生物技术通报

王悦冰;郎志宏;黄大昉;

2008, 0(04): 1-4.

摘要 ( 293 )

PDF (214KB) ( 1970 )

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大多数真核基因都含有非编码的间隔序列——内含子,根据剪接机制的不同,可将内含子分为3类:真核mRNA内含子、自我剪接内含子和真核tRNA内含子。在多数情况下,真核mRNA内含子的存在可以提高基因的表达水平,因为其剪接过程会影响mRNA新陈代谢的多个阶段,包括转录、RNA编辑、pre-mRNA的加工、mRNA的出核运输、翻译和无义衰变等。真核mRNA内含子在真核生物基因表达调控中起着重要的作用,是转基因研究中提高外源基因表达的重要元件之一。就真核mRNA内含子的特性、剪接机制及其对真核基因表达调控的影响作一概述。

细菌的氧化应激及基因表达调控

郭书巧;徐鹏;倪万潮;

2008, 0(04): 5-8.

摘要 ( 249 )

PDF (212KB) ( 1551 )

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细菌受到氧化胁迫时,在细胞内形成氧化伤害并作为一种生理信号激活特定的调控子,诱导某些具有抗氧化作用的蛋白质从而保护自身。其中最为重要的是两种氧化还原应答转录因子SoxR和OxyR调控子。前者是MerR家族成员,含有铁硫中心,在细胞内以二聚体的形式存在,在感受到氧化剂刺激后激活SoxS基因的表达,形成SoxRS调控子,从而激活一系列抗氧化基因的表达;后者是LysR蛋白家族成员,在细胞内以四聚体的形式存在,含有一对半胱胺酸残基,能被H2O2氧化形成二硫键,激活下游基因的表达。

基因工程菌中重组质粒的稳定性研究进展

肖硕;洪华珠;彭建新;

2008, 0(04): 9-12.

摘要 ( 311 )

PDF (113KB) ( 1945 )

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基因工程菌(细胞)是现代生物工程中的微型生物反应器,是基因工程的研究主体之一。获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞是基因工程的核心步骤与最终目的。基因工程菌重组质粒稳定性问题是基因工程菌工业化生产与实验研究中的最主要问题,就其在基因工程中的重要性、影响因素及提高稳定性策略方面作简要介绍并展开综述。

非折叠蛋白反应——一条综合的细胞内信号通路

肖宁;周怡;刘芳;耿越;

2008, 0(04): 13-17.

摘要 ( 351 )

PDF (237KB) ( 536 )

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内质网(endoplasmic reticulum,ER)作为细胞中蛋白成熟的场所,可以很敏感的感受细胞内外环境的变化。当ER内环境改变,细胞就会激活信号应对这些改变,并且重新恢复折叠蛋白的环境。内质网的这种改变就是内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),而对这种应激作出的反应就是非折叠蛋白反应[1(]Unfolded Protein Response,UPR)。UPR至少引起了3种不同的信号通路,这些通路不仅调控分泌途径中大部分基因的表达,而且还广泛影响细胞的各个方面包括蛋白质、氨基酸和脂类的代谢。同时,这3条通路可以综合的调控细胞分泌器官的重塑并根据ERS重新调节细胞的生理活性。就UPR相关的感受器及其信号通路作简要的介绍。

果树病毒基因组测序的研究

赵英;牛建新;

2008, 0(04): 18-21.

摘要 ( 98 )

PDF (113KB) ( 217 )

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果树病毒病害由于其危害严重及防治困难,一直是世界植物病理学者和果树生产者所关注的一个重要问题。而果树病毒基因组的研究在了解病毒基因的结构、功能,病毒基因的致病性及病毒的准确分类等方面有着重要的作用,因此,综述了果树病毒基因组研究的意义,介绍了果树病毒基因组测序策略中病毒基因组模板的制备、测序方法及测序产物的注释等方面,并展望了果树病毒基因组测序研究的前景。

藜科盐生植物的形态特征与耐盐分子机理研究进展

高海波;张富春;

2008, 0(04): 22-26.

摘要 ( 130 )

PDF (143KB) ( 618 )

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在非生物环境胁迫因子中,盐胁迫是造成农作物减产的主要因素之一。从藜科植物耐盐的形态生理学机制和分子生物学角度入手,讨论了藜科植物耐盐基因工程的新进展,探讨藜科盐生植物的盐胁迫机理,为利用基因工程手段培育耐盐植物奠定基础。

植物口服疫苗及其安全性研究进展

薛柯;尉亚辉;张变玲;荆二勇;姬婧媛;张展鹏;

2008, 0(04): 27-29.

摘要 ( 131 )

PDF (112KB) ( 543 )

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随着生物技术的不断进步,人们利用转基因技术定向改造现有植物品种的研究已经取得可喜的成绩。其中利用植物材料作为生物反应器生产口服疫苗更是近年来的热点。主要介绍了植物口服疫苗的研究进展,对于存在的问题提出了解决方法。

聚酮类化合物生物合成基因簇与药物筛选

刘炳辉;曹远银;闫建芳;齐小辉;程浩;黄盼盼;刘秋;

2008, 0(04): 30-33.

摘要 ( 261 )

PDF (248KB) ( 613 )

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由微生物和植物产生的聚酮类化合物的数量极其庞大,是一大类结构多样化和生物活性多样性的天然产物,已经成为新药的重要来源。介绍了3种类型聚酮类化合物生物合成基因簇的特点,即以模块形式存在的Ⅰ型聚酮合酶,包含一套可重复使用结构域的Ⅱ型聚酮合酶以及不需要ACP参与,以植物中的查耳酮合酶为代表的Ⅲ型聚酮合酶。同时,还介绍了基于3种类型聚酮类化合物生物合成基因的特点,利用分子生物学方法构建筛选探针,进行当前药物基因筛选的进展。

离子液体在生物催化反应中的应用

徐晓冬;李欣欣;丹媛媛;张密林;

2008, 0(04): 34-37.

摘要 ( 91 )

PDF (113KB) ( 263 )

相关文章 | 计量指标

首先概括了离子液体中生物催化反应的特点;阐述了离子液体在生物催化反应中的应用进展,主要包括:蛋白酶催化的反应、脂肪酶催化的反应、氧化还原酶催化的反应以及其它酶催化的反应。离子液体通常起到了提高酶的活性或稳定性,并提高产物收率和选择性的作用;并展望了离子液体作为溶剂和共溶剂在生物催化反应中的发展前景。

禽抗微生物肽的结构、分布及活性研究进展

左珂菁;张祥斌;冀君;陈峰;杨小梅;梁梓森;谢青梅;

2008, 0(04): 38-46.

摘要 ( 128 )

PDF (436KB) ( 691 )

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抗微生物肽是生物体产生的一种具有抗微生物活性的多肽,具有抵抗原生动物、真菌、病毒、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的活性,不易产生耐药性,有取代传统抗生素的发展趋势。众多学者对禽类抗微生物肽进行了大量的研究,从禽类中陆续分离到20多种新的抗微生物肽,主要综述了禽抗微生物肽的结构、分布及活性研究进展,为禽抗微生物肽的进一步探索研究奠定基础。

微生物发酵生产脂肪酶的研究进展

汪小锋;王俊;杨江科;闫云君;

2008, 0(04): 47-53.

摘要 ( 315 )

PDF (358KB) ( 1313 )

相关文章 | 计量指标

脂肪酶是一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、精细化工、医药和能源等领域。脂肪酶最主要的来源是通过微生物发酵生产。综述了脂肪酶种类、高产脂肪酶菌种选育、发酵工艺优化与调控、高密度发酵和发酵工艺放大等方面的研究进展,并展望了脂肪酶发酵生产的研究方向及前景。

湖泊微生物多样性研究进展

龚世杰;吴兰;李思光;

2008, 0(04): 54-57.

摘要 ( 128 )

PDF (147KB) ( 739 )

相关文章 | 计量指标

随着不依靠培养的分子生物学技术的迅速发展,湖泊微生物多样性研究越来越受到人们的重视并取得了较大的成果。从从古细菌域、细菌域、真核生物域3个方面概述了湖泊微生物多样性的研究进展并简单介绍了宏基因组技术在湖泊微生物多样性研究中的运用。

微生物合成的聚谷氨酸及其应用

张艳丽;高华;刘小红;

2008, 0(04): 58-62.

摘要 ( 195 )

PDF (312KB) ( 1225 )

相关文章 | 计量指标

γ-聚谷氨酸是一种全天然的、可食用的、具有多功能性的阴离子聚合物,可由微生物发酵合成。随着材料科学、聚合物化学和生物医学的不断发展和紧密融合,生物可降解高分子材料的研究得到长足发展,γ-聚谷氨酸的开发研究则日益深入。但国内研究仍处于实验室阶段,还未实现工业化生产。介绍了γ-聚谷氨酸的结构、理化性质及其影响因素,综述了其合成菌株、培养方法、相关基因及在医药、食品、化妆品、农业、工业等方面的应用。

海洋微藻脂肪酸组成的研究进展

李春颖;仇雪梅;

2008, 0(04): 63-65.

摘要 ( 138 )

PDF (90KB) ( 421 )

相关文章 | 计量指标

花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)、二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)是人以及动物所必需的高不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs),在人和动物的生理活动中起着重要的作用。微藻中含有丰富的这些高不饱和脂肪酸。综述了微藻的绿藻门、硅藻门、金藻门、甲藻门、红藻门、黄藻门和隐藻门中藻的脂肪酸组成和国内外发展状况。

细菌人工染色体基因组文库构建关键技术研究

刘长青;吴宏梅;包阿东;陆涛峰;刘帅;张洪海;唐学玺;关伟军;马月辉;

2008, 0(04): 66-69.

摘要 ( 137 )

PDF (115KB) ( 289 )

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基因组文库是进行分子克隆和基因结构与功能研究的基础,完整覆盖的基因组文库的构建,使基因组任何DNA片段的筛选和获得成为可能。细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)与其它载体系统相比具有转化效率高、嵌合体少、插入片段易回收,高覆盖率、稳定性强,并且具有易分离和操作等特性等优点而被广泛应用。作为物种保护策略的重要部分,构建我国濒危动植物品种基因组BAC文库,对于其遗传资源的保护和研究具有非常重要的作用。在查阅大量国内外相关资料的基础上,就BAC基因组文库构建过程中载体的制备、高分子量DNA的制备、大片段DNA的回收、连接与电击转化、基因组BAC文库质量鉴定等几个重点、难点问题进行了详细的论述和分析,对于构建高分子量插入片段、高覆盖率和稳定性的基因组文库提供理论基础与技术支撑。

染色体核型分析及染色体显微分离技术研究进展

闫素丽;安玉麟;孙瑞芬;李素萍;

2008, 0(04): 70-74.

摘要 ( 240 )

PDF (145KB) ( 1777 )

相关文章 | 计量指标

染色体核型分析是遗传学研究的重要手段,也是物种分类和鉴定的基本依据。染色体显微切割技术是细胞遗传学和分子遗传学相结合的一种技术,应用前景广阔。重点综述了染色体核型分析和单染色体显微切割技术的操作规程。

植物病害免疫学诊断技术

王艺凯;李宝聚;陈红漫;石延霞;阚国仕;刘洋;

2008, 0(04): 75-77.

摘要 ( 94 )

PDF (116KB) ( 496 )

相关文章 | 计量指标

植物病害免疫学诊断技术将以抗原和抗体的特异性反应为基础的传统免疫学继承并发展,应用于植物病害的诊断上。最近10几年,植物病害免疫学诊断技术已广泛应用到病原真菌的检测中。免疫学诊断方法分为非标记免疫分析方法和标记免疫分析方法两大类。着重介绍了应用于植物病害免疫学诊断技术中的酶联免疫吸附测定、免疫胶体金快速诊断技术。

反义基因技术及其在植物研究上的应用

刘俊杰;魏小春;齐树森;史为民;

2008, 0(04): 78-84.

摘要 ( 165 )

PDF (236KB) ( 414 )

相关文章 | 计量指标

介绍了反义基因的概念、分子生物学基础以及作用原理,对反义基因技术及其在现代植物研究中的应用进行了概述。反义基因在调控果实成熟、改良作物品质、获得作物雄性不育系、改变植物花色、增强植物抗病性和研究未知基因的功能等方面具有重要的作用。并对反义基因技术的应用进行了展望。

微卫星标记在玉米群体遗传多样性研究中的应用

夏亮;赵琦;焦雨歆;谢传晓;

2008, 0(04): 85-88.

摘要 ( 88 )

PDF (114KB) ( 251 )

相关文章 | 计量指标

简要综述了近几年利用微卫星(SSR)分子标记技术分析玉米群体遗传多样性过程中的研究进展对研究中混合取样,荧光标记技术,共享数据库等新方法的使用作了阐述。

ELISA检测技术在畜产品抗生素类药物残留检测中的应用

韩庆功;崔艳红;

2008, 0(04): 89-93.

摘要 ( 133 )

PDF (145KB) ( 813 )

相关文章 | 计量指标

畜产品中药物残留主要包括抗生素类、磺胺药类、呋喃药类、抗球虫类、激素药类和驱虫药类药物。而抗生素类药物是一种应用最广、种类最多的药物,在畜产品中的残留更严重,目前对于畜产品中抗生素类药物残留的检测方法很多;ELISA检测技术因其灵敏度高,特异性强,仪器设备要求不高,测定成本低,方法快速、简便,试剂保存时间较长,自动化程度高,无放射性同位素污染等优点,成为畜产品中药物残留目前最理想的检测技术之一,就ELISA检测技术在畜产品中抗生素类药物残留检测中的应用和进展进行了归纳总结。

抗鸡CD25单克隆抗体的制备与鉴定

秦春圃;

2008, 0(04): 93-93.

摘要 ( 96 )

相关文章 | 计量指标

<正>浙江大学医学部附一医学院传染病研究所吴炜,浙江大学动物预防医学研究所腾巧泱、吴佳俊、周继勇等5位免疫学研究的科学人员,用纯化的鸡IL-2Ra(chCD25)重组蛋白免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓细胞免疫融合,对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得1E1,1G1,4H5,5E1,6A1,6C2,6C9,7株能移能稳定传代并分泌抗chCD25单克隆抗体的杂交瘤细胞。该7株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达

微生物技术修复水污染的研究进展

霍炜洁;肖晶晶;黄亚丽;朱昌雄;

2008, 0(04): 94-98.

摘要 ( 166 )

PDF (143KB) ( 539 )

相关文章 | 计量指标

微生物技术修复水污染以其效率高、成本低、无二次污染等特点日益受到人们的重视。从新菌株、新工艺上简述了微生物技术在修复水体有毒有机物(多环芳烃类为代表)污染、重金属污染以及富营养化治理工程中的研究成果及发展方向,提出了微生物修复研究中存在的问题并对今后的研究重点进行了展望。

拟南芥、荠菜DREB1A基因的克隆与植物表达载体的构建

杜洪伟;陈芬;肖国樱;

2008, 0(04): 99-103.

摘要 ( 96 )

PDF (568KB) ( 286 )

相关文章 | 计量指标

用PCR方法从拟南芥和荠菜中分别克隆了DREB1A基因。序列分析发现从拟南芥中克隆的AtDREB1A基因与已发表的AtDREB1A基因序列(DQ372533)的同源性为99.69%,首次从荠菜中克隆的CbDREB1A基因序列(EF156749)与DQ372533的同源性为99.54%。利用这两个基因分别构建了两个诱导表达载体(prd29A/AtDREB1A,prd29A/CbDREB1A)和两个组成型表达载体(pCaMV35S/AtDREB1A,pCaMV35S/CbDREB1A),以便进一步开展植物抗旱基因工程研究。

农杆菌介导玉米胚性愈伤的遗传转化研究

杨爱国;刘爽;赵琦;赵玉锦;张世煌;潘光堂;

2008, 0(04): 104-108.

摘要 ( 124 )

PDF (589KB) ( 893 )

相关文章 | 计量指标

利用3种不同类型的农杆菌菌株C58、LBA4404和EHA105携带外源GUS基因分别侵染玉米自交系齐319和18(红)胚性愈伤。结果显示,不同的菌株和自交系间的搭配,其遗传转化效率差异很大,GUS瞬时表达率呈极显着差异(F=24.92**),抗性愈伤率也呈极显着差异(F=19.43**)。其中,EHA105-齐319组合遗传转化效率最高,其GUS瞬时表达率平均为55.5%,最高可达71.1%;其抗性愈伤率平均为14.4%,最高可达20%;对22株转基因T0代抗性植株进行PCR检测,其中PCR呈阳性植株有11株,阳性率为50%。进一步对此22株T0代抗性植株进行叶片组织化学染色分析,结果显示,PCR呈阳性的植株中均有GUS基因表达。从而证明,外源GUS基因在转基因玉米T0代植株中得到稳定表达,而且验证了PCR检测结果和GUS表达分析结果的一致性。

大麦转基因座位结构的研究

黄洁;赵梅香;肖宁;夏瑞祥;洪义欢;陈建民;

2008, 0(04): 109-113.

摘要 ( 84 )

PDF (419KB) ( 300 )

相关文章 | 计量指标

利用质粒营救法获得基因枪法转化的4种转绿色荧光蛋白基因(green fluorescent protein,GFP)大麦的转基因座位序列,序列分析显示4种材料的转基因座位中均有完整载体的串联重复现象,表明转基因整合是同源重组的结果。同时转基因座位中也存在不完整载体片段、基因组片段的混杂排列,说明转基因整合时也发生异常重组。微粒轰击的转基因整合是由异常重组和同源重组共同完成的。

番茄LeEIL1基因的克隆分析及表达载体构建

李季;李正国;罗安才;杨迎伍;邓伟;

2008, 0(04): 114-117.

摘要 ( 72 )

PDF (366KB) ( 346 )

相关文章 | 计量指标

采用RT-PCR方法从番茄果实cDNA中成功克隆了番茄LeEIL1基因,并测序验证序列正确;经数据库检索等生物信息学分析方法,对番茄LeEIL1蛋白质与拟南芥、烟草、水稻、香石竹等的EIN3/EILs蛋白质序列进行了同源性分析,初步确定了番茄LeEIL1上的DNA结合功能域及其结合激活位点。并构建了LeEIL1的酵母表达工程菌pPIC9k-EIL1/KM71,为该基因的功能研究奠定了基础。

元宝枫叶片总DNA提取方法的优化

崔翠;蔺银鼎;

2008, 0(04): 118-121.

摘要 ( 108 )

PDF (266KB) ( 650 )

相关文章 | 计量指标

由于元宝枫叶片细胞含有大量的多糖、单宁、色素和酚类物质,严重影响基因组DNA的提取,在提取元宝枫叶片总DNA的过程中,对常用的CTAB法进行了大胆的革新。结果表明,采用细胞核裂解前加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和将加入RNase A消化RNA的步骤改在最后进行等技术,可以从元宝枫叶片快速提取高质量DNA,该研究为从富含多糖、单宁、色素和酚类物质的植物中提取基因组DNA,提供了可行的分析方法。

转NAS基因冷季型草坪草的生长及抗旱性研究

孙鏖;易自力;蒋建雄;陈智勇;

2008, 0(04): 122-124.

摘要 ( 87 )

PDF (323KB) ( 380 )

相关文章 | 计量指标

采用盆栽法,在干旱胁迫下,测定转基因草坪草与对照株在不同水分胁迫下的根系活力、脯胺酸含量、叶绿素含量和SOD酶活性等抗旱生理指标。以期综合评价该转基因草坪草的抗旱性能和所选指标作为筛选抗旱性指标的可行性。结果表明,转基因草坪草在抗旱性能上普遍优于对照株。同时,SOD酶活性和脯胺酸含量可以作为转基因草坪草抗旱性鉴定指标;根系活力和叶绿素含量为参考指标。

一个约30kD膜蛋白作为汉坦病毒候选受体的筛选

李青岭;冯涛;郭进军;黄爱龙;

2008, 0(04): 125-129.

摘要 ( 98 )

PDF (1179KB) ( 446 )

相关文章 | 计量指标

目的:筛选汉坦病毒包膜糖蛋白G2可能的候选受体或受体辅助分子,方法:根据汉坦病毒76～118株M基因序列设计引物,PCR扩增和基因重组获得G2全长及各功能片段的GST融合表达质粒,SDS-PAGE检测它们在BL21菌中诱导表达及纯化的效果。生物素标记汉坦病毒易感细胞Vero E6和非允许细胞CHO的细胞膜蛋白。将在BL21裂解上清中有表达的G2蛋白N端81～140位氨基酸片段(G2N81-140)纯化后与含有生物素标记的Vero E6细胞膜裂解液进行孵育,同时以非允许细胞CHO和无关蛋白GST-TLM做为阴性对照,通过GST Pull-down分离与G2蛋白特异性结合的细胞膜蛋白。结果:一个约30kD的Vero E6细胞膜蛋白与G2N81～140片段之间存在着特异性的相互作用。结论:该30kD蛋白可能是汉坦病毒细胞膜候选受体或受体辅助分子之一,是病毒入侵细胞的一个相关分子。

二化螟β1微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析

樊东;秦松柏;朴冬花;许艳丽;

2008, 0(04): 130-135.

摘要 ( 105 )

PDF (2078KB) ( 415 )

相关文章 | 计量指标

微管是真核生物体内分布最为广泛的一类蛋白,是由α-和β-两种不同的微管蛋白组成的异源二聚体。微管参与许多细胞功能,如细胞形态发生、细胞生长和分裂等。以二化螟3龄幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),扩增得到该虫的β微管蛋白基因的cDNA序列一条。cDNA序列含1 862个碱基,开放读码框1 344个碱基,编码氨基酸447个,分子量约为50.2kD,等电点4.82。氨基酸序列中1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号,是微管蛋白特异片段;氨基酸序列的140～146GGGTGSG位存在一个微管蛋白标志信号片段。序列比对表明,克隆的β微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的,与家蚕Bombyx mori β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.1%,与烟草天蛾β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98.7%,与果蝇Drosophila melanogaster β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到96.9%。该基因cDNA序列已经登录Genbank并获得登录号为EU429675。

虎源犬瘟热病毒P基因的遗传进化分析

贾红玲;吴润;郭峰;刘长清;丛义梅;包阿东;关伟军;马月辉;

2008, 0(04): 136-140.

摘要 ( 101 )

PDF (331KB) ( 314 )

相关文章 | 计量指标

根据GenBank中犬瘟热病毒基因组(Canine distemper virus,CDV)P基因序列,设计合成一对特异性引物,以虎源犬瘟热病毒的总RNA为模板,RT-PCR扩增P基因,并进行克隆与序列分析。结果显示,CDV虎源犬瘟热病毒P基因序列与GenBank中的10种不同毒株AY466011、AY964113、AF181446、AY386315、AF259549、AJ582385、AB212727、AB212962、AY130857和U53712的同源性分别为93%、95%、93%、91%、91%、95%、94%、96%、98%和93%,经过基因序列分析,发现聚合酶P基因包含了与10个病毒毒株共有序列的6个不同改变(change),其中位点2 243 C和位点2 465 A在虎犬瘟热毒株、AF466011毒株、AY130857毒株中保留,种系进化分析显示,三者的亲缘关系最近,表明位点2 243与2 465的点突变在犬瘟热病毒宿主间的传播极其重要,P基因结构的稍微变化是导致病毒在不同寄主中增殖的活力改变的重要因素。

基于18S rRNA基因的PCR/DGGE技术研究山羊瘤胃原虫动态变化

王新峰;苏勇;毛胜勇;刘建新;朱伟云;

2008, 0(04): 141-144.

摘要 ( 99 )

PDF (397KB) ( 373 )

相关文章 | 计量指标

应用PCR/DGGE技术对山羊采食前后瘤胃原虫的多样性随时间的变化进行了研究。采食前和采食后1、2、4和8h分别采集瘤胃内容物样品,对瘤胃原虫特异性的18S rRNA基因经PCR扩增、DGGE电泳分析。结果显示,采食前后DGGE图谱由10条左右清晰可辨的谱带组成,图谱上的泳带反映了瘤胃内的优势原虫,泳带数量和位置的复杂性说明了瘤胃原虫的多样性。并对其中两个优势条带切胶测序,基因序列分析分属于毛口目和内毛目。瘤胃原虫区系相似性分析,采食前为90.5%～94.1%;采食后相似性发生改变,且存在个体差异。多样性指数由采食前的0.82逐渐上升到采食后8h的0.90(P>0.05)。DGGE指纹技术有效地反映了不同样品中原虫优势种的组成,并可通过此技术跟踪研究瘤胃原虫区系在不同条件下的动态变化。

两种藻胆蛋白对人喉癌Hep-2细胞的光动力杀伤效果

王源;李柏林;张陆曦;蔡春尔;刘承初;何培民;

2008, 0(04): 145-148.

摘要 ( 94 )

PDF (372KB) ( 395 )

相关文章 | 计量指标

从条斑紫菜中提取高纯度R-藻红蛋白(R-PE)和R-藻蓝蛋白(C-PC),采用MTT法测定主要研究了不同浓度(10、25、50和100μg/ml)R-PE和C-PC分别介导的光动力效应对人喉癌Hep-2细胞的生存率的影响。实验结果显示,两种藻胆蛋白的光动力作用对Hep-2细胞具有杀伤作用。在浓度为100μg/ml,照射剂量为50J/cm2的条件下,藻蓝蛋白对应的细胞存活率为64%,藻红蛋白对应的仅为57%;单用碘钨灯处理,Hep-2细胞的存活率达到86.9%;而单独使用这两种藻胆蛋白处理Hep-2细胞,培养24h后,低浓度藻胆蛋白(10、25μg/ml)对细胞的抑制效果不明显,高浓度对细胞生长具有一定的抑制效果,抑制率为68%。实验证明条斑紫菜R-藻红蛋白和C-藻蓝蛋白具有可开发人喉癌治疗光敏剂应用前景。

蓝藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的生物信息学分析

侯李君;王学魁;施定基;

2008, 0(04): 149-154.

摘要 ( 160 )

PDF (1104KB) ( 576 )

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应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站对蓝藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)与其他物种进行序列同源比对,分析相同的保守序列及催化活性位点,构建分子进化树;预测跨膜结构、疏水性/亲水性、二级结构、功能域和模体等。结果显示,蓝藻PEPC与高等植物、细菌、真核藻PEPC同源性都比较低(约为33%),但是它们含有两个类似的活性部位和相同的催化活性位点;该蛋白质是非跨膜的亲水性不稳定蛋白,二级结构以a-螺旋和无规则卷曲为主,含有一个功能结构域,主要的功能是参与氨基酸的合成。

葡萄糖浓度对转基因聚球藻表达hTNF-α和光合作用的影响

李丹;崔莹;施定基;王学魁;段睿;张芃芃;宋东辉;

2008, 0(04): 155-160.

摘要 ( 93 )

PDF (575KB) ( 484 )

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为了开发海洋药物,把人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)转入海洋单细胞蓝藻聚球藻7002。然而,转基因聚球藻的hTNF-α表达率很低,仅为可溶性蛋白的0.08%,这不利于进一步纯化。不同浓度的葡萄糖对转TNF-α聚球藻的生长、hTNF-α的表达和光合作用的影响。当葡萄糖浓度为125mmol/L,hTNF-α的表达率达到最高,是不含葡萄糖的6.57。此外,当葡萄糖浓度为75mmol/L时,藻细胞的净光合作用速率达到最大,是光自养藻细胞的1.69倍。在各种葡萄糖浓度下,藻细胞对葡萄糖的吸收都不明显。

长心卡帕藻RAPD-PCR反应体系的正交优化研究

赵素芬;张婷;应成琦;何培民;

2008, 0(04): 161-165.

摘要 ( 85 )

PDF (1025KB) ( 348 )

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采用SD(S十二烷基硫酸钠,20%)法提取了大型海藻长心卡帕藻(Kappaphycus alvarezii)基因组DNA。通过单因子梯度试验,确定了影响随机扩增DNA多态性(RAPD)扩增结果的模板、Mg2+、dNTPs、S22引物、Taq的适宜浓度、退火温度和反应的最佳循环次数;利用正交试验优化了模板、Mg2+、dNTPs、S22引物、Taq的配比浓度。结果表明,在进行长心卡帕藻的RAPD扩增时,在总体积为25μl的反应体系中,模板、Mg2+、dNTPs、S22引物、Taq的最佳浓度分别为15ng、2.0mmol/L、0.2mmol/L、0.25μmol/L、2.5U;退火温度为37℃。反应程序为94℃预变性5min,然后经94℃变性30s、37℃退火1min,72℃延伸2min,进行30次循环,最后在72℃再延伸10min。

外界因子对条斑紫菜自由壳孢子囊枝形成和生长影响

陈翠芬;李信书;杨玲;王兰刚;何培民;

2008, 0(04): 166-170.

摘要 ( 117 )

PDF (362KB) ( 315 )

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主要研究了不同光照周期(8L:16d、12L:12d和16L:8d)、不同温度(15℃、20℃和25℃)、不同光照强度(29、42、57、72和86μmol m-2.s-1)等外界因子对条斑紫菜自由丝状藻丝切断诱导形成壳孢子囊枝影响,以期获得条斑紫菜壳自由孢子囊枝形成的最佳外界条件。结果表明,在25℃和57μmol m-2·s-1条件培养30d后,短日照(8L:16d)对壳孢子囊枝诱导形成效果最好,其壳孢子囊枝形成率高达92.5%,50d后几乎达到100%;在25℃和短日照条件培养30d后,光照强度为57μmol m-2·s-1时,壳孢子囊枝诱导形成率达到最高(92.2%),光照强度过高过低均不利壳孢子囊枝形成;在57μmol m-2·s-1和短日照条件下,当温度为25℃时,壳孢子囊枝形成率最高,形成率随温度下降而减少。在12L:12d光照周期、57μmol m-2·s-1光照强度和25℃温度条件下,自由壳孢子囊枝生长最快,其日平均相对生长率可达54.43%。以上研究为实现紫菜细胞工程育苗新技术-自由壳孢子囊枝育苗奠定了坚实基础。

多粘类芽孢杆菌SC2 xynD和gluB的克隆及序列分析

朱辉;丁延芹;田方;姜远茂;杜秉海;

2008, 0(04): 171-174.

摘要 ( 124 )

PDF (661KB) ( 335 )

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β-1,4-木聚糖酶和β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性检测结果表明,多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)SC2能同时产生β-1,4-木聚糖酶和β-1,3-1,4-葡聚糖酶。以菌株SC2的基因组DNA为模板,通过TAIL-PCR方法克隆到4 807bp的DNA片段。DNAMAN软件分析,该DNA片段包含2个开放阅读框(ORF),ORF1长度为1 908 bp,编码含635个氨基酸、分子量为67.8kD的蛋白;ORF2长度为714 bp,编码含237个氨基酸、分子量为26.8kD的蛋白。BLAST分析结果表明,ORF1与已报道的P.polymyxa ATCC 842的xynD基因相似性为94%,ORF2与P.polymyxaWY110的gluB基因相似性为99%。基因序列的系统发育分析进一步说明,ORF1和ORF2分别为β-1,4-木聚糖酶基因xynD和β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因gluB。

斯氏假单胞菌A1501物质代谢及能量生成相关基因的分析

刘伟;燕永亮;杨剑;平淑珍;陈立宏;陆伟;张维;陈明;林敏;

2008, 0(04): 175-180.

摘要 ( 96 )

PDF (625KB) ( 284 )

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斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501是一株分离自中国南方水稻根际土壤的联合固氮菌。该菌在无氨和微好氧条件下可将空气中的氮气转化为植物可以直接利用的铵。A1501基因组测定工作已经完成,根据A1501菌基因组的功能注释对该菌的中心代谢、能量合成及环境适应性等方面进行了生物信息学分析。结果发现,A1501菌的物质代谢途径具有多样性,除不能利用EMP途径代谢己糖外,该基因组含有几乎所有编码Entner-Doudorff途径(ED)、磷酸戊糖途径(HMP)、糖酵解途径(EMP)、三羧酸循环(TCA)以及乙醛酸途径中关键酶类的基因。此外,基因组分析鉴定了252个与能量产生相关以及3套编码电子传递复合体(1个Nqr和2个Rnf复合体)的基因簇。为进一步研究A1501菌的碳代谢调控及C-N偶联机制提供了重要的理论依据。

通用PCR反向斑点杂交快速检测及鉴定致病性酵母菌

鲁卫平;涂植光;

2008, 0(04): 181-184.

摘要 ( 88 )

PDF (341KB) ( 514 )

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建立PCR结合寡核苷酸探针反向斑点杂交技术,快速检测及鉴定致病性酵母菌。将待检酵母菌种特异性寡核苷酸探针固定在尼龙膜上,然后用生物素标记的真菌通用引物扩增的各真菌DNA片段,与固定在膜上的探针杂交。结果表明所用的真菌通用引物可扩增临床常见的真菌DNA,9种特异性探针具有高度的特异性。该方法检测35例临床分离菌株,结果与常规鉴定方法一致。该技术检测时间短、操作简单、不需要特殊设备,能部分满足临床检测的通量要求,具有很好的临床应用前景。

亚硝基胍诱变选育低温β-半乳糖苷酶高产菌

刘文玉;史应武;王杏芹;娄恺;

2008, 0(04): 185-187.

摘要 ( 87 )

PDF (263KB) ( 395 )

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以野生低温β-半乳糖苷酶产生菌水生拉恩菌(Rahnella aquatilis)14-1为出发菌株,通过亚硝基胍(NTG)诱变及低温驯化,采用选择性平板初筛和摇瓶复筛,筛选出一株产酶活力比原始菌株提高54%的突变株,该突变株经传5代培养,产酶特性稳定。

亮菌菌粉和亮菌糖浆品质分析比较

敖宗华;陆震鸣;孙军恩;许泓瑜;许正宏;

2008, 0(04): 188-190.

摘要 ( 122 )

PDF (241KB) ( 384 )

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以多糖、多肽和亮菌甲素含量以及多糖分子量分布分析为指标,对液体发酵生产的亮菌菌粉和固体发酵生产的亮菌糖浆进行质量比较。亮菌菌粉中多糖,多肽含量分别为5.86%和4.62%。亮菌菌粉和亮菌糖浆中多糖/多肽的含量比值分别为1.27和1.29。亮菌糖浆主要由小分子量多糖组成,菌粉中亮菌甲素较多。液体发酵所得的亮菌菌粉是一种有潜力的制剂新原料。

红豆杉中产紫杉醇内生真菌分离部位的比较研究

竺俊鑫;李勇超;孟丽;

2008, 0(04): 191-194.

摘要 ( 97 )

PDF (411KB) ( 335 )

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目的探讨红豆杉不同部位在内生真菌分离效率以及产紫杉醇菌株筛选率方面的规律性,为红豆杉产紫杉醇内生菌菌株的分离与筛选提供一定的理论依据。方法从根、茎、叶3个器官取大小和表面积相同的太行山野生红豆杉(Taxous chinensis)材料,用组织块法分离红豆杉内生真菌,计算各部位内生真菌的分离效率;用高效液相法对分离到的内生真菌发酵液提取物进行紫杉醇含量分析,计算各部位产紫杉醇内生真菌的筛选率。结果共分离到109株红豆杉内生真菌,根部、茎部和叶部分离效率指数分别为0.90、0.63和0.28;其中有28株产紫杉醇,紫杉醇菌株筛选率分别为31.48%、21.05%和17.65%。结论在内生真菌的分离效率及其产紫杉醇内生真菌的筛选率上,均为根部﹥茎部﹥叶部,即根部在内生真菌分离效率和筛选产紫杉醇内生真菌效率上均具有明显的优势。

一种高效可直接用于PCR扩增的不吸水链霉菌基因组DNA的提取方法

吴红艳;陈飞;桓明辉;关艳丽;郭玲玲;

2008, 0(04): 195-197.

摘要 ( 122 )

PDF (320KB) ( 502 )

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通过对提取不吸水链霉菌基因组DNA的冻融法、微波法和溶菌酶破壁法等几种方法进行对比、分析,得出结论:溶菌酶破壁法所提取的不吸水链霉菌基因组DNA可直接用于PCR扩增。这为今后不吸水链霉菌相关基因的实验研究提供了可靠的理论依据。

转基因作物对蜜蜂健康、蜜蜂产品食用安全和生态环境的潜在影响(上)

汪开治;

2008, 0(04): 198-199.

摘要 ( 133 )

PDF (55KB) ( 246 )

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<正>2002年,在居住着全世界半数以上人口的国家中,其政府已批准商业化种植转基因或遗传改造(GM)作物。这一年,在全球16个国家中,GM作物的种植面积已达5 870万hm2。而且自从1996年首次开始商业化种植GM作物以来,这些作物的种植面积一直逐年增加。

科研新成果简介

黄炳超;

2008, 0(04): 200-201.

摘要 ( 111 )

PDF (328KB) ( 224 )

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<正>成果名称:抗稻瘿蚊新基因Gm6在分子标记抗性育种中的应用主要完成人:黄炳超,张扬,谢振文,张桂权,肖汉祥,李宏,J.Bennett,刘名镇,周少川,S.Katiyar,陈伟洲,黄朝峰,谭玉娟,徐炎康,赵丽霞,等

人H_1启动子转录shRNA的细胞种属特异性研究

秦春圃;

2008, 0(04): 201-201.

摘要 ( 88 )

相关文章 | 计量指标

<正>扬州大学王永娟、王安平、孙顺昌3位从事转基因生物制药研究工作者利用siDirect软件预测绿色荧光蛋白GFP基因特异性小干扰RNA(siRNA),将人工合成的相应shRNA插入含人H1启动子的pSuper载体,获得表达载体pSuper-shRNA,再将H1-shRNA插入表达GFP基因的peGFP-N1载体,获得表达载体peGFP-H1-shRNA。此后分别以pSuper-shRNA+peGFP-N1和peGFP-H1-shRNA转染COS-1,293-7,鸡胚肝CEL和鸡胚成纤维CEF细胞。

甘蓝型油菜BnKCR2基因cDNA的克隆和真核表达载体的构建

秦春圃;

2008, 0(04): 201-201.

摘要 ( 21 )

相关文章 | 计量指标

<正>四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室王慧、王茂华和刘绵学等5位植物分子遗传研究者,克隆甘蓝型油菜的BnKCR2基因,并构建其真核表达载体,以期得到高芥酸含量的油菜。他们根据Gen-Bank中甘蓝型油菜3-酮酯酰-CoA还原酶(BnKCR2)的cDNA序列设计引物,提取蜀杂九号油菜片的总RNA进行RT-PCR扩增,将产物与TA克隆载体pMD18-T连接,通过中间载体pMD18-T和pBluescript将BnKCR2分别

水稻基因Os922的克隆、转化及对葡萄糖的敏感性研究

秦春圃;

2008, 0(04): 201-201.

摘要 ( 24 )

PDF (56KB) ( 196 )

相关文章 | 计量指标

<正>浙江大学生物技术研究所白洋、郝中娜,中国农业大学刘东风、郭泽建等5位植物转基因科研工作者,通过PCR方法从水稻cDNA文库中克隆1个水稻AP2/EREBP类的转录因子基因Os922,并构建增强表达载体COU-Os922,使用光照培养方法将根癌农杆菌(Agrobacterium tume faciens)EH.A COS转化到粳稻(Orgza sativa L.)秀水

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