激酶与植物抗逆性

万丙良;查中萍;戚华雄;

2009, 0(01): 7-10.

摘要 ( 121 )

PDF (185KB) ( 610 )

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植物钙依赖的蛋白激酶(Calcium-dependent protein kinases,CDPKs)是细胞Ca2+信号的受体,同时具有Ca2+受体蛋白和Ser/Thr蛋白激酶的功能。许多植物CDPKs基因受环境胁迫刺激发生表达水平的改变,这些基因在植物逆境胁迫的Ca2+信号转导中起着十分重要的作用,为植物CDPKs抗逆功能的研究和植物的抗逆遗传改良提供了理论基础和基因资源。

小麦赤霉病镰孢菌毒素的生物合成及其分子调控

张鹏;马鸿翔;

2009, 0(01): 11-15.

摘要 ( 123 )

PDF (301KB) ( 601 )

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禾谷镰刀菌是小麦赤霉病的主要致病菌,其真菌次生代谢产生的单端孢霉烯类B型毒素,如雪腐镰刀菌烯醇(nivalenol,NIV)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和其它乙酰化衍生物等污染小麦籽粒后对人畜健康构成威胁。综述了近年来国内外对小麦赤霉病镰孢菌单端孢霉烯类B型毒素生物合成的主要途径及分子调控研究进展,对毒素合成过程中的重要调控基因如TRI5、TRI7和TRI13在农业中的应用进行了阐述。

发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究

杨慧洁;杨世海;

2009, 0(01): 16-21.

摘要 ( 174 )

PDF (220KB) ( 731 )

相关文章 | 计量指标

利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)诱导药用植物产生的毛状根具有生长迅速,合成能力强和遗传性稳定等优点,已成为一种新的培养系统。就影响发根农杆菌介导的药用植物遗传转化的因素作一概述。

甘蔗花叶病的基因工程研究

王文治;马滋蔓;张树珍;杨本鹏;蔡文伟;顾丽红;李娇;

2009, 0(01): 22-26.

摘要 ( 132 )

PDF (246KB) ( 541 )

相关文章 | 计量指标

甘蔗花叶病(Sugarcane mosaic disease)是世界上重要的病毒病害之一,严重的影响了世界甘蔗的产量。对甘蔗花叶病病原菌分类、病原系统侵染的过程、相关致病机理、病原菌检测手段以及抗甘蔗花叶病基因工程的研究现状与前景进行了综述。

天然抗菌肽的研究进展及应用前景

吴甜甜;杨洁;

2009, 0(01): 27-30.

摘要 ( 239 )

PDF (171KB) ( 1523 )

相关文章 | 计量指标

天然抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有抗菌活性的小分子多肽,来源广泛。目前已从多种物种中分离纯化出千余种抗菌肽,其分子量大约在3～6kD之间,由20～60个氨基酸残基组成。天然抗菌肽具有多种生物活性,如抗细菌、抗真菌、抗病毒和抗癌细胞等作用。综述了天然抗菌肽的分类、生物活性及其作用机理和应用前景。

谷氨酰胺转氨酶研究进展

崔艳华;张兰威;

2009, 0(01): 31-36.

摘要 ( 274 )

PDF (457KB) ( 1076 )

相关文章 | 计量指标

谷氨酰胺转氨酶是一种催化酰基转移反应的转移酶,它可使蛋白分子间和分子内产生共价交联,从而改变蛋白的功能特性,在食品、医药、化妆品、纺织等领域具有重要的潜在应用价值。研究表明,谷氨酰胺转氨酶广泛存在于生物组织中。为了更好的研究开发这一资源,对谷氨酰胺转氨酶的来源、理化特性、作用机制、功能以及工业生产的现状进行了综述,其中重点探讨了不同来源的谷氨酰胺转氨酶在理化特性以及底物特异性方面的差异。

人类癌组织中端粒酶活性与p16基因表达的相关性

郭霏;杨秀萍;

2009, 0(01): 37-39.

摘要 ( 130 )

PDF (183KB) ( 334 )

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端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的RNA酶,依其自身序列逆转录合成端粒序列并添加到染色体末端,以保证细胞分裂的稳定性。近年来的研究已证实端粒酶的激活是许多恶性肿瘤发生的先决条件。p16基因作为一种重要的抑癌基因,其编码产物P16蛋白可通过p16-cyclinD/CDK-pRB途径调控细胞周期。在多种肿瘤中均出现p16基因表达异常,其表达缺失与人类肿瘤的发生发展关系密切。就端粒酶活性与p16基因表达在人类癌组织中的相关性及其可能作用机制进行总结分析。

哺乳动物的性别决定相关基因的作用机理

江玲霞;李纪委;李美丽;方威;李贵强;徐银学;

2009, 0(01): 40-44.

摘要 ( 181 )

PDF (237KB) ( 1008 )

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哺乳动物的性别决定是以Sry基因为主导,其它多个基因参与的级联调控的机制。近年来的研究表明,Sry、Sox9、Wt1、Sf1、Amh、Dax1、Dmrt1、Wnt4等基因都参与性别决定的级联过程。哺育动物性别决定相关基因的研究,对性分化与生殖发育过程的了解具有十分重要的意义。主要论述了参与哺乳动物性别决定与调控的相关基因、可能作用机制及其研究进展等。

鱼类基因内含子研究进展

宋文涛;赫崇波;高祥刚;刘星;耿惠君;

2009, 0(01): 45-49.

摘要 ( 134 )

PDF (324KB) ( 1029 )

相关文章 | 计量指标

内含子是指断裂基因中的非编码区序列,在编码蛋白质前被去除。在高等生物中,内含子的长度远大于外显子,大部分随机突变会发生在内含子中。因此,内含子的存在使高等生物对突变的耐受能力大大增强了。研究表明,内含子可以提高基因表达效率;影响RNA的转录、剪接加工、出核孔以及翻译等过程;启动某些基因的表达;并通过选择性剪接调控基因的表达。内含子功能的研究成果给当前鱼类免疫基因研究开拓了全新的视野。对内含子的分类、剪接、功能以及鱼类内含子研究的新进展进行了综述,并展望了内含子在鱼类免疫基因研究中的应用。

蛋白质相互作用的研究方法

陈谋通;刘建军;

2009, 0(01): 50-54.

摘要 ( 266 )

PDF (280KB) ( 3023 )

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随着基因组测序工程数量的增加,未知功能蛋白质测序工作也呈现指数式增长。生物学进程主要是由蛋白质执行和控制的,因此,阐明未知或已知蛋白质的生物学功能和从细胞水平上确定细胞机制,已成为蛋白质组学研究的主要目标。目前,随着酵母[1]、果蝇[2]、线虫[3]相互作用图谱的相继完成,蛋白质相互作用研究方法也不断发展和完善。综述了当前研究蛋白质相互作用的主要技术方法,包括酵母双杂交技术,GSTpull-down技术,免疫共沉淀技术和串联亲和纯化技术等多种研究方法,分析了各种技术方法的优缺点以及各种方法的改进,在试验中可根据不同的要求和目的选择适宜的方法。

~(18)O内标质谱法比较定量蛋白质组学计量的数学算法

齐孟文;

2009, 0(01): 55-58.

摘要 ( 129 )

PDF (182KB) ( 768 )

相关文章 | 计量指标

18O内标蛋白质质谱定量分析是一种极具前景的比较蛋白组学研究技术,虽然该方法与迄今所有内标法相比有一系列优点,但是由于其质谱是由16O未标记品种,单及双18O标记品种分子同位素峰簇相互迭加所构成的复杂谱,定量分析的关键是发展有效的质谱解析算法。有鉴于此,综述和讨论了18O内标质谱差异比较蛋白质分析过程中,分子同位素簇分布的简化计算方法,以及质谱混和谱解析的数学方法。

双向凝胶电泳技术及其应用

冯海燕;景志忠;房永祥;莫斯科;

2009, 0(01): 59-63.

摘要 ( 174 )

PDF (230KB) ( 2013 )

相关文章 | 计量指标

介绍了双向电泳的基本原理、操作过程及其在动植物和医学中的应用。同时对当前双向电泳技术面临的挑战和发展前景进行了介绍。

转基因技术在玉米遗传育种中的应用

张英;穆楠;朴红梅;

2009, 0(01): 64-68.

摘要 ( 292 )

PDF (186KB) ( 988 )

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玉米转基因育种是通过基因转移方法创造玉米新种质或新品种。将转基因技术与玉米常规育种技术相结合,能尽快地培育出符合育种目标的新品种,带来了育种水平的提高、创新和突破,加快了玉米育种进程。论述了转基因技术在玉米育种中的主要应用方法、研究进展及应用现状。随着转基因技术的飞速发展及其研究的日趋成熟,转基因技术在拓宽玉米种质资源、提高杂交种的抗逆性、抗病虫性、提高产量和品质等方面将发挥更大的作用,应用前景广阔。

单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用

李永亮;杨苏珍;田美娜;卢曾军;刘在新;

2009, 0(01): 69-71.

摘要 ( 125 )

PDF (169KB) ( 781 )

相关文章 | 计量指标

着重阐述了单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用现状,单克隆抗体在病毒抗原结构与抗原表位研究、以及在畜禽病毒性传染病诊断和抗病毒治疗方面的应用,对当前单克隆抗体研究所面临的一些问题和研究方向做了分析。

外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响

蔡振荣;易小萍;张元兴;

2009, 0(01): 72-75.

摘要 ( 126 )

PDF (245KB) ( 466 )

相关文章 | 计量指标

在前期的研究工作中发现,当培养基中添加1.5%DMSO(二甲基亚砜)会使CHO细胞的HBsAg(乙肝表面抗原)产量提高80%以上。与此同时,DMSO引起了HBsAg在细胞胞内的大量积累,其含量提高了8倍。同时,DMSO引起了CHO细胞中PDI(二硫键异构酶)含量降低。由此怀疑是由于PDI不足造成了HBsAg的胞内积累。根据NCBI上查阅到的中华仓鼠小肠中PDI基因序列,通过RT-PCR的方法,从CHO细胞中获得了PDI序列,并构建重组质粒pGFP-PDI。通过阳离子脂质体转染技术,导入外源PDI,使各单克隆CHO细胞的PDI酶活提高30%～90%。但分析这些克隆在1.5%DMSO下HBsAg的胞内积累情况,发现没有改善,从而排除了PDI不足而引起外源蛋白积累的可能。

基于序列分析的天蚕素A串连融合表达载体的构建

杨细媚;文阳安;万祥辉;涂植光;

2009, 0(01): 76-79.

摘要 ( 170 )

PDF (421KB) ( 414 )

相关文章 | 计量指标

天蚕素A(Cecropin A,CA)是来源于惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的含有37个氨基酸的抗菌肽,在非极性环境中形成α螺旋型结构,具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点。为降低天蚕素A对宿主的毒性及提高其表达丰度和稳定性,在序列分析的基础上设计了3条天蚕素A氨基酸序列,分别为CA19、CA36和CA210。根据大肠杆菌密码子的偏爱性分别合成相应的3对寡核苷酸链,并通过重叠PCR方法合成成熟肽CA。将含有CA19、CA36、CA210和CA1～5个拷贝基因的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和BLR(DE3)PlysS,成功构建了串连融合表达载体,为下一步的抗菌活性及免疫表位的分析打下基础。

轮状病毒VP7基因的克隆及其植物表达载体的构建

柴晓杰;靳非;王宇航;王晓庆;

2009, 0(01): 80-82.

摘要 ( 109 )

PDF (178KB) ( 334 )

相关文章 | 计量指标

应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了轮状病毒VP7基因,并将其克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了DNA全序列。结果表明,克隆片段全长为981bp。将轮状病毒VP7基因定向的克隆到植物表达载体pBI121启动子下游,构建了植物表达载体。

携带PTEN基因的重组腺病毒表达载体构建的研究

韦永琼;曾照芳;

2009, 0(01): 83-86.

摘要 ( 145 )

PDF (393KB) ( 459 )

相关文章 | 计量指标

构建携带抑癌基因PTEN(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)的重组腺病毒表达载体,为研究PTEN的功能和作用机制奠定基础。采用RT-PCR法从大鼠海马神经元扩增目的基因PTEN,克隆人含绿色荧光蛋白(Green fluorescence protein),GFP基因的pAdTrack-CMV穿梭质粒,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌内进行同源重组;获得重组腺病毒质粒,经PacI线性化后,转染AD293细胞。结果表明,感染腺病毒载体的AD293细胞表达GFP基因,随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),经PCR对传代的Ad-PTEN分析证实得到目的基因。成功构建了携带PTEN基因的腺病毒表达载体,为研究PTEN的功能和作用机制奠定了基础。

运动发酵单孢菌ZM4 adhⅡ基因的克隆及在大肠杆菌TOP10中的表达

谭力;陈介南;张伟涛;王义强;何钢;

2009, 0(01): 87-90.

摘要 ( 136 )

PDF (643KB) ( 390 )

相关文章 | 计量指标

利用高保真聚合酶从运动发酵单胞菌中克隆出乙醇脱氢酶基因,加A后克隆到pGM-T载体,测序验证无误。经酶切、酶连到表达载体pUC-18。形成重组质粒pUC-18-adhⅡ,转化到大肠杆菌TOP10中,经定性定量分析乙醇脱氢酶酶基因在大肠杆菌中高效表达,成功构建出乙醇脱氢酶基因的表达载体。

种子特异性表达噬夏孢欧文氏菌crtB基因的植物表达载体构建

刘慧娟;郎君;冯志国;何光源;

2009, 0(01): 91-94.

摘要 ( 107 )

PDF (553KB) ( 388 )

相关文章 | 计量指标

利用PCR技术扩增出tp和crtB基因,胶回收后分别连接到pMD18-T载体测序。tp和crtB基因经酶切回收后通过pBlue-scriptKS质粒连在一起构建成pSK-tp-crtB,通过BamHⅠ和SacⅠ酶切,从pSK-tp-crtB载体上切下目的基因片段tp-crtB,替换pBI121-napA载体中的GFP基因,构建了tp-crtB基因在植物种子中特异性表达的载体pBI121-tp-crtB。转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α。测序鉴定后将阳性质粒转化农杆菌感受态细胞EHA105,经菌液和质粒PCR分析,获得了真核表达载体pBI121-tp-crtB,为crtB基因功能的进一步研究奠定基础。

杂交水稻种子固有细菌群落多样性探究

刘琳;刘洋;宋未;

2009, 0(01): 95-99.

摘要 ( 120 )

PDF (522KB) ( 478 )

相关文章 | 计量指标

采用传统的分离培养方法和分子生物学技术对我国高产杂交水稻(OryzasativaL.)金优611种子固有细菌进行研究,从而了解其中可培养细菌群落的多样性。对分离得到的91株细菌进行16SrDNA扩增、ARDRA分型和16SrDNA系统发育分析,结果表明,分离得到的91株细菌分属于10个属16个种。其中γ-变形杆菌(Gammaproteobacteria)(53.85%)占据优势地位,其次为α-变形杆菌(Alphaproteobacteria)(20.88%),其它分属放线菌门Actinobacteria(15.39%)及厚壁菌门Firmicutes(9.88%)。其中的泛菌属(Pantoea sp.)和鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、微杆菌属(Microbacterium sp.)为分离到的优势种群,且在种子这一特殊的生存空间中有4株潜在的新种存在。首次报道了杂交水稻金优611种子具有丰富的微生物群落多样性,为进一步探索植物种子际微生态环境中微生物群落的形成和生态功能提供了基础信息。

烟草T-phylloplanin基因编码蛋白结构与功能的生物信息分析

蔡刘体;胡重怡;叶定勇;郑少青;

2009, 0(01): 100-102.

摘要 ( 150 )

PDF (250KB) ( 556 )

相关文章 | 计量指标

利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站所提供的相关信息,分析T-phylloplanin基因编码蛋白。该基因全长861hp,有一个完整的330hp的开放读框,编码110个氨基酸。该基因编码蛋白分子量为11.31kD,理论等电点为7.74。其氨基酸残基的不同区域分布有多N-糖基化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-肉豆蔻酰化位点,还有一个跨膜信号肽。T-phylloplanin基因编码蛋白与烟草叶片短柄腺毛分泌的抗性蛋白具有高度的同源性(93%),显示它在烟草抗性系统研究中有潜在价值。

BF、DRB、DQB、TAP1和IFN-γ基因作为猪抗病育种分子标记的可行性初步分析

陈慧勇;吴珍芳;

2009, 0(01): 103-106.

摘要 ( 145 )

PDF (395KB) ( 401 )

相关文章 | 计量指标

疾病的抗性具有一定的遗传差异背景,而免疫学和分子生物学等相关学科技术的发展及社会对猪肉产品质量和动物福利等问题的日益关注,赋予了开展猪抗病育种尤其是分子标记辅助选择研究的必要性。选择了补体B因子基因(BF)、2个MHCⅡ类基因(DRB和DQB)、1个抗原加工递呈相关基因(TAP1)和1个Ⅱ型干扰素基因(IFN-γ)等5个具有重要免疫功能的基因作为候选基因,对华农温氏Ⅰ号这一商品化配套系的基础群进行基因型分布检测,及基因型与0～100kg日增重或100kg背膘厚间的关联分析,以探讨开发相关分子标记的可行性。参与基因型检测的样本包括杜洛克、长白、皮特兰和大白4个品种。结果表明TAP1和IFN-γ的基因型在参与生产性能高度选择的各品种内处于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),BF在除了大白品种外的其它3品种中均平衡(P>0.05),DRB和DQB为高度不平衡(P<0.0001)。基因型与表型的关联分析显示大白品种中IFN-γ的基因型对0～100kg日增重有影响(P<0.01),长白品种中DRB的基因型与100kg背膘厚有关(P<0.05),其它品种或其它基因没有检测到与之相关的显着性差异(P>0.05)。这5个基因在4个品种中至少TAP1基因表现出与相关生产性状无关,因此对它抗病性能的选择利用将不会造成其它性能的下降。

斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究

王荣;孔繁德;吴德峰;徐淑菲;

2009, 0(01): 107-111.

摘要 ( 107 )

PDF (1083KB) ( 582 )

相关文章 | 计量指标

在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。

多重RT-PCR一步法技术同时检测猪瘟病毒和蓝耳病病毒方法的建立以及初步应用

孔繁德;王荣;陈琼;吴德峰;徐淑菲;

2009, 0(01): 112-116.

摘要 ( 144 )

PDF (544KB) ( 550 )

相关文章 | 计量指标

猪瘟病毒和蓝耳病病毒均能导致猪繁殖障碍,对养猪生产影响很大。根据猪瘟病毒(CSFV)和猪蓝耳病(PRRS)的基因保守序列设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重RT-PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明能同时扩增得到2条与试验设计相符的167bp(CSFV)和320bp(PRRS)特异性条带,同时具有较好的特异性;敏感性检测结果表明,临床阳性的样品提取的核酸稀释1000倍后仍能检测出CSFV和PRRSV。本方法的建立对于这2种病毒病的早期快速检测具有十分重要的意义。

用基因疫苗制备H9亚型禽流感病毒单克隆抗体

詹爱军;王新卫;王敬师;李少璃;于康震;毕英佐;

2009, 0(01): 117-120.

摘要 ( 106 )

PDF (477KB) ( 578 )

相关文章 | 计量指标

用H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因反转录cDNA第一链PCR扩增其HA基因,PCR产物与pcDNA3.1(+)质粒构建重组质粒作为基因疫苗免疫8周龄Balb/C小鼠,细胞融合后用血凝抑制试验(HI)和ELISA试验检测细胞培养上清,各获得一株阳性细胞株,经3次亚克隆后都能稳定分泌H9AIV特异性抗体。特异性检测与NDV、H5亚型AIV、产蛋下降综合症(EDS76)病毒毒株没有反应,2株单抗经亚型鉴定均为IgG2b,轻链的亚型为kappa链。所获得的单克隆抗体将在禽流感快速诊断和疾病预警监控中发挥重要作用。

双抗体夹心ELISA定量检测IFNβ-HSA融合蛋白方法的建立

张立操;张莲芬;雷楗勇;陈其亮;陈蕴;许泓瑜;许正宏;张雁云;金坚;

2009, 0(01): 121-125.

摘要 ( 138 )

PDF (436KB) ( 813 )

相关文章 | 计量指标

为了建立β干扰素与人血清白蛋白融合蛋白(IFNβ-HSA)的酶联免疫定量分析方法,以抗IFNβ单克隆抗体为包被抗体,IFNβ-HSA融合蛋白为夹心抗原,辣根过氧化酶(HRP)标记抗HSA单克隆抗体为检测抗体,建立了一种定量测定IFNβ-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法。并进行了检测限、精密度、准确度和稳定性等方法学考核。结果表明,包被抗体和检测抗体的最佳工作浓度均为2μg/ml,抗原浓度在51.88～3320ng/ml范围内呈良好线性关系,相关系数R2>0.99,检测限为10ng/ml。经方法学考核,批内、批间变异系数分别为4.86%和8.08%,回收率为91.9%～110.4%,与IFN-β、IFN-α、HSA、IFNα2b-HSA基本无交叉反应,健全性分析表明发酵液稀释倍数对该方法无影响,8d连续检测标准曲线表明稳定性良好。这种定量检测IFNβ-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法,灵敏度高,重复性好,为当前融合蛋白发酵优化、分离纯化研究提供了定量检测的方法,并为后期药代动力学、临床研究提供了思路和备选方法。

羟喜树碱结合肽的研究

朱威;张莲芬;雷楗勇;顾健德;金坚;

2009, 0(01): 126-129.

摘要 ( 158 )

PDF (442KB) ( 515 )

相关文章 | 计量指标

酯化脱水法制备生物素化羟喜树碱,使用Resourse 15反相柱纯化,液质联用分析确证。磺酰罗丹明B染色法鉴定生物素化羟喜树碱的抗癌活性。采用噬菌体展示技术筛选得到14条羟喜树碱结合肽。构建并优化了羟喜树碱结构模型。构建并通过分子动力学优化了羟喜树碱结合肽结构模型。使用分子对接验证并分析了羟喜树碱结合肽与羟喜树碱的结合作用。

黑曲霉CICIM F0410中α-葡萄糖苷酶的酶学性质研究

周敏;王正祥;

2009, 0(01): 130-133.

摘要 ( 132 )

PDF (443KB) ( 429 )

相关文章 | 计量指标

研究了黑曲霉(Aspergillus niger)CICIMF0410发酵粗酶液中α-葡萄糖苷酶的酶学性质,发现该酶最适反应温度为55℃,最适反应pH值5.0,在65℃以下保持酶活力相对稳定,且能在pH值(4.0～6.5)范围内保持相对较高的酶活力。以该菌株的染色体DNA为模板,PCR扩增出大小为3.1kb的片段,经序列比对发现与NCBI上已公布的黑曲霉(Aspergillus niger)CBS513.88(登录号XP_001402053)序列有2个碱基的区别:2272(A→G),3098(T→G),导致2个氨基酸残基的变化:687(Asn→Ser)、983(Ser→Arg)。

不吸水链霉菌基因文库的构建及初步筛选

桓明辉;陈飞;吴红艳;关艳丽;王志;程永涛;

2009, 0(01): 134-137.

摘要 ( 119 )

PDF (510KB) ( 581 )

相关文章 | 计量指标

采用碱裂解法从不吸水链霉菌提取染色体DNA,用Sau3AI对染色体DNA进行部分水解,利用透析袋法回收3.5～9kb之间的DNA片段。以pUC18为载体,用BamHI对其进行酶切,再用热敏磷酸酶去磷酸化,酶切产物与外源DNA按一定比例混合后,加入T4DNA连接酶进行连接。连接产物用受体菌E.coliDH5α进行转化,根据α-互补性质产生的颜色反应,挑选白色菌落,构建了相应的不吸水链霉菌基因文库。分别利用特异性探针2-1-1及1-2-1对不吸水链霉菌基因文库进行筛选,利用DIG-Ⅱ-dUTP对特异性探针进行标记,与基因文库中的阳性转化子进行Southern杂交,通过显色反应对杂交结果进行检测,由于时间关系,暂未筛选出阳性克隆,但这些工作对以后的相关实验研究具有很好的借鉴作用。

不吸水链霉菌11371衍生菌种构建及基因工程宿主菌初筛

陈飞;张璧;吴红艳;桓明辉;关艳丽;郭玲玲;

2009, 0(01): 138-142.

摘要 ( 126 )

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采用物理、化学等方法对不吸水链霉菌11371(Streptomyces ahygroscopicus wuzhouensis subsp)进行诱变,获得78株在菌落形态方面与野生菌不同的衍生菌;并对各种衍生菌株进行了抗生素生物活性、内源性质粒以及外源载体转化等研究,初步筛选出2株具有宿主潜力的衍生菌,为构建11371转化体系提供了生物材料和相关理论基础。

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