生物技术通报

蛋白质组学在农业生物科学研究中的应用

刘洋;刘琳;晏月明;宋未;

2008, 0(03): 1-7.

摘要 ( 129 )

PDF (195KB) ( 400 )

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蛋白质组学是后基因组时代的新兴研究领域,详细介绍了蛋白质组学的原理和方法在农业生物科学研究中的最新应用进展,提出了蛋白质组学技术目前所面临的问题,并展望了今后的发展前景。

β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达研究进展

韩笑;陈介南;王义强;何钢;刘海波;谭力;

2008, 0(03): 8-12.

摘要 ( 207 )

PDF (262KB) ( 1536 )

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β-葡萄糖苷酶是一类重要的纤维素酶,广泛的存在于各种生物体内,具有重要研究价值。详细介绍了β-葡萄糖苷酶的性质与结构,微生物、植物β-葡萄糖苷酶基因的克隆情况,及在大肠杆菌和酵母中表达方面的研究。

骨胶原多肽的制备及功能特性研究进展

谢静;王传花;李珂;李宗军;

2008, 0(03): 13-16.

摘要 ( 125 )

PDF (187KB) ( 500 )

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鲜骨含有人体需要的多种营养物质,但不易直接食用,利用酶法将骨胶原蛋白水解成胶原多肽不仅有利于人体消化吸收,也为鲜骨的增值利用找到新的途径。胶原多肽以其优良的功能特性已经越来越受到人们的青睐。简要介绍来源于鲜骨中的胶原蛋白及其活性肽的研究现状和利用状况。

动物热激转录因子的进化类型及其功能研究进展

郑井元;黎定军;成新跃;杨宇红;谢丙炎;

2008, 0(03): 17-24.

摘要 ( 147 )

PDF (271KB) ( 405 )

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生物体暴露在高温和其它一些化学或者生理胁迫的环境中能诱导机体产生热激蛋白。真核生物中热激蛋白基因的表达受热激转录因子的调节。正常生长条件下,热激转录因子呈无活性的单体状态,当生物体处在热激等胁迫环境中时,热激转录因子会立即转换成有活性的三聚体并进入细胞核中与热激蛋白基因的热激元件结合,从而激活热蛋白激基因的转录。综述了近年来4种热激转录因子在生物体热应激反应中的作用,重点讨论了热激转录因子家族成员功能上的新发现。

转基因牲畜乳腺生物反应器的发展及应用

潘凌霄;杜启科;陆家海;

2008, 0(03): 25-29.

摘要 ( 117 )

PDF (304KB) ( 489 )

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利用转基因牲畜乳腺生产人类重组蛋白方法能够获得高效、经济、安全、足量的药用蛋白。对转基因牲畜乳腺生物反应器的发展过程、制备技术、获得要素以及研究进展加以综述,并对其未来发展方向进行了展望。

几种新型细胞器植物生物反应器的研究

李珺;

2008, 0(03): 30-32.

摘要 ( 118 )

PDF (87KB) ( 399 )

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细胞器植物生物反应器因有效提高外源蛋白的表达量及降低蛋白提取和加工等下游技术的成本,在现在商业及产业化进程中更具竞争力而成为植物生物反应器研究领域中新的热点。对叶绿体、油体、淀粉体细胞器植物生物反应器的特点及研究进展进行阐述。

禾本科植物内生菌研究进展

王瑶瑶;韩烈保;曾会明;

2008, 0(03): 33-38.

摘要 ( 144 )

PDF (171KB) ( 981 )

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从19世纪到现在,国际上已有许多关于植物内生菌的研究报道,无论是它在草坪草和牧草中的生态经济价值,还是它所涉及相关领域如医学、病理,都引起人们对它的重视和关注。综述了禾本科内生菌的种类、抗性机制及其应用,并据此提出了关于内生菌研究的一些问题,从而为进一步研究内生菌在禾本科植物中的作用提供参考。

细菌抗菌肽的研究进展及其应用

马文山;廖富苹;范雪云;战伟;

2008, 0(03): 39-43.

摘要 ( 197 )

PDF (296KB) ( 2343 )

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概述了抗菌肽的分类和作用机制;着重介绍了细菌抗菌肽的分类、研究近况、开发利用状况,指出其广泛的应用前景。

RNAi—分子免疫系统

郑玉姝;赵朴;贾贝贝;刘兴友;

2008, 0(03): 44-46.

摘要 ( 145 )

PDF (117KB) ( 592 )

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RNA干扰(RNA interference,RNAi)或RNA沉默是广泛存在于从植物到哺乳动物的真核生物体中小RNA诱导的基因沉默机制。该领域新的研究进展清楚表明在植物和动物中RNAi起着天然抗病毒作用。因此,RNAi常被视为有效的分子免疫系统。深入理解该分子免疫系统非常有助于揭示一些病毒病的致病机制和开发有效的抗病毒疗法。因此,就该分子免疫系统的研究进展作以综述。

生物技术领域中的可专利主题

唐丽莎;余龙;

2008, 0(03): 47-49.

摘要 ( 126 )

PDF (86KB) ( 478 )

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生物技术产业是一个高投资、高风险的产业,在各种筹集资金、规避风险的方案中,申请专利成为各国科研工作者和企业家的首选。要成功的获得专利权,首先要了解哪些主题是能够得到专利保护的。各个国家和地区对专利授权的标准不尽相同,通过分析原因和举例说明的方式详细阐述了我国对生物技术领域不予授权的主题。只有不属于这些不可授权主题的发明创造,才有可能成功地获得专利授权。

质谱技术及其在后基因组时代中的应用

田双起;秦广雍;李宗伟;王雁萍;陈林海;谈重芳;李宗义;黄新;常胜合;

2008, 0(03): 50-53.

摘要 ( 124 )

PDF (115KB) ( 632 )

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蛋白质组学的建立开辟了功能基因组学研究的新领域,为研究蛋白质水平的生命活动展现了更为崭新的思路和广阔的前景。质谱技术能准确测量肽和蛋白质的相对分子质量、氨基酸序列及翻译后修饰,成为连接蛋白质与基因的重要技术。质谱技术联合蛋白质组学多角度、深层次探索生命系统分子本质成为现阶段生命科学研究领域。简要综述了肽和蛋白质等生物大分子质谱分析的原理、方式和应用,并对其发展前景做出展望。

DNA改组技术在酶工程中的应用

刘莹;曹健;王中太;杨永刚;黄亮;

2008, 0(03): 54-56.

摘要 ( 150 )

PDF (85KB) ( 334 )

相关文章 | 计量指标

DNA改组技术是一种应用最广泛且简单有效的分子定向进化方法。它是一种高通量的随机突变筛选技术,可以对目的基因进行多次重组和选择,得到性质优良的突变文库。介绍了DNA改组技术的原理及其在酶工程中的应用。

地高辛标记探针Southern印迹杂交技术要点及改进

刘立鸿;许璐;汪凯;张富春;马正海;

2008, 0(03): 57-59.

摘要 ( 150 )

PDF (85KB) ( 457 )

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Southern印迹杂交技术是检测特定DNA片段的常规方法之一,其操作程序繁琐,对基因组DNA的提取、纯化、酶切等均有较高要求,要获得理想杂交结果需要反复摸索。总结地高辛标记探针Southern印迹杂交的技术要点,并结合具体操作提出改良方案。

抗体分离纯化技术的研究进展

侯越;罗奋华;吴应积;

2008, 0(03): 60-62.

摘要 ( 259 )

PDF (82KB) ( 707 )

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制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低,将直接影响试验的成败。抗体的制备有两个途径:一是一般通用的方法,以纯化的抗原免疫动物,获得多克隆抗体;二是应用杂交瘤技术制备单克隆抗体。但不论用何种技术制备的抗体都需要进行纯化。重要的是根据抗体的性质和来源选择一个合适的分离纯化方法。对当前的纯化方法进行了一个简要的综述。

分子标记技术在烟草种质遗传多样性研究中的应用进展

尚志强;

2008, 0(03): 63-65.

摘要 ( 96 )

PDF (88KB) ( 416 )

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DNA分子标记作为新发展起来的一种遗传标记形式,凭借其可靠有效等优点,在农业科学研究中的应用越来越广泛。综述了几种分子标记技术(RAPD、AFLPI、SSR)在烟草种质资源中的应用进展,分析了分子标记技术在烟草种质资源及遗传多样性研究中存在的问题及今后发展方向。

孟山都大力支持耶鲁-北京农业生物技术中心

汪开治;

2008, 0(03): 65-65.

摘要 ( 135 )

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<正>Ag Biotech Reporter 2008年25卷1期13～15页报道:耶鲁大学-北京大学联合中心为便于进一步理解植物生物学,从而旨在改良农作物的生产,已从孟山都公司对联合中心获得为期5年之久的继续支持。

草坪草转基因育种技术的应用和发展

姚娜;韩烈保;曾会明;徐冰;

2008, 0(03): 66-70.

摘要 ( 126 )

PDF (143KB) ( 323 )

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转基因技术在草坪草育种中已得到广泛应用,成为转基因育种的主要手段之一。主要概述了转基因常用的方法,转基因目标,转基因植株的检测主要方法和步骤,以及现在草坪草转基因面临的主要问题。

人血清白蛋白-C肽融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达

周利苹;张莲芬;雷楗勇;张文婷;蔡燕飞;金坚;

2008, 0(03): 71-75.

摘要 ( 121 )

PDF (607KB) ( 634 )

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目的构建重组表达人血清白蛋白(HSA)-C肽(CP)融合蛋白的毕赤酵母表达菌株。方法根据表达系统的密码子偏好性优化CP基因,酶切连接pBlue-HSA质粒(HSA1 800bp)和CP(100bp)基因,将HSA-CP融合基因双酶切后插入分泌表达载体pPIC9K中,重组质粒pPIC9K-HSA-CP经SalⅠ线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,表型筛选Mut+转化子。PCR鉴定后,用甲醇诱导摇瓶分泌表达。结果融合基因约为1 900bp,序列测定正确。SDS-PAGE分析表明表达融合蛋白的相对分子量约为70kD,摇瓶培养表达量为140mg/L,Western blot鉴定显示表达的融合蛋白为HSA和CP的杂合分子。结论实现了HSA-CP融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达,细胞活性研究显示HSA-CP融合蛋白对人胚肾293细胞的生长具有一定的促进作用。

HBV前S2蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定

赖梅梅;王雪梅;张君;蔡雪飞;郑健;黄爱龙;

2008, 0(03): 76-80.

摘要 ( 111 )

PDF (262KB) ( 272 )

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目的克隆表达HBV前S2蛋白,用纯化的重组蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗HBV前S2蛋白的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法利用含双拷贝乙肝病毒adw2亚型基因全序列的质粒pEcob6,经PCR方法扩增出HBV前S2片段,在GST表达系统中表达,表达产物用谷胱甘肽亲和层析纯化后,用于免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗前S2蛋白的mAb,采用间接ELISA方法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA方法鉴定mAb相对亲和力。结果获得一株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞7A6;相对亲和力均在107以上。Western blot显示该株mAb能特异识别重组前S2蛋白。结论成功地制备出抗HBV前S2蛋白的一株mAb。

用生物信息学方法确定丙型肝炎病毒基因分型的最佳区域

万祥辉;曾照芳;杨细媚;

2008, 0(03): 81-83.

摘要 ( 120 )

PDF (321KB) ( 347 )

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从Genbank中筛选出15条对各成熟肽区域有注释来源于不同国家地区的丙型肝炎病毒全基因组序列,分别对5′UTR区,core区,E1区,E2区及NS5B区建系统进化树。结果发现以5′UTR区建树,基因分型不完全正确而以core区、E1区、E2区及NS5B区建树,基因分型均完全正确,但同一基因型间的核苷酸演化距离存在差异。计算5条1a型序列的core区、E1区、E2区、NS5B区的核苷酸演化距离并和全基因组序列核苷酸演化距离比较。结果发现NS5B蛋白区基因分型最能反映病毒株的演化关系。用生物信息学方法,比较丙型肝炎病毒的5个常用的基因分型区域,确定NS5B区为丙型肝炎病毒基因分型的最佳区域。

雌激素受体a基因多态性与原发性肝癌的相关性研究

张伟;时德;杜成友;罗放;

2008, 0(03): 84-86.

摘要 ( 115 )

PDF (270KB) ( 510 )

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目的探讨西南地区雌激素受体(a estrogen receptor a,ERa)基因多态性与原发性肝癌关系。方法选择西南地区100名原发性肝癌患者为实验组,100名非肝病人群作为正常对照组。应用分子生物学的方法分析ERa基因1号内含子内切酶PvuⅡ,XbaⅠ限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorph-ism,RFLP),观察ERa基因多态性基因型在实验组与对照组中的基因型分布。RFLP用PP、Pp、pp(PvuⅡ)和XX、Xx、x(x XbaⅠ)来表示。结果P基因型频率实验组为32%,对照组为49%,OR值:0.490。X基因型频率实验组为33.5%,对照组为20.5%,OR值:1.954;PvuⅡ和XbaI限制性片段长度多态性在两组中均呈多态性分布。结论ERa基因多态性与原发性肝癌有关,P等位基因可能是其保护因素;X等位基因可能是其危险因素。

重组人促性腺激素释放激素及导肽的分离纯化与活性分析

金元昌;向育君;李景鹏;

2008, 0(03): 87-90.

摘要 ( 132 )

PDF (579KB) ( 523 )

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对含重组人促性腺激素释放激素(GnRH)及导肽(LEP)的工程菌株进行诱导表达,分离纯化GnRH/LEP并进行生物学活性分析。工程菌IPTG诱导,收获的菌体经超声破碎后,裂解液用Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化GST-GnRH/LEP融合蛋白,经CNBr裂解、Sephadex G-25柱脱盐、QAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和RP-C18柱脱盐,得到纯度大于98%的重组GnRH/LEP。Western blot表明表达产物均具有GnRH抗原特异性。生物学活性分析表明:该表达产物可促进小鼠次级卵泡向成熟卵泡发育,可提高其血清中E2含量。

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜细胞内核心蛋白多糖基因表达的影响

程远;曾照芳;朱俊;

2008, 0(03): 91-94.

摘要 ( 97 )

PDF (939KB) ( 440 )

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利用外源性碱性成纤维细胞生长因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF)刺激体外培养的人正常牙周膜细胞。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞内decorin的基因表达的变化,研究bFGF对体外培养的人牙周膜细胞内核心蛋白多糖(decorin)的作用,进一步探讨bFGF抑制I型胶原的作用机制。发现bFGF刺激牙周膜细胞后能促进牙周膜细胞的增殖,bFGF抑制decorin的合成是bFGF促进牙周膜细胞增殖的重要调节因素之一。

基于纳米金的显色基因芯片快速检测病原微生物

鲁卫平;顾大勇;王华;安琳;周元国;

2008, 0(03): 95-98.

摘要 ( 111 )

PDF (236KB) ( 718 )

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为构建一种新型的比色芯片,以实现对临床常见感染病原微生物的快速、准确地检测和鉴定。采用纳米金标记巯基修饰的各待检病原微生物的特异性基因片段,与相应的以各待检靶序列的特异性寡核苷酸探针构建成的基因芯片杂交,并通过结合银染反应将杂交信号被放大形成裸眼可见的显色信息来判读检测结果。该芯片技术检测时间短,最低检测值达100fmol/L。操作方法简单,不需要特殊设备,能部分满足临床检测的通量要求,具有很好的临床应用前景。

结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法

崔静;黄爱龙;张文露;

2008, 0(03): 99-102.

摘要 ( 195 )

PDF (236KB) ( 492 )

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通用引物与载体多克隆位点两端序列互补,将目的片段构建入载体pGEM-T Easy中,利用载体通用引物M13F和M13R结合片段特异引物进行菌液PCR反应。用PCR产物电泳结果来筛选阳性克隆并鉴定目的片段插入方向,同时能有效对短插入片段重组子进行筛选与鉴定。最终以DNA测序结果来验证,与测序结果一致,显示通用引物PCR方法对阳性克隆的筛选和鉴定优于传统酶切和普通PCR鉴定方法,能够弥补传统方法的不足,且简便快速,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段。

狂犬病病毒CVS株核蛋白基因的原核表达、纯化及鉴定

李江涛;李轶女;殷相平;邹媛媛;张志芳;柳纪省;

2008, 0(03): 103-106.

摘要 ( 137 )

PDF (396KB) ( 471 )

相关文章 | 计量指标

用RT-PCR技术对狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因进行扩增,经克隆与序列分析,该基因编码450个氨基酸残基。将目的基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET-N,将其转化表达菌BL21(DE3),于37℃1.0mmol∕L IPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为54kD处出现一新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。质谱鉴定的结果表明成功表达了RV N蛋白,为狂犬病的进一步研究奠定了基础。

家蝇幼虫抗菌肽的超声诱导及分离纯化和活性研究

陈曼;文阳安;周义文;涂植光;

2008, 0(03): 107-109.

摘要 ( 104 )

PDF (303KB) ( 401 )

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目的:分离纯化家蝇(Musca domestica)幼虫免疫血淋巴中的抗菌肽,研究抗菌肽的性质和抑菌特性。为进一步研究家蝇幼虫抗菌肽的产生及应用提供实验基础。方法:通过超声处理诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,结合高速离心,两步CM-Sepharose离子交换层析,冷冻干燥浓缩等步骤,分离得到一种具抗菌活性的蛋白质。用Tricine-SDS-PAGE鉴定抗菌肽的纯度和性质,抑菌试验分析抗菌肽的抑菌特性。结果:300W,50Hz超声处理60s能够诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示为一条带,相对分子量大约为5.8kD。纯化蛋白对阴沟肠杆菌,绿脓杆菌等G-杆菌的抑菌活性较强,而对金黄色葡萄球菌效果不显着。结论:诱导和纯化了一种家蝇幼虫抗菌肽,为此类活性物质的分离纯化提供了有效的方式。

内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达

王瑾;邬敏辰;周晨妍;

2008, 0(03): 110-114.

摘要 ( 139 )

PDF (399KB) ( 480 )

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根据绿色木霉(Trichoderma viride)WL 0422菌株内切葡聚糖酶基因egⅡ的cDNA序列,设计特异引物,以重组质粒pTG19-T-egⅡ为模板,扩增得到全长1 194bp的egⅡ成熟肽cDNA片段。将该片段分别克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-28a(+)和毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K中,并在大肠杆菌Rosse(t DE3)和毕赤酵母GS115中进行了表达。重组大肠杆菌表达蛋白占菌体总蛋白的15%,表达产物无内切葡聚糖酶活性。重组毕赤酵母经甲醇诱导实现了分泌表达,在摇床水平上酶活性达到2 788U/ml。酶学性质分析表明,该酶作用的最适pH为4.5,pH 3.5～6.0范围内酶活性保留在80%以上;最适温度为50℃,55℃以下酶的稳定性在90%以上。

3-甾酮-1-脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达及甾体转化研究

李玉;王稳航;刘逸寒;路福平;杜连祥;

2008, 0(03): 115-118.

摘要 ( 131 )

PDF (863KB) ( 454 )

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将简单节杆菌3-甾酮-1-脱氢酶基因(ksdD)克隆到大肠杆菌表达载体pET-22b(+)上,构建重组质粒pET-ksdD,利用IPTG诱导酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达,4h后取样,分别对超声破碎后的上清和沉淀进行SDS-PAGE和酶活分析,结果表明表达出的3-甾酮-1-脱氢酶的分子量大约为56kD,超声破碎后的细胞破碎液对4-AD的转化率较简单节杆菌提高了近10倍。

枯草芽孢杆菌SC2-4-1葡聚糖酶基因gluB的克隆及序列分析

朱辉;丁延芹;田方;姚良同;杜秉海;

2008, 0(03): 119-122.

摘要 ( 128 )

PDF (342KB) ( 361 )

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β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性检测结果表明,从辣椒根际筛选的拮抗菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SC2-4-1能产生β-1,3-1,4-葡聚糖酶。以菌株SC2-4-1的基因组DNA为模板,用PCR方法克隆了该菌的葡聚糖酶基因gluB,其开放阅读框为711bp,编码237个氨基酸。Blast分析,该序列与已报道的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)ATCC 842的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因gluB相似性为85%。所得基因序列的系统发育分析显示,该基因属于β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因。DNAMAN软件比对,所得葡聚糖酶氨基酸序列具有催化裂解β-1,3-和β-1,4-糖苷键的葡聚糖酶活性位点。

黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶基因的克隆与序列分析

杨迪;高艳玲;路福平;周丽娜;

2008, 0(03): 123-127.

摘要 ( 126 )

PDF (653KB) ( 433 )

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以黑曲霉(A.niger)TCCC41013的总RNA作为模板,通过RT-PCR扩增出含自身信号肽的脯氨酸蛋白内肽酶基因,将其插入pUCm-T载体上,经PCR和酶切鉴定后进行测序并分析。所克隆的PEP基因全长为1 581bp,编码526个氨基酸残基,成熟肽为504个氨基酸残基。与GeneBank中已报道的A.niger CBS513.88的PEP序列同源性最高,达到99.75%。脯氨酸蛋白内肽酶是一种新型的丝氨酸蛋白酶,黑曲霉PEP与已克隆的其他菌种的PEP同源性不高。

枯草芽孢杆菌MH25 Iturin A操纵子的克隆与分析

杜志兵;丁延芹;姚良同;朱彭玲;于素芳;杜秉海;

2008, 0(03): 128-131.

摘要 ( 123 )

PDF (534KB) ( 487 )

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根据已知非核糖体肽合成抗生素操纵子的保守序列设计引物,从对棉花立枯病有很好拮抗作用的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)MH25菌株中克隆相关操纵子。获得了枯草芽孢杆菌MH25的一个非核糖体肽合成抗生素操纵子序列,其包括4个ORF(ORF1,ORF2,ORF3,ORF4),与枯草芽孢杆菌RB14的ituD,ituA,tiuB和ituC的同源性分别为99%,98.70%,98.99%和99.48%,4个ORF编码的氨基酸序列与ItuD,ItuA,ItuB,ItuC的相似性分别为98%,98.54%,98.69%和98%。然后将4个ORF分别进行结构域分析,ORF3的14 779～14 963序列与ituB相对应区域的相似性为86.24%。该操纵子的启动子区为TATACACA-16bp-TAGGAT,与σA-10和-3(5 TTGACA-17bp-TATAAAT)不同。枯草芽孢杆菌MH25的Iturin A操纵子序列已在GenBank中注册,登陆号为EU263005。

从基因工程乳酸菌中高效提取苯丙氨酸解氨酶的方法研究

陈星;王璞;姚滢秋;肖白;

2008, 0(03): 132-134.

摘要 ( 95 )

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为从高表达苯丙氨酸解氨酶(PAL)的基因工程乳酸乳球菌NZ3900/pNZ8149-palart中有效提取所表达的PAL酶,针对乳酸乳球菌的特点,结合各种物理、化学、生物学等方法,探索出一条简便、高效的技术路线。对提取物进行了酶活性测定、分析及细菌活性鉴定。结果表明,该混合法可以完全导致细菌死亡,所提取的酶蛋白结构完整,其酶活性达到了等量活菌的92.5%,且该方法中所用到的各种试剂对体外培养细胞的生长无明显影响,为PAL酶在科研及生物医药领域的应用提供了可靠来源。

杜氏盐藻完整叶绿体的分离及其蛋白提取

贾岩龙;柴玉荣;曲东京;刘红涛;薛乐勋;

2008, 0(03): 135-138.

摘要 ( 167 )

PDF (174KB) ( 882 )

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应用高压破碎及蔗糖密度梯度离心的方法,分离出杜氏盐藻的完整叶绿体,随后用冻融法和研磨法分别提取叶绿体蛋白,并通过蛋白定量和SDS-PAGE凝胶电泳对两种蛋白提取方法进行比较,确立了一套适用于杜氏盐藻叶绿体分离和蛋白提取、定量以及电泳的方法。结果表明:用高压破碎结合蔗糖密度梯度离心的方法能够获得完整且较纯的盐藻细胞叶绿体;SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,冻融法提取叶绿体蛋白效率高,电泳条带清晰,蛋白数量较多,蛋白齐全。为下一步在亚细胞水平进行杜氏盐藻耐盐机制的蛋白组学研究奠定了基础。

九种绢蒿属植物过氧化物酶同工酶分析

路丹;贺学礼;刘媞;赵丽莉;

2008, 0(03): 139-142.

摘要 ( 124 )

PDF (475KB) ( 408 )

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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对9种绢蒿属[Seriphidium(Bess.)Poljak.]植物过氧化物酶(POD)同工酶进行分析。结果表明,供试材料共出现了57条酶带,且种间带数有所不同,最多的为沙湾绢蒿S.sawanense有9条酶带,最少的为新疆绢蒿S.kasschgaricum只有4条酶带。每种植物的POD大致可分为A,B两区,其中酶带数量较多,活性较强,分布较为集中的是B区,表明各供试植物在酶谱特征以及种间相似程度上均有明显差异,并根据电泳显示的不同种条带分布,绘出了酶谱类型图及聚类图,且聚类结果与现行的分类结果有一定出入。

RS基因的植物表达载体和酵母表达载体构建

方珊茹;阙友雄;林剑伟;陈如凯;

2008, 0(03): 143-147.

摘要 ( 114 )

PDF (536KB) ( 380 )

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白藜芦醇合酶(RS)是Res生物合成的关键酶之一,它催化1分子4-香豆酰辅酶A和3分子丙二酰辅酶A反应合成Res。以花生中克隆的RS基因为基础,成功构建了RS基因的以Ubi为启动子的单子叶植物表达载体pBIL-RS,为以后的基因工程遗传转化果蔗和其他单子叶植物改良其品质提供条件。同时构建了酵母表达载体pVT102U-RS,为下一步研究真核表达蛋白的生物活性提供条件,并为利用酵母生产Res提供了可能。

转基因油菜后代的农艺性状表现及其抗虫性研究

杜建中;孙毅;曹秋芬;郝曜山;刘龙龙;贺健;

2008, 0(03): 148-152.

摘要 ( 128 )

PDF (678KB) ( 369 )

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以农杆菌介导法转几丁质酶基因和蝎毒蛋白基因的晋4和H165油菜种子为试材。采用PCR检测、农艺性状调查、田间抗虫鉴定等技术,对转基因植株及其后代进行了选育研究。T1、T2和T3代材料的PCR检测结果显示目的基因在转基因植株及其后代中可稳定遗传;抗虫鉴定结果证明转基因油菜植株的抗虫性得到提高,转基因株系的被害率、被害程度明显小于相应对照,转基因株系中菜粉蝶幼虫的存活率低于对照,而且存活虫的发育进程比对照缓慢;农艺性状调查结果证实,转基因手段对油菜植株的角果数、角粒数和千粒重等性状没有太大影响。根据上述结果,在T3代时,筛选得到J5-1J、5-2、H5-1和H11-1四个纯合的转基因油菜株系。

转基因作物田间试验的频次分析

卢长明;

2008, 0(03): 153-161.

摘要 ( 102 )

PDF (963KB) ( 536 )

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通过对加拿大转基因作物田间试验数据库19年数据的统计分析,揭示转基因作物研究的特点与发展趋势。采用EXCEL"数据透视表与数据透视图"功能进行数据分析。分析结果表明,至2006年8月止,加拿大转基因作物田间试验累计达6 927次,涉及31种作物,20多种性状和40多家公司或研究机构。1988～1998年间,试验次数呈指数方式上升,其后呈乘幂方式下降。2006年试验物种数由最高峰时期的22个降到12个,其中油菜的田间试验次数占81%。80%以上的转基因作物田间试验由孟山都和拜耳等7～8家私人公司完成。转基因田间试验的频次分布反映了转基因技术应用和发展的自身规律,是利益与风险博弈的结果。结论是只有经济价值高、风险小、消费者容易接受的转基因产品才有广阔的产业化前景。建议我国加强转基因技术在非粮食作物的应用,重视引进消化和加强转基因作物安全生产体系的建设,促进转基因技术的产业化应用。

4株猪链球菌2型分离株主要毒力因子(MRP、EF)的全基因序列分析

秦春圃;

2008, 0(03): 161-161.

摘要 ( 95 )

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<正>江苏农科院兽医研究所与南京农业大学倪艳秀、段志涛、何孔旺和陆承平等4位牧医研究工作者选取的猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人畜共患病病源菌,其中溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)是其重要的2种毒力因子。

小桐子ISSR-PCR体系的优化

王桂娟;陈茂盛;向振勇;

2008, 0(03): 162-165.

摘要 ( 106 )

PDF (403KB) ( 359 )

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采用正交试验设计方法,建立了小桐子ISSR-PCR反应体系和扩增程序。结果表明,在20μl反应体系中含有1×PCR缓冲液、200#mol/L dNTP、0.5μmol/L引物、2.0mmol/L MgCl2、0.5U Tag DNA聚合酶和90ng模板DNA最适用于小桐子ISSR-PCR扩增。适宜的扩增程序为94℃7min;94℃1min,44℃～56℃(退火温度随引物不同而定)45s,72℃1min,35个循环;72℃7min;4℃保存。

余甘子ISSR反应体系的优化

钟凤林;王江波;潘东明;郭志雄;林琳;李开拓;尤桂春;

2008, 0(03): 166-169.

摘要 ( 110 )

PDF (498KB) ( 367 )

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应用ISSR技术开展余甘子遗传变异分析、辅助育种、品种鉴定、系统进化等研究,以(TC)8C为引物,采用正交设计和单因素试验,研究余甘子基因组DNA的浓度、退火温度、引物浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶用量对余甘子ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适宜于余甘子ISSR分析的扩增体系:20μl的反应体系中采用25ng的模板DNA、0.35μmol/L ISSR引物、1.25U Taq酶,0.3mmol/L dNTPs,引物(TC)8C的最佳退火温度为51.7℃。

植物生长调节剂对鸡冠花愈伤组织生长及花色素苷积累的影响

邓日烈;王惠珍;吴文花;刘丽屏;聂呈荣;

2008, 0(03): 170-173.

摘要 ( 112 )

PDF (607KB) ( 449 )

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通过不同种类和水平植物生长调节剂对鸡冠花愈伤组织生长及花色素苷积累的影响。试验实验结果表明:2,4-D0.2+BA1,2,4-D0.2+KT5,NAA2+BA1和IAA2+BA1为适合愈伤组织生长和花青素积累的几种组合,其中以2,4-D0.2+BA1组合的培养基效果最好,愈伤组织鲜重增长最快且花色素苷产量最高。

微卫星DNA检测方法的研究

杜爽;仇雪梅;

2008, 0(03): 174-177.

摘要 ( 111 )

PDF (545KB) ( 783 )

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在检测牙鲆的微卫星变异时,对聚丙烯酰胺凝胶的种类、浓度及其银染方法进行了优化。实验总结了一套适用于微卫星检测的方法。该方法具有灵敏度高、凝胶透明度高、对环境污染小、条带清晰和染色时间短等特点,能显着提高检测分辨率,具有广泛的推广价值。

三角帆蚌内脏团珍珠培育部位的生物性状研究

施志仪;谢先中;何秀娟;

2008, 0(03): 178-181.

摘要 ( 166 )

PDF (737KB) ( 615 )

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用光镜对三角帆蚌内脏团珍珠培育部位进行组织学观察,该部位组织结构随性腺发育在不同时期发生变化:性腺发育前期,性腺滤泡萎缩,滤泡间充填丰富的结缔组织和平滑肌组织;发育后期,性腺滤泡丰满,滤泡间结缔组织和平滑肌减少。生化分析显示钙、蛋白、碱性磷酸酶、碳酸脱水酶在内脏团珍珠培育部位均有分布,但钙的含量比常规外套膜插核的部位少。研究结果说明内脏团具有珍珠生物矿化所需的生化条件,内脏团培育珍珠是可行的;但由于性腺组织的发育及钙贮存的不足会影响内脏团内珍珠的培育。

五种不同蛏类ITS2核苷酸序列分析

孟学平;张波;冒树泉;

2008, 0(03): 182-185.

摘要 ( 120 )

PDF (480KB) ( 338 )

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对5种不同蛏类的ITS2核苷酸序列进行扩增、测序及分析。结果表明:5种蛏类的509个序列位点中共有49个保守位点,402个变异位点,318个简约信息位点,84个单突变位点。5种不同蛏类遗传距离在1.194～3.173之间,总角截蛏和小刀蛏的遗传距离较近,而与其他3种蛏类的遗传距离较远,遗传距离在1.965～3.173之间。缢蛏、长竹蛏和细长竹蛏3种蛏之间的遗传距离较其他2种蛏近,遗传距离在1.194～1.318之间。同种蛏类不同个体之间的遗传距离很近,遗传差异很小。

一种新型电流型免疫传感器的ABA最优测定条件研究

李巍;萧浪涛;

2008, 0(03): 186-189.

摘要 ( 113 )

PDF (232KB) ( 304 )

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研究了一种基于纳米金/硫堇修饰金电极的ABA电流型免疫传感器的最优条件。该传感器利用硫堇是HRP与电极之间电子传递媒介体的原理,将硫堇和酶标抗体共价吸附于电聚合纳米金的金电极上,用BSA封闭可能存在的活性位点以避免非特异性吸附,最后加入ABA与一部分抗体结合降低电化学信号,用循环伏安法测得加入不同浓度ABA前后电化学信号差值,从而测得ABA的含量。主要对使用此传感器测定ABA时的最优化条件进行了研究。

2007年全球转基因作物商业化发展趋势

孙国凤;

2008, 0(03): 190-193.

摘要 ( 111 )

PDF (112KB) ( 494 )

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<正>1转基因作物商业化现状及发展趋势据ISAAA的Clive James报告称,在转基因作物商业化的第一个12年(1996～2007)中,由于能得到持续稳定的收益,农民种植转基因作物量逐年增加。2007年,全球转基因作物种植面积增长率达12%,即增加1 230万hm2,达到1.143亿hm2(2.824

一个烟草葡糖基转移酶基因启动子的克隆与诱导表达

秦春圃;

2008, 0(03): 193-193.

摘要 ( 111 )

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<正>中南民族大学生命科学学院李静、刘学群和王春台3位科研工作者利用从烟草中克隆的一个葡糖基转移酶基因(GT-like),通过PCR扩增得到该基因开放阅读框5′端-1150～0上游调控区,经序列分析表明该启动子序列含有多个基因表达调控元件。

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