包括干旱在内的非生物胁迫是农业生产中导致作物减产的主要因素。利用现代分子生物学技术阐明非生物胁迫耐受性的控制机理,以及工程化胁迫耐受性作物均基于特异胁迫相关基因的表达。因此,发展胁迫耐受性植物的基因工程可能是增强作物品种胁迫耐受性的一条捷径。但转基因品种产生不仅受限于转化过程的是否成功,而且受限于胁迫耐受性是否适当整合;仍需阐明胁迫条件下转基因植物的评价,以及转入基因在整体植株水平的生理效应。综述利用转基因技术提高植物非生物胁迫耐受性的研究进展,讨论在接近大田环境条件下的非生物胁迫响应的评估和转基因植物耐受性的检测标准。
为探索植物内生菌R(人参)与D(越橘)醇提取混合物RD 对水稻的促进生长、增强抗病性的作用机制,采用基因芯片技术对RD 处理的水稻基因组进行分析,检测RD 处理水稻后差异表达基因。结果显示,检测到差异表达基因1 171 个,其中上调表达基因671 个,下调表达基因500 个。根据基因芯片的试验结果,采用Go 注释系统对差异表达基因进行功能注释表明,主要为刺激应答、转录调控、生理功能、结合功能、细胞过程、代谢功能等。代谢途径的变化存在明显差异,表达量上调代谢通路39 条,表达量下调代谢途径24 条。说明植物内生菌R 与D 醇提取混合物处理影响水稻性状的表达不是某个基因孤立、单一的作用,而是多方面、多层次共同作用的结果。
质粒标准分子作为阳性标准品已广泛用于转基因作物及产品的核酸定量检测。但是目前多数质粒标准分子只用于研究,未能成为国家级标准物质。因此,按照国家一级标准物质技术规范,研制了用于检测转基因水稻华恢1 号的质粒标准分子,内容包括质粒分子的构建、纯度分析、特异性检测、可替代性研究、均匀性检验、稳定性考察、定值与不确定度评估。结果表明,该质粒分子标准物质半年内稳定,可替代基因组作为华恢1 号定量的阳性标准。
blm 基因的突变可导致Bloom 综合症(BS),Bloom 综合症是一种罕见隐性常染色体遗传疾病,患者遗传不稳定并易患多种类型癌症。临床发现BS 患者细胞中的BLM 的RecQ-Ct 区域的1 036 位半胱氨酸残基发生突变。运用生物信息学及分子生物学技术,通过两轮重组PCR,构建985 位和1 036 位氨基酸突变的BLM 解旋酶多点突变基因,克隆到载体pET-28a 中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。分离纯化获得了高纯度(>95%)的双突变型BLM 解旋酶,并对其进行了Western blotting鉴定。这些结果可为进一步研究BS 的致病机制奠定基础。