园艺作物果实是人类膳食营养的重要来源,其发育过程和品质形成受到复杂遗传网络的精准调控。近年来,随着分子生物学与功能基因组学的发展,以微小RNA(microRNA, miRNA)为代表的非编码RNA作为一类重要的转录后调控因子,在果实发育与品质调控中的作用日益凸显。本文系统综述了miRNA在果实发育中的多重调控功能:首先概述了植物miRNA的保守生物合成途径及其在果实中的表达特征和现有资源;随后依据发育进程详细阐述了miRNA在坐果与早期果实形成、果实膨大、成熟转色与软化,以及品质形成中的核心调控模块与作用机制,特别是miR156/157-SPL、miR172-AP2、miR396-GRF、miR397-LAC、miR828/858-MYB、miR159-GAMYB2与miR164-NAC等模块在果实大小与形态塑造、成熟时序调控、色泽与风味形成、细胞壁改造及货架期维持等方面所发挥的关键作用;进而探讨了miRNA在不同胁迫条件下通过离子稳态、激素及活性氧信号等途径的耦合作用,调控果实发育与品质形成的特征;分析了基于miRNA的基因编辑、STTM和组织特异性表达等策略在分子育种中的应用潜力,并指出了目前该领域在功能验证、调控网络解析和育种实践等方面所面临的挑战。最后,展望了整合多组学、单细胞测序与人工智能等前沿技术,系统解析miRNA调控网络、推动果实性状分子设计育种的研究趋势,以期为深入理解miRNA调控果实发育的分子机理、推动其在园艺作物遗传改良中的应用提供系统的理论参考。